以細胞篩為載體的玻璃化冷凍和慢速程序化冷凍保存人卵巢組織的效果比較
本文關鍵詞: 細胞篩 玻璃化冷凍 慢速冷凍 卵巢冷凍 生育力保存 出處:《生殖醫(yī)學雜志》2016年09期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的比較以細胞篩為載體的玻璃化冷凍與慢速程序化冷凍用于人卵巢組織冷凍的效果。方法人卵巢組織取皮質切塊后,隨機分為3組:新鮮組織對照組(F組)、慢速程序化冷凍組(S組)及以細胞篩為載體玻璃化冷凍組(V組)。卵巢組織冷凍復蘇后,固定切片后行蘇木素-伊紅染色,觀察卵泡形態(tài);使用TdT介導的dUTP缺口末端標記技術,觀察卵泡凋亡情況;部分卵巢組織體外培養(yǎng),隔日采集培養(yǎng)液后檢測雌二醇(E2)濃度。比較三組卵泡正常形態(tài)率、卵泡凋亡率及E2濃度。結果與F組原始卵泡正常形態(tài)率(91.1%)相比,V組原始卵泡正常形態(tài)率(88.1%)無顯著差異(P0.05),而S組原始卵泡正常形態(tài)率(79.6%)顯著下降(P0.001);V組初級卵泡正常形態(tài)率(74.2%)與S組(73.6%)相似,但兩組均低于F組(89.0%)(P0.05);凋亡檢測中,3組凋亡率無顯著差異(P0.05);體外培養(yǎng)2周,各組E2濃度持續(xù)上升,F組E2濃度顯著高于S組、V組(P0.001),而S組與V組E2濃度無顯著差異(P0.05)。結論以細胞篩為載體的玻璃化冷凍能較好地保存人卵巢組織,復蘇后組織體外培養(yǎng)后,還可持續(xù)分泌E2。
[Abstract]:Objective to compare the effects of vitrified cryopreservation and slow programmed cryopreservation on human ovarian tissue. They were randomly divided into three groups: fresh tissue control group (group F), slow programmed freezing group (group S) and vitrified cryopreservation group (group V) with cell sieve as carrier. Ovarian tissue was frozen and resuscitated, fixed sections were stained with hematoxylin and eosin, and follicular morphology was observed. TdT mediated dUTP Nick end labeling technique was used to observe follicular apoptosis, partial ovarian tissue was cultured in vitro and estradiol E2 concentration was measured after the next day culture medium. The normal morphological rate of follicles was compared among the three groups. Results there was no significant difference in normal morphology rate of primordial follicles (P 0.05) and normal morphology rate of primordial follicles in group S (79.6%) compared with group F (91.1%). Form rate (74.2) and group S (73.6). But both groups were lower than F group (P 0.05), the apoptosis rate of the three groups was not significantly different from that of F group (P 0.05), and cultured in vitro for 2 weeks. The concentration of E2 in group F was significantly higher than that in group S (P 0.001), but there was no significant difference between group S and group V (P 0.05). Conclusion the vitrified cryopreservation with cell sieve as carrier can better preserve human ovarian tissue, and after resuscitation, the tissue can be cultured in vitro after resuscitation. E2 can also be secreted sustainably.
【作者單位】: 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院北京協(xié)和醫(yī)院婦產科;
【基金】:2015年度默克雪蘭諾中國生殖醫(yī)學研究基金
【分類號】:R714.8
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