本文關(guān)鍵詞： miR- Caveolin- 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞 屏障障礙 蛋白尿　出處：《現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:探討miR-204對腎小球內(nèi)皮細(xì)胞(HRGECs)通透性及Caveolin-1(CAV1)表達(dá)的影響。方法:利用生物信息學(xué)方法預(yù)測以CAV1為靶基因的miRNA,miR-204為CAV1表達(dá)的調(diào)節(jié)miRNA。分別用子癇前期(PE)患者血清和正常血清處理HRGECs,q PCR法檢測miR-204表達(dá)水平。將體外培養(yǎng)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞(HRGECs)分為4組:過表達(dá)組(轉(zhuǎn)染miR-204 mimic),降表達(dá)組(轉(zhuǎn)染miR-204 inhibitor),轉(zhuǎn)染miR-204mimic NC(mimic陰性對照組)和轉(zhuǎn)染miR-204 inhibitor NC(inhibitor陰性對照組)。轉(zhuǎn)染48h后,熒光定量PCR及Western blot法檢測miR-204及CAV1 mRNA和蛋白表達(dá)水平,Evans-blue檢測HRGECs單層細(xì)胞對大分子蛋白的通透性改變。結(jié)果:PE血清可抑制HRGEC中miR-204表達(dá)(P0.05)。熒光定量PCR和Western blot結(jié)果顯示,與陰性對照組比較,miR-204過表達(dá)組中CAV1 mRNA表達(dá)量無明顯差異,CAV1蛋白表達(dá)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);miR-204降表達(dá)組中CAV1 mRNA表達(dá)量無明顯差異,CAV1蛋白表達(dá)量明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與陰性對照組比較,miR-204過表達(dá)組中HRGECs對大分子蛋白的通透性降低,miR-204降表達(dá)組中HRGECs對大分子蛋白的通透性提高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:miR-204可能通過抑制CAV1轉(zhuǎn)錄后翻譯從而調(diào)節(jié)其靶基因CAV1表達(dá),進(jìn)而影響腎小球內(nèi)皮細(xì)胞通透性,miR-204可能參與PE患者腎小球內(nèi)皮細(xì)胞尿蛋白形成的調(diào)節(jié)。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of miR-204 on the permeability of HRGECs and the expression of Caveolin-1 (CAV1) in glomerular endothelial cells. Methods: bioinformatics was used to predict the regulation of miRNA-miR-204 CAV1 expression targeting CAV1 gene. Serum and positive miRNAs of patients with preeclampsia were used respectively. In vitro cultured glomerular endothelial cells were divided into four groups: overexpression group (transfection of miR-204mimic miR-204 inhibitor, miR-204mimic NC(mimic negative control group) and miR-204 inhibitor NC(inhibitor negative group. In control group, 48 h after transfection, Fluorescence quantitative PCR and Western blot were used to detect the expression of miR-204 and CAV1 mRNA and protein. Evans-blue was used to detect the permeability of HRGECs monolayer cells to macromolecular proteins. There was no significant difference in the expression of CAV1 mRNA between the control group and the negative control group. There was no significant difference in the expression of CAV1 mRNA between the two groups. Compared with the negative control group, the permeability of HRGECs to macromolecular protein in the overexpression group was lower than that in the down-expression group, and the permeability of HRGECs to the macromolecular protein in the down-expression group of miR-204 was higher than that in the negative control group. Conclusion the CAV1 expression of the target gene may be regulated by inhibiting the post-transcriptional translation of CAV1, thus affecting the permeability of glomerular endothelial cells and the regulation of urinary protein formation of glomerular endothelial cells in PE patients.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院婦產(chǎn)科產(chǎn)科重癥監(jiān)護(hù)中心婦產(chǎn)科研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No:81570444) 國家科技部“十二五”支撐計(jì)劃項(xiàng)目(No:2014BAI05B05)
【分類號】：R714.2

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本文編號：1553048