本文關鍵詞：卵巢癌SPOP促凋亡作用及其機制的初步探討

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【摘要】：目的:通過檢測卵巢癌中SPOP(Speckle-type POZ protein)基因狀態(tài)(缺失),分析SPOP基因與卵巢癌的臨床分型、組織病理分級的相關性;對SPOP基因在卵巢癌中可能扮演角色及其在卵巢癌發(fā)生發(fā)展過程中可能的機制進行初步探討。方法:1、利用熒光原位雜交(FISH)技術檢測SPOP基因在卵巢癌中的狀態(tài),分析SPOP基因與卵巢癌的臨床分型、組織病理分級的相關性。2、免疫組織化學(IHC)檢測SPOP在卵巢癌組織中的表達。3、Western Blotting檢測人卵巢癌細胞株SKOV3,OVCAR-3中SPOP蛋白表達水平。4、構建干擾SPOP的SKOV3細胞模型,運用RT-PCR和Western Blotting鑒定干擾效率。5、利用流式細胞術檢測細胞周期、凋亡。6、蛋白質質譜、生物信息學分析尋找與SPOP相互作用的潛在底物蛋白,初步探討卵巢癌可能的發(fā)病機制。結果:1、卵巢癌組織和正常卵巢組織的SPOP基因狀態(tài)(缺失)有明顯差異(P0.01,P=0)。2、88例(90例中2例FISH信號不可識別)卵巢癌組織中有46例存在SPOP基因缺失(52.27%,46/88),而10例正常卵巢組織中未發(fā)現SPOP基因缺失(0%,0/10)。3、卵巢癌組織中頻繁出現17號染色體單體(51.14%,45/88),但正常卵巢組織中未發(fā)現17號染色體單體(0%,0/10)。4、漿液性上皮性卵巢癌高比例出現SPOP基因缺失(67.21%,41/61),分級為3級的漿液性上皮性卵巢癌SPOP基因缺失率最高(83.78%,31/37)。5、88例(90例中2例組織脫片)卵巢癌組織中高比例出現SPOP蛋白表達(45.45%,40/88),10例正常卵巢組織中SPOP蛋白無表達(0%,0/10)。6、卵巢癌組織中IHC和FISH結果一致性較差(Kappa=0.036,P=0.501)。7、干擾組與空載組相比凋亡減少。8、質譜共鑒定出差異蛋白4347個,其中差異顯著的蛋白(符合以下條件:P值0.05;肽段3個;ratio1.5為上調或ratio0.67為下調)共計110個,蛋白上調16個,蛋白下調94個。9、對110個差異顯著的蛋白進行了生物信息學分析,發(fā)現DUSP10可能為SPOP的直接底物,Bcl2l13蛋白及Bak1蛋白可能為SPOP調控通路的下游關鍵節(jié)點因子。結論:SPOP基因在卵巢癌中高頻缺失,尤其在漿液性3級的卵巢癌中缺失率達83.78%;SPOP可能通過促進細胞凋亡而發(fā)揮抑癌作用。
【關鍵詞】：卵巢癌 SPOP 基因缺失 細胞凋亡 蛋白質質譜技術
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-13
• 第一部分 卵巢癌SPOP基因狀態(tài)研究13-26
• 1 材料13-14
• 2 方法14-17
• 3 結果17-23
• 4 討論23-26
• 第二部分 卵巢癌SPOP促凋亡作用及其初步的機制探討26-53
• 1 材料26-29
• 2 方法29-40
• 3 結果40-49
• 4 討論49-53
• 全文總結53-54
• 參考文獻54-57
• 文獻綜述57-64
• 參考文獻61-64
• 致謝64-65
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學術論文65

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1 李國強;低氧微環(huán)境下SPOP蛋白促進腎癌發(fā)生的作用機制研究[D];中國科學院北京基因組研究所;2014年

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本文編號：1052413