本文關(guān)鍵詞：Galectin-1在胚胎著床過程中對(duì)滋養(yǎng)層干細(xì)胞分化和侵襲的作用機(jī)制研究

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【摘要】：研究背景：母體組織與胎兒成分直接接觸的界面是母胎界面,在此界面的有序調(diào)控影響著胚胎著床和妊娠維持。妊娠是一個(gè)需要高度精細(xì)調(diào)控的生理過程,滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖和分化的特定時(shí)空進(jìn)程在一定程度上決定了妊娠結(jié)局,而子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞是滋養(yǎng)細(xì)胞首先接觸到的母體細(xì)胞,這兩種細(xì)胞間的相互對(duì)話至關(guān)重要。我們課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)與正常對(duì)照組相比早期妊娠丟失的患者半乳糖凝集素-1(Galectin-1,Gal-1)滋養(yǎng)細(xì)胞中表達(dá)顯著降低,運(yùn)用滋養(yǎng)層干細(xì)胞系(TSC)體外誘導(dǎo)分化,發(fā)現(xiàn)分化關(guān)鍵期Gal-1的表達(dá)顯著升高,這可能提示Gal-1在早期胎盤發(fā)育過程中發(fā)揮了重要作用。滋養(yǎng)層干細(xì)胞系(TSC)與體內(nèi)的滋養(yǎng)層細(xì)胞譜系的基因表達(dá)模式相似,Ishikawa細(xì)胞(IK細(xì)胞)也是著床模型中常用的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系,因此,建立滋養(yǎng)細(xì)胞-子宮內(nèi)膜共培養(yǎng)體系來模擬體內(nèi)胚胎著床過程,以研究在該體系中Gal-1發(fā)揮的作用機(jī)制。研究目的：運(yùn)用小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞與子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞共培養(yǎng)模型模擬母胎界面,觀察共培養(yǎng)及子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分泌物對(duì)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化、融合、遷移、侵襲情況和Gal-1表達(dá)水平的變化,運(yùn)用外源性Gal-1刺激滋養(yǎng)層干細(xì)胞,觀察Gal-1在滋養(yǎng)細(xì)胞分化進(jìn)程中的表達(dá)及與相關(guān)重要分子的關(guān)系,以及Gal-1對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響,研究Gal-1在胚胎著床失敗和EPL中的作用機(jī)制,為尋求相關(guān)治療方法提供理論依據(jù)。研究方法：運(yùn)用IK-TSC細(xì)胞共培養(yǎng)模型和IK細(xì)胞分泌物處理TSC,在干細(xì)胞培養(yǎng)基及促分化培養(yǎng)基中誘導(dǎo)分化,采用qRT-PCR方法在mRNA水平檢測(cè)TSC增殖和分化時(shí)產(chǎn)生的各細(xì)胞類型標(biāo)志物和融合標(biāo)志物,采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)各組TSC遷移和侵襲能力。從mRNA水平和蛋白水平檢測(cè)Gal-1在共培養(yǎng)及IK細(xì)胞分泌物處理后分化過程中不同階段的表達(dá)變化。運(yùn)用外源性Gal-1處理TSC細(xì)胞,采用qRT-PCR方法檢測(cè)TSC分化1-7天各細(xì)胞類型標(biāo)志物和融合標(biāo)志物的mRNA水平,采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)各組TSC遷移和侵襲能力。研究結(jié)果：1、在促分化培養(yǎng)基中,IK細(xì)胞與TSC共培養(yǎng)能促進(jìn)TSC的分化和融合；在干細(xì)胞培養(yǎng)基中,IK細(xì)胞與TSC共培養(yǎng)能誘導(dǎo)TSC的分化；2、在促分化培養(yǎng)基中,IK細(xì)胞的分泌物處理能促進(jìn)TSC的分化和融合；在干細(xì)胞培養(yǎng)基中,IK細(xì)胞的分泌物處理能誘導(dǎo)TSC的分化；3、IK細(xì)胞與TSC共培養(yǎng)及IK細(xì)胞的分泌物處理,能增強(qiáng)TSC的遷移能力和侵襲能力；4、在促分化培養(yǎng)基中,IK細(xì)胞與TSC共培養(yǎng)及IK細(xì)胞的分泌物均能增加TSC中Gal-1的表達(dá)；5、在促分化培養(yǎng)基中,外源性Gal-1處理能促進(jìn)TSC的分化和融合；6、外源性Gal-1處理能增強(qiáng)TSC的遷移能力和侵襲能力；研究結(jié)論：1、IK與TCS共培養(yǎng)及IK細(xì)胞分泌物能誘導(dǎo)并促進(jìn)TCS的分化和融合。2、IK與TCS共培養(yǎng)及IK細(xì)胞分泌物能增強(qiáng)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的遷移和侵襲能力。3、IK與TCS共培養(yǎng)及IK細(xì)胞分泌物均能增加Gal-1在TSC分化過程中的表達(dá),而外源性Gal-1能促進(jìn)TSC的分化和融合,并能增強(qiáng)TSC的遷移和侵襲能力,提示Gal-1在IK與TSC共培養(yǎng)體系中促進(jìn)TSC分化和侵襲的進(jìn)程。
【關(guān)鍵詞】：半乳糖凝集素-1 滋養(yǎng)層干細(xì)胞 母胎界面 早期胚胎丟失 胚胎植入
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R714
【目錄】：

• 致謝4-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 縮略詞表12-14
• 1 背景14-18
• 2 材料與方法18-32
• 3 結(jié)果32-59
• 3.1 與IK細(xì)胞共培養(yǎng)能促進(jìn)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化32-35
• 3.2 與IK細(xì)胞共培養(yǎng)能誘導(dǎo)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化35-38
• 3.3 IK細(xì)胞的分泌物能促進(jìn)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化38-42
• 3.4 IK細(xì)胞的分泌物能誘導(dǎo)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化42-45
• 3.5 與IK細(xì)胞共培養(yǎng)及IK細(xì)胞的分泌物處理均能增強(qiáng)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的遷移、侵襲能力45-48
• 3.6 與IK細(xì)胞共培養(yǎng)及IK細(xì)胞的分泌物處理均能增加滋養(yǎng)層干細(xì)胞Galectin-1的表達(dá)48-51
• 3.7 外源性Gal-1能促進(jìn)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化51-54
• 3.8 外源性Gal-1能誘導(dǎo)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的分化54-57
• 3.9 外源性重組Gal-1能增強(qiáng)滋養(yǎng)層干細(xì)胞的遷移、侵襲能力57-59
• 4 討論59-63
• 5 結(jié)論63-64
• 參考文獻(xiàn)64-67
• 綜述67-81
• 參考文獻(xiàn)75-81
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷81
• 研究生期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文81

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本文編號(hào)：1033462