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GRP78基因沉默對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖與凋亡的影響及機(jī)制

發(fā)布時間:2018-01-14 04:33

  本文關(guān)鍵詞:GRP78基因沉默對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖與凋亡的影響及機(jī)制 出處:《山東醫(yī)藥》2017年05期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:目的探討葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)基因沉默對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖與凋亡的影響及機(jī)制。方法設(shè)計(jì)、合成針對GRP78基因的短發(fā)夾RNA干擾序列,構(gòu)建GRP78載體質(zhì)粒,將其轉(zhuǎn)染入293T細(xì)胞,包裝產(chǎn)生慢病毒(GRP78 shRNA)。將培養(yǎng)好的SKOV3細(xì)胞隨機(jī)分為對照組、空白載體組、實(shí)驗(yàn)組,將空白質(zhì)粒、GRP78shRNA分別轉(zhuǎn)染至空白載體組、實(shí)驗(yàn)組。用MTT法檢測各組細(xì)胞生長抑制率,用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,用Western blotting法檢測細(xì)胞內(nèi)GRP78、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)及增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表達(dá)。結(jié)果轉(zhuǎn)染24、48、72 h,與對照組、空白載體組比較,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長抑制率升高(P均0.05);且實(shí)驗(yàn)組各時間點(diǎn)細(xì)胞生長抑制率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。轉(zhuǎn)染72 h,與對照組、空白載體組比較,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率升高(P均0.05)。轉(zhuǎn)染72 h,與對照組、空白載體組比較,實(shí)驗(yàn)組GRP78蛋白相對表達(dá)量降低,CHOP、Caspase-3蛋白相對表達(dá)量升高(P均0.05)。結(jié)論沉默SKOV3細(xì)胞內(nèi)GRP78基因后,激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡信號通路,從而抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)其凋亡。
[Abstract]:Objective To investigate the effect and mechanism of glucose - regulated protein 78 ( GRP78 ) gene silencing on the proliferation and apoptosis of human ovarian carcinoma . The expression of GRP78 , Caspase - 3 and CHOP protein in the experimental group were significantly higher than those in control group and blank carrier group ( P < 0.05 ) .

【作者單位】: 山東能源新汶礦業(yè)集團(tuán)萊蕪中心醫(yī)院;長春中醫(yī)藥大學(xué);
【分類號】:R737.31
【正文快照】: 卵巢癌是婦科常見的惡性疾病,其發(fā)病率占婦科癌癥的20%。中、晚期卵巢癌患者5年生存率不足20%[1]。卵巢癌以手術(shù)治療及化療為主,但效果并不理想。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上重要的分子伴侶蛋白,與腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移及死亡抵抗有密切關(guān)系[2]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)是近年來

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本文編號:1422079

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