本文關(guān)鍵詞：復(fù)合脂肪干細(xì)胞的微米紗補片的實驗研究

  更多相關(guān)文章： 靜電紡絲 微米紗 三維結(jié)構(gòu) 盆底組織工程

【摘要】：研究目的:比較靜電動態(tài)液體紡紗法制備的大孔徑、高孔隙率的TPU/P(LLA-CL)微米紗支架和傳統(tǒng)靜電紡絲制備的TPU/P(LLA-CL)納米纖維支架的表征,包括兩種支架的表面形貌、力學(xué)性能等;研究兩種支架材料與兔脂肪干細(xì)胞構(gòu)建女性盆底組織工程網(wǎng)片的生物相容性。研究方法:1、TPU/P(LLA-CL)微米紗和納米纖維支架的制備和表征測試:將TPU/P(LLA-CL)按照質(zhì)量比例為100/0,75/25,50/50,25/75,0/100溶解于六氟異丙醇,分別采用靜電動態(tài)液體紡紗技術(shù)制備復(fù)合微米紗支架、傳統(tǒng)靜電紡絲技術(shù)制備復(fù)合納米纖維支架;應(yīng)用掃描電子顯微鏡觀察兩種支架的形貌,計算兩種支架材料的纖維直徑、孔隙率和孔徑的大小;應(yīng)用萬能材料測試機檢測兩種支架的力學(xué)性能;應(yīng)用傅里葉紅外光譜分析不同比例的支架材料的表面化學(xué)性能。2、TPU/P(LLA-CL)微米紗和納米纖維支架復(fù)合兔脂肪干細(xì)胞構(gòu)建盆底組織工程補片:分離兔脂肪干細(xì)胞,慢病毒介導(dǎo)轉(zhuǎn)染EGFP對細(xì)胞進行標(biāo)記;將每種支架制備成0.5cm×0.5cm大小的樣本,共分為微米紗、納米纖維和對照組三組(n=3);將兔脂肪干細(xì)胞接種在三組的樣本上,通過掃描電子顯微鏡、倒置熒光顯微鏡、CCK-8實驗法等方法檢測兔脂肪干細(xì)胞在兩種支架表面的黏附、生長和增殖情況;組織學(xué)切片HE染色分析細(xì)胞長入支架的情況。研究結(jié)果:1、微米紗粗細(xì)不均,表面粗糙,納米纖維支架的纖維粗細(xì)均勻,表面光滑;微米紗的平均直徑約為14.05±2.21μm,納米纖維的平均直徑約為1.132±0.18μm,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P(27)0.05);微米紗支架的平均孔徑(550.78±142.60μm2)明顯大于納米纖維支架(69.05±19.18μm2),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P(27)0.05);微米紗支架孔隙率(79.09±3.22%)明顯高于納米纖維支架(61.8±1.64%),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P(27)0.05)。同一種質(zhì)量比例的TPU/P(LLA-CL)微米紗和納米纖維支架力學(xué)性能差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P(29)0.05)。微米紗支架,TPU/P(LLA-CL)為50/50時斷裂應(yīng)力最大(11.5±3.43Mpa),與天然陰道壁組織力學(xué)性能最接近。五種不同比例的納米纖維支架,隨著TPU比例的增加,斷裂應(yīng)力隨之增大。微米紗支架和納米纖維支架表面TPU和P(LLA-CL)沒有發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。2、CCK-8試驗顯示接種細(xì)胞1d后,三組之間吸光度值無明顯差異,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.806);接種細(xì)胞后4d,微米紗支架上的吸光度值大于納米纖維支架和空白板的吸光度值,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p=0.083),隨著培養(yǎng)細(xì)胞時間的延長,三組在接種細(xì)胞7d后的吸光度值均高于其1d和4d的吸光度值;在接種細(xì)胞7d時,納米纖維支架組與對照組之間吸光度值差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),微米紗支架與納米纖維支架之間,微米紗支架與對照組之間的差異性均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。根據(jù)HE染色結(jié)果分析得到細(xì)胞接種1d、4d和7d后,ADSCs長入納米纖維支架的平均深度分別為(36.50±3.08μm、37.06±2.23μm和40.17±4.96μm),第1d和4d(P=0.06)、4d和7d(P=0.06)、1d和7d(P=0.22)之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。ADSCs長入微米紗支架的平均深度分別為250.00±33.62μm,350.90±38.92μm和449.01±51.73μm,第1d和4d(P(27)0.05)、4d和7d(P(27)0.05)、1d和7d(P(27)0.05)之間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:TPU/P(LLA-CL)微米紗是一種大孔徑、高孔隙率的三維支架結(jié)構(gòu);與TPU/P(LLA-CL)納米纖維支架相比,更能促進細(xì)胞粘附和增殖,其力學(xué)性能與天然陰道壁組織接近,并能有效改善細(xì)胞難以長入的情況,能更好的模擬天然細(xì)胞外基質(zhì),是一種極具潛力的盆底組織工程支架。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R318.08;R713

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 彭鑫磊;王蕊;周向榮;劉秋英;王一飛;;脂肪干細(xì)胞的研究及應(yīng)用進展[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2010年12期

2 ;本刊已出版的“脂肪干細(xì)胞研究”熱點文章題錄[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年40期

3 雷華,李青峰;脂肪干細(xì)胞的研究進展[J];中華整形外科雜志;2003年06期

4 張端珍,蓋魯粵,劉宏偉,朱鮮陽;脂肪干細(xì)胞體外分化為內(nèi)皮細(xì)胞的可行性[J];中國臨床康復(fù);2005年34期

5 胡鐵霞,李祖兵;新型骨組織工程種子細(xì)胞——脂肪干細(xì)胞的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;2005年01期

