本文關鍵詞： 宮頸癌 Toll樣受體 小干擾RNA NF-κB信號通路 細胞增殖　出處：《中國病理生理雜志》2015年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)小干擾RNA(siRNA)是否通過NF-κB信號途徑下調Bcl-2而抑制宮頸癌細胞的增殖。方法:設計并合成針對TLR4基因的3條特異性siRNA)及陰性siRNA,并同時設立空白對照,然后用脂質體LipofectamineTM2000轉染細胞。通過半定量RT-PCR和Western印跡法分別檢測轉染前后He La細胞中TLR4 mRNA和蛋白表達水平,Western印跡法檢測p65及Bcl-2蛋白表達水平,MTT法和平板克隆檢測細胞增殖率,Annexin V-FITC/PI染色流式細胞術檢測細胞凋亡,流式細胞術檢測細胞周期。結果:3條針對TLR4基因的siRNA均能抑制TLR4的mRNA和蛋白表達,其中TLR4-siRNA-003的沉默效率最高。轉染TLR4-siRNA-003 48 h后細胞中TLR4的mRNA和蛋白表達水平分別下調62%和89%,p65及Bcl-2蛋白水平明顯下調,同時細胞增殖明顯受到抑制,細胞凋亡率顯著升高,細胞周期被阻滯于G1期。結論:TLR4特異性siRNA能夠有效沉默TLR4基因表達,并通過NF-κB信號通路下調Bcl-2而顯著抑制宮頸癌He La細胞的增殖。TLR4可能成為治療宮頸癌的一個新靶點。
[Abstract]:Objective: to study Toll like receptor 4 Toll-like receptor 4. TLR4). Whether down-regulation of Bcl-2 through NF- 魏 B signaling pathway inhibits the proliferation of cervical cancer cells. Methods: three specific siRNAs targeting TLR4 gene and negative siRNA were designed and synthesized. At the same time, blank control was established. Then the cells were transfected with liposome LipofectamineTM2000. He was detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot before and after transfection. The expression level of TLR4 mRNA and protein in La cells. The expression of p65 and Bcl-2 protein was detected by Western blot. Apoptosis was detected by flow cytometry with Annexin V-FITC / Pi staining. Results all three siRNA targeting TLR4 gene could inhibit the expression of mRNA and protein of TLR4. The silencing efficiency of TLR4-siRNA-003 was the highest. Transfection of TLR4-siRNA-003 48. The expression of TLR4 mRNA and protein were down-regulated by 62% and 89%, respectively. The levels of p65 and Bcl-2 protein were down-regulated, while the proliferation of cells was inhibited, and the apoptosis rate was significantly increased. Cell cycle was blocked in G1 phase. Conclusion siRNA specific to TLR4 can effectively silence the expression of TLR4 gene. And down-regulation of Bcl-2 through NF- 魏 B signaling pathway could significantly inhibit the proliferation of He-La cells. TLR4 may become a new target for the treatment of cervical cancer.
【作者單位】： 南昌大學第二附屬醫(yī)院腫瘤科;南昌大學第二附屬醫(yī)院消化內科;
【分類號】：R737.33
【正文快照】： 宮頸癌是嚴重危害女性健康的惡性腫瘤,我國宮頸癌的發(fā)生率位居世界第一,占世界每年新增病例的28.8%,居女性生殖道惡性腫瘤第1位[1]。宮頸癌由于對大多數(shù)抗癌藥物不敏感,所以首選治療為手術及放射治療,但是晚期或復發(fā)轉移患者效果欠佳,化療具有全身作用特點,所以尋求新的靶位基

【參考文獻】

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5 田首元;劉保江;;線粒體介導細胞凋亡和心肌保護新途徑[J];國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊;2005年06期

6 楊俊杰;馬洪;李靜;劉紅;張偉同;周永正;趙鵬;;鄰苯二甲酸二乙基己酯及代謝產物鄰苯二酸-單-2-乙基己酯對雄性幼鼠生精細胞凋亡的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2012年12期

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2 陳少賢;劉居理;劉曉穎;林秋雄;麥麗萍;朱杰寧;單志新;余細勇;楊敏;;三七總皂苷抗細胞凋亡作用與MIF/AMPK的關系研究[A];2011年中國藥學大會暨第11屆中國藥師周論文集[C];2011年

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【二級參考文獻】

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2 拉萊蘇祖克,買買提艾力;新疆維吾爾族婦女子宮頸癌活檢組織中人類乳頭狀瘤病毒DNA的檢測[J];中華婦產科雜志;1997年07期

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4 鄭秀惠;李力;陳竹欽;;~(252)锎中子放療對宮頸癌細胞凋亡和增殖的影響[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術會議論文匯編[C];2006年

5 張娜;李萬勝;;人IL-8基因對宮頸癌細胞侵襲、增殖能力的影響[A];第五屆全國中醫(yī)藥免疫學術研討會——暨環(huán)境·免疫與腫瘤防治綜合交叉會議論文匯編[C];2009年

6 夏咸梅;;宮頸癌細胞學篩查在基層的試行及推廣[A];中華護理學會全國腫瘤護理學術交流暨專題講座會議論文匯編[C];2010年

7 鄭秀惠;陳竹欽;李力;郭建新;;~(252)锎中子放療前后宮頸癌細胞凋亡的變化及療效觀察[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術會議論文匯編[C];2006年

8 陳紅;陳惠禎;吳緒峰;楊慶憶;劉詩權;;環(huán)孢菌素逆轉宮頸癌細胞耐藥性的研究[A];全國子宮頸癌暨湖北省婦科腫瘤專業(yè)委員會第五次婦科腫瘤學術會議論文匯編[C];2006年

9 袁成福;卜友泉;黃秀凝;程莉;汪長東;劉革力;易發(fā)平;宋方洲;;NFBD1/MDC1表達沉默對宮頸癌細胞生長與凋亡的影響[A];重慶市生物化學與分子生物學學術會議論文摘要匯編[C];2009年

10 田小飛;彭芝蘭;;VEGF-C對宮頸癌細胞增殖和凋亡的影響研究[A];中華醫(yī)學會第九次全國婦科腫瘤學術會議論文匯編[C];2006年

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7 鄭秀惠;Six1基因對宮頸癌細胞生物學行為的影響及其機制研究[D];第三軍醫(yī)大學;2010年

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本文編號：1451603