本文關(guān)鍵詞： 腫瘤相關(guān)巨噬細胞 exosome 卵巢癌 腫瘤異質(zhì)性　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景及目的：晚期卵巢癌是致死率較高的婦科惡性腫瘤,雖然各種診斷和治療方法在不斷進步,但其預(yù)后并沒有明顯的改善,5年生存率僅40%左右.隨著國內(nèi)外研究的不斷深入,腫瘤異質(zhì)性的研究成為卵巢癌研究的熱點,它是指腫瘤在生長過程中,經(jīng)過多次分裂增殖,其子細胞呈現(xiàn)出分子生物學(xué)或基因方面的改變,腫瘤從單克隆狀態(tài)逐漸轉(zhuǎn)變成多克隆狀態(tài)。學(xué)者們發(fā)現(xiàn)卵巢癌細胞與其腫瘤微環(huán)境的相互作用對于卵巢癌的進展、免疫抑制、轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)發(fā)揮調(diào)控作用.對于卵巢癌腫瘤異質(zhì)性的形成具有重要的影響。腫瘤相關(guān)巨噬細胞(tumor-associated macrophages, TAMs)是腫瘤微環(huán)境的重要組分,發(fā)揮免疫刺激或免疫抑制的作用,可能影響卵巢癌的進展過程。另一方面,卵巢癌細胞能夠分泌exosome,后者攜帶大量的生物活性物質(zhì),如蛋白質(zhì)、mRNA、 miRNA等,對腫瘤微環(huán)境發(fā)生影響,從而與卵巢癌的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移相關(guān).因此,我們擬通過進行細胞系實驗及卵巢癌組織免疫組化染色分析,來初步探索腫瘤相關(guān)巨噬細胞與卵巢癌腫瘤異質(zhì)性的相互作用,希望為卵巢癌的診治尋找新的靶點。薄型子宮內(nèi)膜是指在卵泡發(fā)育成熟時子宮內(nèi)膜厚度過薄,可能由宮腔手術(shù)及各種炎性疾病引起,對女性的生育能力造成不利影響。外源性雌激素是治療薄型子宮內(nèi)膜的常用方法。研究方法：1.使用差速離心法,分離并純化5株卵巢癌細胞(ES2、SKOV3、A2780,A2780-L, A2780-H)體外培養(yǎng)上清液中的exosome;使用western blotting對提取的exosome特異標記物進行檢測,使用透射電鏡對exosome的形態(tài)進行觀察及鑒定；2.體外誘導(dǎo)單核細胞系(THP-1)的細胞分化為巨噬細胞,并向培養(yǎng)液中加入卵巢癌細胞系來源的exosome,采用激光共聚焦顯微鏡觀察巨噬細胞對exosome的內(nèi)吞作用；3.將卵巢癌細胞系來源的exosome加入巨噬細胞培養(yǎng)液中進行誘導(dǎo),采用流式細胞術(shù)檢測并比較誘導(dǎo)前后巨噬細胞的表型變化；誘導(dǎo)前后的巨噬細胞分別與卵巢癌細胞進行共培養(yǎng),觀察巨噬細胞對卵巢癌細胞生物學(xué)行為的影響；4.對晚期卵巢癌患者卵巢癌原發(fā)灶、腹腔播散灶及復(fù)發(fā)卵巢癌病灶的組織芯片進行免疫組化染色,分析巨噬細胞數(shù)量及表型分布情況與治療、預(yù)后的關(guān)系。5.對經(jīng)過雌激素治療的薄型子宮內(nèi)膜患者的臨床資料進行收集,分析治療效果的相關(guān)因素及治療后的輔助生育結(jié)局。研究結(jié)果：1.不同組織學(xué)類型及不同侵襲性的卵巢癌細胞系均能夠分泌具有典型脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)的exosome,并且不同卵巢癌細胞系來源的exosome均表達exosome的特異標記物TSG101和Alix;2.5株卵巢癌細胞來源的exosome均能夠被巨噬細胞內(nèi)吞；3.5株卵巢癌細胞系來源的exosome均能夠使巨噬細胞表達M2型巨噬細胞標記分子CD163的水平增加,誘導(dǎo)后的巨噬細胞能夠增加卵巢癌細胞的增殖、遷移、侵襲能力(P0.05),降低ES2細胞對化療藥物的敏感性(P0.05)；4.在卵巢癌組織中,TAMs,特別是M2型巨噬細胞的密度與卵巢癌的病理分期、分化程度有關(guān)(P0.05),并且降低腫瘤對于化療藥物的敏感性(P0.05)；在卵巢癌的原發(fā)灶中,M2的密度與患者的總體生存時間和無進展生存時間有關(guān)(P0.05)。5.經(jīng)過雌激素治療后,92.1%的薄型子宮內(nèi)膜患者內(nèi)膜厚度能夠達到8cm。治療效果與治療前內(nèi)膜厚度和治療時間有關(guān)(P0.05)。治療成功的患者,在新鮮胚胎或冷凍-復(fù)蘇胚胎移植周期中的妊娠率與移植胚胎的質(zhì)量有關(guān)(P0.05)。結(jié)論：卵巢癌細胞分泌的exosome通過改變TAMs的極化表型,能夠?qū)δ[瘤微環(huán)境產(chǎn)生影響,進而使腫瘤細胞自身的生物學(xué)行為發(fā)生改變,促進腫瘤生長、進展、耐藥。M2型巨噬細胞在卵巢癌組織中的密度與卵巢癌的期別、分化程度及化療敏感性有關(guān),并且M2的密度可能成為能夠預(yù)測患者預(yù)后的指標。雌激素治療薄型子宮內(nèi)膜的效果與治療前子宮內(nèi)膜的厚度及治療時間長短有關(guān)。治療成功后患者的輔助生育結(jié)局與移植胚胎的質(zhì)量有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of tumor - associated macrophages ( TAMs ) on the development of ovarian cancer , and to explore the effect of tumor - associated macrophages on the growth , invasion and metastasis of ovarian cancer . The results showed that exosome of ovarian cancer cell line can secrete exosome with typical lipid bilayer membrane structure .

