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卵巢癌相關(guān)成纖維細(xì)胞通過上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞SKOV3侵襲的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-01-28 01:29

  本文關(guān)鍵詞: 卵巢腫瘤 癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 侵襲 出處:《腫瘤學(xué)雜志》2016年12期  論文類型:期刊論文


【摘要】:[目的]研究癌相關(guān)成纖維細(xì)胞的條件培養(yǎng)基對(duì)卵巢癌細(xì)胞侵襲能力的影響及作用機(jī)理。[方法]原代培養(yǎng)人卵巢正常成纖維細(xì)胞(NOF)和癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAF),并收取條件培養(yǎng)基NOFcm和CAFcm。用無血清的培養(yǎng)基DMEM、NOFcm和CAFcm分別處理SKOV3細(xì)胞,誘導(dǎo)SKOV3細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),通過形態(tài)觀察和Western blot驗(yàn)證。形態(tài)上發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的SKOV3細(xì)胞,用transwell小室及三維培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞的侵襲能力的改變。[結(jié)果]CAF的條件培養(yǎng)基能在體外誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞SKOV3在形態(tài)上發(fā)生改變:細(xì)胞連接疏松,部分細(xì)胞呈梭形,且明顯下調(diào)E-cadherin蛋白表達(dá)量,明顯上調(diào)Vimentin蛋白表達(dá)量。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示CAFcm處理后的SKOV3穿透matrigel膠的細(xì)胞數(shù)(284.00±32.86)相比于無血清的DMEM組(60.60±11.72)和NOFcm組(116.60±14.22),數(shù)量明顯增多(P=0.000374和P=0.001258);三維培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中只有CAFcm組和NOFcm組能形成克隆球,而在無血清的DMEM組不能形成克隆球,CAFcm組(37.75±1.70)相比于NOFcm組(14.5+±1.29),形成的克隆球明顯增大,向外侵襲能力增強(qiáng),數(shù)量增多(P0.001)。[結(jié)論]卵巢癌CAF通過誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞發(fā)生EMT,進(jìn)而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的侵襲能力。
[Abstract]:[Objective] to study the effect and mechanism of conditioned medium of cancer-related fibroblasts on invasion ability of ovarian cancer cells. [Methods the primary culture of normal human ovarian fibroblasts (NOF) and carcinomatous fibroblasts (Cafs) were carried out, and conditioned media NOFcm and CAFcm.were used in serum-free medium DMEM. SKOV3 cells were treated with NOFcm and CAFcm, respectively, and SKOV3 cells were induced to develop epithelial mesenchymal transformation (EMT). Morphologic observation and Western blot test showed that SKOV3 cells were morphologically transformed into epithelial stroma. Transwell chamber and three-dimensional culture experiment were used to detect the change of cell invasion ability. [Results: the conditioned medium of CAF could induce the morphological change of ovarian cancer cell SKOV3 in vitro: the connection of the cells was loose, and some of the cells were fusiform. The expression of E-cadherin protein was down-regulated. Transwell invasion assay showed that the number of SKOV3 cells penetrating matrigel gel after CAFcm treatment was significantly increased (P < 0.05). 284.00 鹵32.86) compared with serum-free DMEM group (60.60 鹵11.72) and NOFcm group (116.60 鹵14.22). The quantity of Pu 0.000374 and Pu 0.001258 were increased obviously. In three dimensional culture experiment, only CAFcm and NOFcm could form clone spheres, but in serum-free DMEM group, clone spheres could not be formed. Compared with NOFcm group, CAFcm group (37.75 鹵1.70) significantly increased the formation of clone spheres and enhanced its outward invasion ability compared with NOFcm group (14.5 鹵1.29). The quantity increased P0.001. [Conclusion: ovarian cancer CAF can promote the invasion of ovarian cancer cells by inducing EMTs.
【作者單位】: 浙江省腫瘤醫(yī)院;
【基金】:浙江省自然科學(xué)基金(LY14H160010)
【分類號(hào)】:R737.31
【正文快照】: 目前,腫瘤微環(huán)境的研究是腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。腫瘤微環(huán)境不僅在腫瘤細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮重要作用,而且在腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)階段提供必要的支持[1,2]。腫瘤微環(huán)境中有多種細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì),其中最主要的細(xì)胞是癌相關(guān)成纖維細(xì)胞專題報(bào)道(cancer-associated fibroblasts,C

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