本文關鍵詞：雌激素受體α基因多態(tài)性及啟動子區(qū)甲基化對兒童氟斑牙的影響

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【摘要】：目的 氟斑牙作為地方性氟中毒的特征性表現之一，對兒童危害深遠，研究發(fā)現并不是所有氟病區(qū)的兒童都罹患氟斑牙，可能存在遺傳易感性。本次研究通過分析ERα基因多態(tài)性及啟動子區(qū)甲基化與兒童氟斑牙之間的關系，從遺傳學和表觀遺傳學方面探討氟斑牙發(fā)生機制，為從分子水平探討氟斑牙發(fā)生機制提供基本依據。 研究對象和方法 1.研究對象的選擇：分別在河南省開封、通許兩地選擇高氟村和對照村作為調查點，高氟村平均水氟濃度為2.44mg/L，對照村平均水氟濃度為0.37mg/L；隨機抽取所選調查點本地生長的8~12歲兒童作為調查對象，分別為高氟組和對照組，依據氟斑牙檢查結果將病區(qū)組又分為氟斑牙組和高氟區(qū)非患者組。其中氟斑牙組107人、高氟區(qū)非患者組100人及對照組78人，共285人。 2.氟斑牙的判定：由公共衛(wèi)生執(zhí)業(yè)醫(yī)師和口腔執(zhí)業(yè)醫(yī)師按照Dean’s分級法判定。 3.血清鈣的測定采用火焰原子分光光度計法；尿氟檢測采用氟離子選擇電極法。 4.雌激素受體α（ERα）基因rs3798577基因型分型采用Taqman探針法，Real-time PCR測定。 5. ERα基因啟動子甲基化水平檢測采用Real-time PCR測定 6.本次實驗數據的錄入和分析均采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件，甲基化率經對數轉換之后符合正態(tài)分布，尿氟、血鈣經對數轉換后的甲基化率的分析均應用單因素方差分析和獨立樣本t檢驗； ERα rs3798577基因型和等位基因頻率在不同組別兒童中的分布差異采用列聯表χ2檢驗，OR值（比值比）和OR值的95%置信區(qū)間的計算采用Logistic回歸，所有檢驗都以α＝0.05為檢驗水準，Hardy-Weinberg平衡狀況應用χ2檢驗判定。 結果 1.在外環(huán)境的檢測中，水氟濃度在兩組中分布差異有統(tǒng)計學意義。高氟組水氟濃度明顯高于對照組（t=-4.379, P0.05）。高氟組土壤中耕作層溶解氟和全氟明顯高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（分別P0.05）。其他氟含量指標如空氣中氟含量（未檢出），糧食中及蔬菜中氟含量，兩組之間差異無統(tǒng)計學意義（分別P0.05），水中鈣含量，兩組之間差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 2.高氟組兒童尿氟水平明顯高于對照組（F=52.117, P0.001），高氟組尿氟超標兒童分布(71.0%)明顯高于對照組兒童(11.5%)（P0.05）；血鈣水平高氟組明顯低于對照組兒童（F=8.503，P0.001）。 3. ERα rs3798577基因型在不同組別，不同性別和不同尿氟水平兒童間分布差異均無統(tǒng)計學意義（分別P0.05）。攜帶相同基因型不同組別兒童間血清鈣水平，高氟組明顯低于對照組（分別P0.05）。 4.不同組別、不同性別，不同氟斑牙分度，不同尿氟水平兒童間ERα基因啟動子甲基化率差異均無統(tǒng)計學意義（分別P0.05）；隨著氟斑牙嚴重程度的增高，兒童ERα基因啟動子甲基化率有逐漸增高的趨勢，在控制了尿氟變量之后，ERα基因啟動子甲基化率與血清鈣之間成負相關（r=-0.162，P=0.034）。 結論 1.研究未觀察到兒童氟斑牙與ERα rs3798577基因多態(tài)性有關。 2.氟病區(qū)兒童血清Ca水平的改變與氟暴露關系更為密切，而與ERα基因rs3798577多態(tài)性和該基因啟動子區(qū)甲基化聯系不密切。 3..ERα基因啟動子甲基化水平可能影響鈣的代謝，從而對兒童氟斑牙產生影響。 4.未發(fā)現ERα基因rs3798577多態(tài)性與該基因啟動子區(qū)甲基化交互作用與兒童氟斑牙有關。