【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;豚鼠巨噬細胞經(jīng)P_(204)處理后的抗石英細胞毒作用[J];國外醫(yī)學(xué)參考資料(衛(wèi)生學(xué)分冊);1976年04期

2 鄧俠進;;巨噬細胞的抗癌作用[J];遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1979年02期

3 陸天才;;疾病對肺巨噬細胞的影響[J];煤礦醫(yī)學(xué);1982年01期

4 郭瑞清;祝彼得;;一種分離巨噬細胞的簡單方法[J];濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1990年02期

5 謝志堅;巨噬細胞異質(zhì)性[J];醫(yī)學(xué)綜述;2001年06期

6 饒艷;運動及神經(jīng)內(nèi)分泌對巨噬細胞功能的調(diào)節(jié)[J];體育與科學(xué);2002年05期

7 朱金元;;吸煙對肺巨噬細胞的影響[J];浙江醫(yī)學(xué)教育;2003年01期

8 張俊峰;過氧化物酶體增殖物激活受體與單核/巨噬細胞系[J];醫(yī)學(xué)綜述;2004年03期

9 韋錦學(xué);顧軍;;巨噬細胞的激活誘導(dǎo)死亡[J];生命科學(xué);2006年02期

10 李曉曦;郭寧;曹雪濤;;腫瘤相關(guān)巨噬細胞促進腫瘤生長與轉(zhuǎn)移的研究現(xiàn)狀[J];中國腫瘤生物治療雜志;2008年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 史玉玲;王又明;豐美福;;巨噬細胞激活作用的研究[A];中國細胞生物學(xué)學(xué)會第五次會議論文摘要匯編[C];1992年

2 吳國明;周輝;;巨噬細胞和創(chuàng)傷纖維化[A];2009年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2009年

3 李奇;王海杰;;透明質(zhì)酸對于淋巴結(jié)巨噬細胞運動的影響[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

4 劉革修;歐大明;劉軍花;黃紅林;廖端芳;;丙丁酚在體外能抑制巨噬細胞脂質(zhì)氧化介導(dǎo)的低密度脂蛋白氧化并調(diào)節(jié)氧化巨噬細胞的分泌功能[A];面向21世紀的科技進步與社會經(jīng)濟發(fā)展（下冊）[C];1999年

5 葉金善;楊麗霞;郭瑞威;;環(huán)氧化酶-2/前列腺素E_2在血管緊張素Ⅱ刺激巨噬細胞表達細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子中的作用[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

6 秦帥;陳希;孔德明;;構(gòu)建由綠色熒光標記巨噬細胞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚系[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝學(xué)術(shù)會論文匯編[C];2012年

