本文關(guān)鍵詞：脂聯(lián)素對(duì)窒息新生鼠心肌損傷作用及其機(jī)制的研究

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【摘要】：目的： 1、建立新生鼠窒息模型，觀察窒息后新生鼠血清心肌酶（CK、LDH）變化、心肌組織損傷及心肌細(xì)胞凋亡情況。 2、探討窒息新生鼠缺氧缺血性心肌損傷過程存在AMPK信號(hào)通路的激活。 3、研究脂聯(lián)素對(duì)窒息新生鼠缺氧缺血性心肌損傷的作用與心肌組織AMPK表達(dá)的影響，并探討其可能的機(jī)制。 方法： 1、實(shí)驗(yàn)分組：50只7日齡新生SD大鼠按完全隨機(jī)法隨機(jī)分成5組（每組10只）：假手術(shù)組、窒息組、APN組、Compound C組、APN+Compound C組。 2、新生鼠常壓窒息模型制備及藥物干預(yù)：僅假手術(shù)組模擬常壓窒息過程，不塞瓶及復(fù)氧，其余四組制備常壓窒息模型，，APN組及APN+Compound C組在窒息前半小時(shí)給予腹腔注射APN120μg/kg,Compound C組與APN+Compound C組在窒息前1小時(shí)給予腹腔注射Compound C20mg/kg,假手術(shù)組及窒息組分別接受同劑量的生理鹽水。每組分別在復(fù)氧2小時(shí)后立即取血及心臟組織。 3、觀察指標(biāo)：檢測(cè)血清心肌酶CK、LDH水平；HE染色觀察心肌病理形態(tài)學(xué)改變；免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)心肌組織AMPK蛋白表達(dá)含量；TUNEL法定性及定量分析心肌細(xì)胞凋亡。 4、數(shù)據(jù)分析：采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差（x s）表示，采用單因素方差分析（one-wayANOVA），并進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，兩兩比較用SNK-q檢驗(yàn)，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01表示有顯著性差異。 結(jié)果： 1、各組血清心肌酶CK、LDH值比較：與假手術(shù)組相比，窒息組CK、LDH值顯著升高（P＜0.01）；與窒息組相比，APN組心肌酶CK、LDH水平明顯下降（P＜0.01），而Compound C組及APN+Compound C組CK、LDH值明顯升高（P＜0.01）；但APN+Compound C組CK、LDH水平低于Compound C組，且差異顯著（P＜0.01）。 2、心肌組織病理形態(tài)學(xué)改變：假手術(shù)組大鼠心肌細(xì)胞排列規(guī)則整齊，組織間質(zhì)無(wú)炎性水腫，未見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞質(zhì)均勻淡染，細(xì)胞核清晰可見；窒息組、Compound C組及APN+Compound C組均可見心肌細(xì)胞排列紊亂，間質(zhì)明顯充血水腫，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞核不規(guī)則，呈濃縮狀，部分細(xì)胞出現(xiàn)壞死，核消失，細(xì)胞呈空泡樣。APN組上述改變較前三組明顯減輕，心肌間質(zhì)充血水腫及細(xì)胞壞死不明顯，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)少見。 3、心肌組織AMPK蛋白表達(dá)：與假手術(shù)組比較，窒息組AMPK蛋白表達(dá)升高，差異顯著（P＜0.01）；與窒息組比較，APN組AMPK蛋白顯著升高（P＜0.01），而Compound C組AMPK蛋白表達(dá)下降明顯（P＜0.01）；與CompoundC組相比，APN+Compound C組AMPK蛋白表達(dá)升高，且差異明顯（P＜0.01）。 4、心肌細(xì)胞凋亡熒光顯色：在熒光顯微鏡下觀察可見假手術(shù)組僅有少量的凋亡細(xì)胞熒光顯色，窒息組、Compound C組及APN+Compound C組凋亡細(xì)胞明顯增多，APN組凋亡細(xì)胞較前三組均減少，但多于假手術(shù)組。 5、心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)（Apoptotic Index，AI）結(jié)果比較：與假手術(shù)組相比，窒息組AI水平顯著升高（P＜0.01）；與窒息組相比，APN組AI水平明顯下降（P＜0.01），而Compound C組AI水平明顯升高（P＜0.01）；與Compound C組相比，APN+Compound C組AI水平明顯降低（P＜0.01）。 結(jié)論： 1、脂聯(lián)素對(duì)窒息新生鼠缺氧缺血性心肌損傷有保護(hù)作用，能夠減少心肌細(xì)胞凋亡。 2、新生鼠窒息所致的缺氧缺血性心肌損傷過程存在AMPK信號(hào)分子的激活。 3、脂聯(lián)素通過激活A(yù)MPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮對(duì)新生鼠缺氧缺血性心肌損傷的保護(hù)作用。 4、AMPK抑制劑Compound C阻斷了脂聯(lián)素的心肌保護(hù)作用。
【關(guān)鍵詞】：脂聯(lián)素 窒息 心肌缺氧缺血性損傷 AMPK 心肌細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R722.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 中英文縮略詞表10-12
• 第1章 引言12-14
• 第2章 材料與方法14-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料14-16
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器14
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 2.1.4 主要試劑配制15-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法及步驟16-20
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組與給藥16
• 2.2.2 新生鼠常壓窒息模型的制備16-17
• 2.2.3 血清心肌酶 CK、LDH 的檢測(cè)17
• 2.2.4 HE 染色觀察心肌組織病理形態(tài)學(xué)改變17
• 2.2.5 免疫組化法檢測(cè)心肌組織 AMPK 蛋白表達(dá)17-18
• 2.2.6 TUNEL 法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡18-20
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法20-21
• 第3章 結(jié)果21-27
• 3.1 新生鼠窒息缺氧后的表現(xiàn)21-22
• 3.2 各組新生鼠血清心肌酶 CK、LDH 濃度變化22-23
• 3.2.1 各組新生鼠血清心肌酶 CK 濃度變化：見表 1（圖一）22-23
• 3.2.2 各組新生鼠血清心肌酶 LDH 濃度變化：見表 2（圖二）23
• 3.3 各組新生鼠心肌組織病理形態(tài)學(xué)改變23-24
• 3.4 各組新生鼠心肌組織 AMPK 蛋白表達(dá)的變化24-25
• 3.5 各組新生鼠心肌細(xì)胞凋亡的變化25-27
• 3.5.1 各組心肌細(xì)胞凋亡定性分析25
• 3.5.2 各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）結(jié)果分析25-27
• 第4章 討論27-34
• 4.1 新生鼠窒息與缺氧缺血性心肌損傷27-28
• 4.2 心肌缺氧缺血性損傷與心肌細(xì)胞凋亡28-29
• 4.3 AMPK 對(duì)缺氧缺血性心肌損傷的影響29-30
• 4.4 實(shí)驗(yàn)藥物干預(yù)的選取及結(jié)果分析30-32
• 4.5 APN-AMPK 與缺氧缺血性心肌損傷32-34
• 第5章 結(jié)論34-35
• 第6章 展望35-36
• 致謝36-37
• 參考文獻(xiàn)37-40
• 附圖40-44
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果44-45
• 綜述45-51
• 參考文獻(xiàn)49-51

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：944592