【關鍵詞】：雌激素受體 基因多態(tài)性 甲基化 氟斑牙 兒童
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R599
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-13
• 圖表目錄13-14
• 1 引言14-18
• 2 研究技術路線18-19
• 3 材料和方法19-30
• 3.1 調查點和調查對象19
• 3.1.1 調查點的確定19
• 3.1.2 調查對象的確定19
• 3.2 人體內外暴露及健康效應指標測定19-22
• 3.2.1 環(huán)境及生物樣本的采集與保存19-20
• 3.2.2 試劑和儀器20
• 3.2.3 實驗室指標檢測20-22
• 3.2.4 兒童氟斑牙檢查及結果判定22
• 3.3 ERα基因 rs3798577 多態(tài)性測定22-24
• 3.3.1 實驗主要材料22
• 3.3.2 實驗主要儀器22
• 3.3.3 試驗方法22-24
• 3.3.4 ERα rs3798577 基因型判斷24
• 3.4 ERα 基因啟動子甲基化水平檢測24-28
• 3.4.1 所需材料24-25
• 3.4.2 主要儀器25
• 3.4.3 引物的設計25-26
• 3.4.4 DNA 甲基化處理26-27
• 3.4.5 DNA 甲基化檢測分析27-28
• 3.5 質量控制28
• 3.6 統(tǒng)計學方法28-30
• 4 結果30-39
• 4.1 高氟組與對照組環(huán)境樣品檢測結果的比較30
• 4.2 各組兒童基本情況、尿氟水平及氟斑牙患病情況30-32
• 4.3 兒童氟斑牙與 ERαrs3798577 基因多態(tài)性之間的關系32-36
• 4.3.1 ERαrs3798577Hardy-Weinberg 遺傳平衡檢驗32-33
• 4.3.2 ERαrs3798577 基因多態(tài)性在不同組別中的分布比較33
• 4.3.3 ERαrs3798577 基因多態(tài)性在不同性別兒童中的分布比較33-34
• 4.3.4 ER 基因多態(tài)性在尿氟超標兒童中的分布34-35
• 4.3.5 血清 Ca 與 ERαrs3798577 基因多態(tài)性的關系35
• 4.3.6 攜帶相同基因型不同組別兒童間血清 Ca 水平比較35-36
• 4.4 兒童氟斑牙與 ERα 基因甲基化水平之間的關系36-39
• 4.4.1 氟暴露程度、氟斑牙患病程度及性別與 ERα 基因甲基化水平36-37
• 4.4.2 不同基因型 ERα 基因啟動子甲基化水平比較37-38
• 4.4.3 氟暴露，， ERα rs3798577 基因多態(tài)性與 ERα基因啟動子甲基化水平之間的關系38
• 4.4.4 ERα 基因啟動子甲基化水平與血 Ca 水平相關分析38-39
• 5 討論39-43
• 5.1 氟暴露對兒童氟斑牙和血清鈣的影響39
• 5.2 兒童氟斑牙與 ERαrs3798577 基因多態(tài)性39-41
• 5.3 兒童氟斑牙與 ERα 基因啟動子甲基化水平之間的關系41-43
• 6 結論43-44
• 參考文獻44-49
• 氟斑牙發(fā)生機制和影響因素研究進展49-65
• 參考文獻58-65
• 個人簡歷 在校期間發(fā)表的學術論文與研究成果65-66
• 致謝66

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 郭麗英;王強;;過量氟對大鼠切牙成釉細胞和成牙本質細胞中Bag-1表達的影響[J];同濟大學學報(醫(yī)學版);2006年03期

2 王鳳華,李廣生;食餌低鈣對牙齒氟中毒影響的實驗研究[J];中國地方病學雜志;1993年06期

3 劉連;徐園園;許潔;黃厚今;;氟對大鼠肝功及GSH-Px基因表達影響[J];中國公共衛(wèi)生;2010年05期

本文編號：816890