7 武劍華;徐惠綿;;腫瘤相關(guān)巨噬細胞在胃癌中的相關(guān)研究[A];第9屆全國胃癌學(xué)術(shù)會議暨第二屆陽光長城腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

8 何軍;;血凝素樣氧化型低密度脂蛋白受體升高巨噬細胞內(nèi)膽固醇水平[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

9 宋盛;周非凡;邢達;;PDT誘導(dǎo)的凋亡細胞對巨噬細胞NO合成的影響[A];第七屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2010年

10 張磊;朱建華;黃元偉;姚航平;;血管緊張素Ⅱ?qū)奘杉毎?THP-1重細胞)凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體表達的影響[A];浙江省免疫學(xué)會第五次學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 通訊員 李靜 記者 胡德榮;惡性腫瘤巨噬細胞未必皆“惡人”[N];健康報;2014年

2 蘭克;以嘗試用巨噬細胞治癱瘓[N];科技日報;2000年

3 薛佳;免疫系統(tǒng)——人體的“衛(wèi)士”[N];保健時報;2009年

4 記者 胡德榮;鐵泵蛋白“維穩(wěn)”鐵代謝作用首次闡明[N];健康報;2011年

5 侯嘉 何新鄉(xiāng);硒的神奇功能[N];中國食品質(zhì)量報;2003年

6 唐穎 倪兵 陳代杰;巨噬細胞泡沫化抑制劑研究快步進行[N];中國醫(yī)藥報;2006年

7 劉元江;新發(fā)現(xiàn)解釋腫瘤為何易成“漏網(wǎng)之魚”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2007年

8 本報記者 侯嘉 通訊員 何新鄉(xiāng);今天你補硒了嗎[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

9 左志剛;升血小板藥使用注意[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

10 記者 許琦敏;“鐵泵”蛋白幫助回收鐵元素[N];文匯報;2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 周赤燕;巨噬細胞MsrA對動脈粥樣硬化的干預(yù)研究[D];武漢大學(xué);2013年

2 章桂忠;TIPE2蛋白調(diào)控細胞增殖和炎癥的機制研究[D];山東大學(xué);2015年

3 張瑜;DKK1抑制巨噬細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積及其相關(guān)分子機制[D];山東大學(xué);2015年

4 孟濤;異丙酚對心臟收縮功能的抑制作用及其對巨噬細胞分泌功能調(diào)節(jié)的機制研究[D];山東大學(xué);2015年

5 周興;基于酵母微囊構(gòu)建新型口服巨噬細胞靶向遞送系統(tǒng)的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 蔣興偉;Tim-3對巨噬細胞極化的調(diào)控機制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

7 劉伯玉;清道夫受體A介導(dǎo)小鼠巨噬細胞吞噬鉤端螺旋體研究[D];上海交通大學(xué);2013年

8 楊紹俊;miRNA-155介導(dǎo)ESAT-6誘導(dǎo)巨噬細胞凋亡的分子機制及其在結(jié)核診斷中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 翟光耀;單核/巨噬細胞Ly6C~(low)亞群在心肌梗死后瘢痕形成期的抗炎特性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

10 韓露;TRB3介導(dǎo)的脂肪組織巨噬細胞極化與糖尿病冠狀動脈病變關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馬春梅;AP0E~(-/-)小鼠TLR9介導(dǎo)巨噬細胞極化效應(yīng)對動脈粥樣硬化作用的研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張譯丹;鹽皮質(zhì)激素受體拮抗劑調(diào)控巨噬細胞表型對實驗性矽肺的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 盧文冉;HCV core蛋白作用的巨噬細胞培養(yǎng)上清對肝細胞生物學(xué)性狀的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 李文建;載脂蛋白E影響巨噬細胞因子表達及分型的機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 曹爽;高糖對巨噬細胞TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 寧程程;腫瘤相關(guān)巨噬細胞在子宮內(nèi)膜癌雌激素敏感性中的作用及機制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

7 高龍;PLD4在腫瘤相關(guān)巨噬細胞抑制結(jié)腸癌增殖中的作用研究[D];成都醫(yī)學(xué)院;2015年

8 任虹;感染期子宮頸癌U14細胞荷瘤小鼠抑制巨噬細胞CCL5分泌的機制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 李美玲;雙酚A對小鼠腹腔巨噬細胞極化影響的體外研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 劉瓊;黃芪多糖影響巨噬細胞向脂肪細胞趨化的作用及機制研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號：1505209