本文關(guān)鍵詞： 宮頸癌 Toll樣受體 小干擾RNA NF-κB信號(hào)通路 細(xì)胞增殖　出處：《中國(guó)病理生理雜志》2015年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:研究Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)小干擾RNA(siRNA)是否通過(guò)NF-κB信號(hào)途徑下調(diào)Bcl-2而抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖。方法:設(shè)計(jì)并合成針對(duì)TLR4基因的3條特異性siRNA)及陰性siRNA,并同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照,然后用脂質(zhì)體LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染細(xì)胞。通過(guò)半定量RT-PCR和Western印跡法分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后He La細(xì)胞中TLR4 mRNA和蛋白表達(dá)水平,Western印跡法檢測(cè)p65及Bcl-2蛋白表達(dá)水平,MTT法和平板克隆檢測(cè)細(xì)胞增殖率,Annexin V-FITC/PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期。結(jié)果:3條針對(duì)TLR4基因的siRNA均能抑制TLR4的mRNA和蛋白表達(dá),其中TLR4-siRNA-003的沉默效率最高。轉(zhuǎn)染TLR4-siRNA-003 48 h后細(xì)胞中TLR4的mRNA和蛋白表達(dá)水平分別下調(diào)62%和89%,p65及Bcl-2蛋白水平明顯下調(diào),同時(shí)細(xì)胞增殖明顯受到抑制,細(xì)胞凋亡率顯著升高,細(xì)胞周期被阻滯于G1期。結(jié)論:TLR4特異性siRNA能夠有效沉默TLR4基因表達(dá),并通過(guò)NF-κB信號(hào)通路下調(diào)Bcl-2而顯著抑制宮頸癌He La細(xì)胞的增殖。TLR4可能成為治療宮頸癌的一個(gè)新靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective: to study Toll like receptor 4 Toll-like receptor 4. TLR4). Whether down-regulation of Bcl-2 through NF- 魏 B signaling pathway inhibits the proliferation of cervical cancer cells. Methods: three specific siRNAs targeting TLR4 gene and negative siRNA were designed and synthesized. At the same time, blank control was established. Then the cells were transfected with liposome LipofectamineTM2000. He was detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot before and after transfection. The expression level of TLR4 mRNA and protein in La cells. The expression of p65 and Bcl-2 protein was detected by Western blot. Apoptosis was detected by flow cytometry with Annexin V-FITC / Pi staining. Results all three siRNA targeting TLR4 gene could inhibit the expression of mRNA and protein of TLR4. The silencing efficiency of TLR4-siRNA-003 was the highest. Transfection of TLR4-siRNA-003 48. The expression of TLR4 mRNA and protein were down-regulated by 62% and 89%, respectively. The levels of p65 and Bcl-2 protein were down-regulated, while the proliferation of cells was inhibited, and the apoptosis rate was significantly increased. Cell cycle was blocked in G1 phase. Conclusion siRNA specific to TLR4 can effectively silence the expression of TLR4 gene. And down-regulation of Bcl-2 through NF- 魏 B signaling pathway could significantly inhibit the proliferation of He-La cells. TLR4 may become a new target for the treatment of cervical cancer.
【作者單位】： 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院腫瘤科;南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;
【分類號(hào)】：R737.33
【正文快照】： 宮頸癌是嚴(yán)重危害女性健康的惡性腫瘤,我國(guó)宮頸癌的發(fā)生率位居世界第一,占世界每年新增病例的28.8%,居女性生殖道惡性腫瘤第1位[1]。宮頸癌由于對(duì)大多數(shù)抗癌藥物不敏感,所以首選治療為手術(shù)及放射治療,但是晚期或復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移患者效果欠佳,化療具有全身作用特點(diǎn),所以尋求新的靶位基

【參考文獻(xiàn)】

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