本文關(guān)鍵詞：心臟肥大細(xì)胞及TLR4在小鼠病毒性心肌炎發(fā)病機(jī)制中的作用

  更多相關(guān)文章： BALB/C小鼠 病毒性心肌炎 肥大細(xì)胞 Toll樣受體4

【摘要】：目的：探討肥大細(xì)胞及TLR4在病毒性心肌炎發(fā)病及發(fā)展過程中的作用及其作用機(jī)制。 方法：以柯薩奇病毒B3腹腔注射BALB/C小鼠制作病毒性心肌炎模型(模型組,n=24),不含病毒的Eagle's病毒稀釋液腹腔注射BALB/C小鼠作為對(duì)照組(n=24),觀察兩組小鼠的一般情況變化,分別于制模后7天、14天、28天取心肌組織,行HE染色、Masson染色及透射電鏡觀察兩組小鼠心肌病理改變情況,以甲苯胺藍(lán)染色法和透射電鏡檢測(cè)兩組小鼠各時(shí)間點(diǎn)心肌肥大細(xì)胞數(shù)目及脫顆粒情況,用RT-PCR及免疫組化法檢測(cè)小鼠心肌TLR4的表達(dá),將模型組各時(shí)間點(diǎn)肥大細(xì)胞數(shù)目與TLR4mRNA表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。 結(jié)果：1.病毒性心肌炎小鼠模型建立：小鼠腹腔注射CVB3后,出現(xiàn)掉毛、體重減輕等一般情況改變；HE染色顯示心肌水腫、炎性細(xì)胞浸潤明顯,各時(shí)間點(diǎn)病理積分較對(duì)照組明顯增高(P0.05)；Masson染色：模型組第28天心肌血管周圍及心肌間質(zhì)內(nèi)大量藍(lán)色膠原沉積,膠原容積分?jǐn)?shù)增加,與第7天、第14天模型組及對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(all P0.05)。透射電鏡下觀察,模型組心肌排列紊亂,心肌細(xì)胞核變形。 2.肥大細(xì)胞數(shù)目及形態(tài)：甲苯胺藍(lán)染色顯示模型組各時(shí)間點(diǎn)心肌肥大細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組明顯增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；透射電鏡下可見模型組肥大細(xì)胞脫顆粒明顯。 3.TLR4表達(dá)：免疫組化及RT-PCR結(jié)果顯示模型組各時(shí)間點(diǎn)心肌TLR4的陽性表達(dá)面積及mRNA表達(dá)均高于對(duì)照組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(all P0.05)； 4.相關(guān)性分析：模型組心肌肥大細(xì)胞數(shù)目和TLR4mRNA表達(dá)具有正相關(guān)關(guān)系(R2=0.877,P0.05)。 結(jié)論：肥大細(xì)胞及TLR4在小鼠病毒性心肌炎的炎癥反應(yīng)、纖維化過程中均起重要作用；心臟肥大細(xì)胞和TLR4在小鼠病毒性心肌炎發(fā)病過程中可能起相互促進(jìn)作用。
【關(guān)鍵詞】：BALB/C小鼠 病毒性心肌炎 肥大細(xì)胞 Toll樣受體4
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R725.4
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 符號(hào)說明9-10
• 1 前言10-12
• 2 材料和方法12-19
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和病毒12
• 2.1.2 主要試劑(表2-1)12-13
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-17
• 2.2.1 病毒的擴(kuò)增、保存13
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷姆纸M及建立13
• 2.2.3 標(biāo)本采集13-14
• 2.2.4 病理學(xué)標(biāo)本處理14
• 2.2.5 肥大細(xì)胞甲苯胺藍(lán)染色14-15
• 2.2.6 免疫組化(ABC法)檢測(cè)心肌TLR4的表達(dá)15
• 2.2.7 RT-PCR法檢測(cè)心肌TLR4的表達(dá)15-17
• 2.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析17-19
• 3 結(jié)果19-30
• 3.1 病毒滴度測(cè)定19
• 3.2 動(dòng)物的一般情況19
• 3.3 心肌組織病理改變19-23
• 3.3.1 HE染色19-20
• 3.3.2 心肌組織病理積分20-21
• 3.3.3 MASSON染色21-23
• 3.3.4 電鏡觀察心肌超微結(jié)構(gòu)改變23
• 3.4 心臟肥大細(xì)胞密度及形態(tài)改變23-26
• 3.4.1 甲苯胺藍(lán)染色23-25
• 3.4.2 透射電鏡觀察肥大細(xì)胞脫顆粒情況25-26
• 3.5 免疫組化法檢測(cè)TLR4的表達(dá)26-28
• 3.6 RT-PCR檢測(cè)TLR4 MRNA表達(dá)28-29
• 3.6.1 RNA鑒定28
• 3.6.2 心肌組織TLR4 MRNA表達(dá)28-29
• 3.7 模型組小鼠心肌肥大細(xì)胞數(shù)目與TLR4 MRNA表達(dá)的相關(guān)性分析29-30
• 4 討論30-36
• 4.1 病毒性心肌炎模型的建立30-31
• 4.2 肥大細(xì)胞與病毒性心肌炎31-33
• 4.3 TLR4與病毒性心肌炎33-34
• 4.4 肥大細(xì)胞與TLR4表達(dá)的相關(guān)性34-36
• 5 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 綜述41-52
• 參考文獻(xiàn)46-52
• 在讀期間的主要研究成果52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

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