6 牟洪善;李金萍;王昌留;;脂肪干細(xì)胞研究近況[J];生命科學(xué)儀器;2006年03期

7 王蘋;王心蕊;李叔強;孫磊;劉明遠(yuǎn);;脂肪干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌樣分化特性的比較[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年37期

8 江麗;朱家愷;劉小林;項鵬;余偉華;;大鼠脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[J];中華顯微外科雜志;2007年03期

9 梁慧;王慶勝;方海濱;馬卉;;脂肪干細(xì)胞體外快速擴增實驗研究[J];中國誤診學(xué)雜志;2008年21期

10 朱艷霞;劉天慶;宋克東;馬學(xué)虎;崔占峰;;心肌樣微環(huán)境誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞分化的研究[J];生物化學(xué)與生物物理進展;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王�？�;劉流;趙德萍;代曉明;李逸松;何曉光;;脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)中一種特異細(xì)胞的鑒定分析[A];第七屆中國醫(yī)師協(xié)會美容與整形醫(yī)師大會論文集[C];2010年

2 張志光;索明環(huán);;脂肪干細(xì)胞在體外長期傳代后成軟骨能力變化的研究[A];第七次全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)研討會暨《顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病及口頜面疼痛的基礎(chǔ)與臨床進展》國家級繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2008年

3 周遵善;;脂肪干細(xì)胞的基礎(chǔ)及臨床應(yīng)用(英文)[A];2012全國中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)學(xué)美容學(xué)術(shù)交流大會論文匯編[C];2012年

4 林云鋒;敬偉;田衛(wèi)東;;基于脂肪干細(xì)胞的美容與組織再生修復(fù)新策略[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學(xué)會第七次全國醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)術(shù)年會、中華醫(yī)學(xué)會醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)分會20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

5 王�？�;劉流;趙德萍;代曉明;李逸松;李宗芳;;大鼠脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)中一種特異細(xì)胞的表型和成骨誘導(dǎo)分析[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

6 金歡;歐陽靜萍;;脂肪干細(xì)胞研究近況[A];湖北省暨武漢市病理生理學(xué)會第十四屆學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

7 紀(jì)偉寧;馬依彤;楊毅寧;王寶珠;劉芬;陳邦黨;向陽;;脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及成心肌誘導(dǎo)[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

8 陳明;謝良地;謝鎮(zhèn)國;許昌聲;李宏亮;;脂肪干細(xì)胞的歸巢研究[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

9 徐靖宏;沈輝;鄭麗君;童蕓;;以玻尿酸為載體的脂肪干細(xì)胞復(fù)合物移植提高存活率的研究[A];2011年浙江省整形美容學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

10 周遵善;;脂肪干細(xì)胞在微整形醫(yī)學(xué)的應(yīng)用[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 海燕;韓美用脂肪干細(xì)胞實現(xiàn)骨骼再生[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 記者 邰舉;韓利用脂肪干細(xì)胞克隆狗獲得成功[N];科技日報;2009年

3 記者 錢錚;腹部脂肪干細(xì)胞可轉(zhuǎn)為神經(jīng)細(xì)胞[N];新華每日電訊;2009年

4 小直;脂肪干細(xì)胞可以產(chǎn)生骨骼[N];華夏時報;2001年

5 任海軍;脂肪干細(xì)胞更易轉(zhuǎn)變?yōu)閕PS細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2009年

6 ;脂肪干細(xì)胞有可能再生骨髓[N];新華每日電訊;2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 顧建英;脂肪干細(xì)胞與PLCL/P123靜電紡納米材料構(gòu)建組織工程皮膚促創(chuàng)面愈合的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 盛玲玲;脂肪干細(xì)胞移植促進擴張皮膚再生的實驗研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 趙勇;脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性及參與脊髓損傷修復(fù)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 申霄;脂肪干細(xì)胞微環(huán)境對衰老成纖維細(xì)胞作用及機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

5 吳瓊;基質(zhì)細(xì)胞衍生因子促進脂肪干細(xì)胞向創(chuàng)傷區(qū)域定向遷移的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

6 肖波;脂肪干細(xì)胞及其來源細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)建的新型組織工程神經(jīng)在周圍神經(jīng)修復(fù)中的應(yīng)用[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

7 孫敏;脂肪干細(xì)胞治療小鼠卵巢早衰的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

8 朱艷霞;脂肪干細(xì)胞增殖特性及向心肌細(xì)胞分化的研究[D];大連理工大學(xué);2009年

9 王淼;抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B可促進人脂肪干細(xì)胞分化[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 王清富;聚乙烯亞胺介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 翁劍銳;移植脂肪干細(xì)胞對血管損傷后內(nèi)膜增生的影響及機制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 劉少鵬;經(jīng)腎動脈移植脂肪干細(xì)胞對大鼠急性缺血性腎損傷的治療作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 張凱哲;Toll樣受體3活化對小鼠脂肪干細(xì)胞生物學(xué)功能的影響[D];大連理工大學(xué);2015年

4 尚志剛;慢病毒介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞的實驗研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

5 依里牙爾·依里哈木;IFN-γ增強脂肪干細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制機制[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

6 李江璇;VEGF基因修飾后人脂肪干細(xì)胞上清對成纖維細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞的影響[D];暨南大學(xué);2015年

7 祁美武;脂肪干細(xì)胞治療放射性肌肉纖維化的實驗研究[D];南華大學(xué);2015年

8 何赤東;不同方法制備富血小板纖維蛋白對脂肪干細(xì)胞體外增殖影響的實驗研究[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

9 黃成龍;骨質(zhì)疏松小鼠脂肪干細(xì)胞成骨能力的研究[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

10 潘晨晨;糖尿病勃起功能障礙的臨床證型與實驗研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

，

本文編號：1171636