本文關(guān)鍵詞：熱休克因子HSF1介導(dǎo)卵巢間質(zhì)細(xì)胞活化為癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的功能研究

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【摘要】：背景與目的:卵巢癌的二元模式分類逐漸被接受,I型卵巢癌以低級(jí)別漿液性癌和子宮內(nèi)膜樣癌為代表,表現(xiàn)為膨脹性生長和低侵襲潛能,II型卵巢癌以高級(jí)別漿液性癌和子宮內(nèi)膜樣癌為代表,表現(xiàn)為彌漫性生長和高侵襲潛能。微環(huán)境在腫瘤研究中的作用逐漸受到重視,CAFs是腫瘤微環(huán)境中的主要成分。前期實(shí)驗(yàn)成功分離出I型CAFs和II型CAFs,且實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示兩類CAFs對腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移促進(jìn)作用的不同與其來源的卵巢癌細(xì)胞本身的特質(zhì)有關(guān),但機(jī)制尚不清楚。HSF1是一種熱休克因子,能夠編程腫瘤間質(zhì)細(xì)胞從而促進(jìn)惡性腫瘤形成。本文探討卵巢癌細(xì)胞中HSF1活化對間質(zhì)細(xì)胞中HSF1表達(dá)的影響及其在促卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移潛能中的作用。方法:1.從Ⅰ/Ⅱ卵巢癌新鮮標(biāo)本中分離提純Ⅰ/Ⅱ型CAFs及相應(yīng)的Ⅰ/Ⅱ型腫瘤細(xì)胞,并驗(yàn)證CAFs對相應(yīng)原代卵巢癌細(xì)胞遷移的促進(jìn)作用。2.構(gòu)建不同侵襲潛能卵巢癌細(xì)胞株的小鼠異種移植瘤,驗(yàn)證對NFs的活化募集及促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的作用。3.免疫組化檢測HSF1在10例正常卵巢組織、Ⅰ/Ⅱ型各20例卵巢癌組織中的表達(dá)情況,免疫細(xì)胞化學(xué)驗(yàn)證NFs與CAFs中HSF1表達(dá)情況;4.Western blot檢測卵巢癌細(xì)胞株及原代分離提純的NFs和CAFs中HSF1表達(dá);5.收集上皮性卵巢癌細(xì)胞株的條件培養(yǎng)基與NFs共培養(yǎng)得到inducible CAFs(indcafs),檢測nfs/indcafs/cafs中hsf1及α-sma的蛋白和mran表達(dá),同時(shí)驗(yàn)證三種細(xì)胞本身及對hey細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力影響;6.rna干擾cafs中hsf1表達(dá)后,采用westernblot檢測三組細(xì)胞(caf-nt/caf-ihsf1/nfs)中hsf1及α-sma表達(dá);7.收集caf-nt/caf-ihsf1條件培養(yǎng)基,比較caf-nt/caf-ihsf1本身運(yùn)動(dòng)能力及其條件培養(yǎng)基(cm)對hey細(xì)胞株遷移侵襲能力的影響。結(jié)果:1.Ⅱ型cafs對其本身分離出的原代腫瘤細(xì)胞遷移能力的促進(jìn)作用強(qiáng)于Ⅰ型cafs對其本身分離出的原代腫瘤細(xì)胞的遷移促進(jìn)作用;2.體內(nèi)試驗(yàn)驗(yàn)證Ⅱ型卵巢癌細(xì)胞株對小鼠體內(nèi)nfs募集活化作用增強(qiáng),且其活化后的cafs對卵巢癌細(xì)胞株遷移促進(jìn)作用同樣增強(qiáng);3.免疫組化結(jié)果顯示上皮性卵巢癌組織的癌細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞中hsf1呈高表達(dá),正常卵巢組織上皮細(xì)胞與間質(zhì)中hsf1幾乎不表達(dá)(p0.01);免疫細(xì)胞化學(xué)驗(yàn)證hsf1在cafs中表達(dá)高于nfs。4.Ⅱ型卵巢癌細(xì)胞株中hsf1表達(dá)高于Ⅰ型卵巢癌細(xì)胞株,cafs細(xì)胞中hsf1表達(dá)高于nfs;5.indcafs中hsf1及α-sma表達(dá)增高,其本身遷移能力增加,對癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移促進(jìn)作用明顯增高(p0.01)。6.與對照組(caf-nt)相比,rna干擾cafs中hsf1(caf-ihsf1)后,hsf1與α-sma蛋白表達(dá)水平下降,transwell結(jié)果顯示其本身遷移侵襲能力顯著下降(p0.01),其條件培養(yǎng)基與hey細(xì)胞共培養(yǎng)明顯降低hey細(xì)胞遷移侵襲能力(p0.05)。結(jié)論:hsf1在卵巢癌組織中表達(dá)高于正常卵巢組織,間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)與癌細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)度一致,惡性程度越高表達(dá)強(qiáng)度越強(qiáng),提示hsf1與卵巢癌惡性潛能可能相關(guān);體內(nèi)進(jìn)一步驗(yàn)證卵巢癌細(xì)胞株對正常間質(zhì)的募集活化進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。癌細(xì)胞與NFs共培養(yǎng)可能誘導(dǎo)NFs中HSF1及α-SMA表達(dá),促進(jìn)其本身的遷移能力,同時(shí)誘導(dǎo)其對癌細(xì)胞遷移侵襲潛能的促進(jìn)作用。干擾CAFs中HSF1下調(diào)其本身及對卵巢癌細(xì)胞的遷移侵襲能力,說明卵巢癌細(xì)胞可能通過HSF1活化正常間質(zhì)細(xì)胞,從而促進(jìn)惡性腫瘤進(jìn)展。以上結(jié)果均驗(yàn)證HSF1可能介導(dǎo)卵巢癌間質(zhì)成纖維細(xì)胞激活進(jìn)而促進(jìn)卵巢腫瘤的惡性進(jìn)展。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Yu Yan;Li-Feng Wang;Rui-Fen Wang;;Role of cancer-associated fibroblasts in invasion and metastasis of gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2015年33期

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本文編號(hào)：1275533