白介素-6和腫瘤壞死因子-α在缺血再灌注腎損傷模型小鼠肺損傷中的作用
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【摘要】:目的 探討白介素-6及腫瘤壞死因子-α在急性腎損傷導(dǎo)致肺損傷中的作用,,明確急性腎損傷導(dǎo)致急性肺損傷的部分機(jī)制。 方法 1、76只雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(C)、假手術(shù)組(S)、缺血再灌注組(IR),S組和IR組依據(jù)再灌注的時(shí)間分別分成9個(gè)亞組,即再灌注后0h、3h、6h、12h、24h、48h、72h、5d、7d,共19組。采用夾閉雙側(cè)腎蒂30min的方法建立小鼠缺血再灌注腎損傷模型,采用游離雙側(cè)腎蒂,但不夾閉腎蒂的方法建立假手術(shù)模型。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)小鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平;病理評(píng)分法分析腎組織及肺組織病理?yè)p害程度。 2、36只雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(C)、假手術(shù)組(S)、缺血再灌注組(IR),S組和IR組依據(jù)再灌注的時(shí)間分別分成4個(gè)亞組,即再灌注后6h、24h、48h、5d,共9組。采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測(cè)肺組織白介素-6、腫瘤壞死因子-a蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。RT-PCR方法檢測(cè)肺組織白介素-6、腫瘤壞死因子-a mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果 1.各組小鼠血肌酐、尿素氮水平 (1)對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組間的Scr及BUN水平比較,均無(wú)顯著差異(P>0.05)。 (2)IR組小鼠再灌注3h,Scr及BUN水平開(kāi)始升高;隨著再灌注時(shí)間的推移,Scr及BUN水平逐漸升高,再灌注24h,Scr及BUN水平達(dá)到峰值;之后Scr及BUN水平逐漸下降,但是在再灌注7d,仍然顯著高于對(duì)照組和假手術(shù)組(P<0.05)。 2、各組小鼠腎臟病理?yè)p害及腎小管間質(zhì)病理?yè)p傷評(píng)分 (1)對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組間的腎小管間質(zhì)損傷評(píng)分均無(wú)顯著差異(P>0.05); (2)IR組小鼠再灌注0h,腎組織出現(xiàn)輕微病理?yè)p害,隨著再灌注時(shí)間的推移,腎損傷逐漸加重,再灌注24h達(dá)到最高峰,再灌注后48h IR組小鼠腎損傷逐漸減輕,再灌注后7d后小鼠腎損傷仍然高于對(duì)照組和假手術(shù)組(P0.05)。 3、各組小鼠肺臟病理?yè)p害及肺損傷病理評(píng)分 (1)對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組間的肺病理?yè)p傷評(píng)分比較,均無(wú)顯著差異(P>0.05)。 (2)IR組小鼠再灌注6h,肺組織出現(xiàn)輕微病理?yè)p害,隨著再灌注時(shí)間的推移,肺損傷逐漸加重,再灌注48h~72h達(dá)到最高峰,再灌注后72h IR組小鼠肺損傷逐漸減輕,再灌注7d小鼠肺損傷回復(fù)至基線水平(P<0.01)。 4、各組小鼠肺組織白介素-6、腫瘤壞死因子-a蛋白質(zhì)的表達(dá)水平 (1)白介素-6(IL-6)的表達(dá):IL-6在肺組織中的表達(dá)定位于細(xì)胞胞漿,對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組間肺組織的IL-6陽(yáng)性信號(hào)表達(dá)強(qiáng)度無(wú)顯著差異(P>0.05)。IR組小鼠肺組織IL-6表達(dá)于再灌注6h顯著增高,并隨著再灌注時(shí)間推移,逐漸增強(qiáng),48h達(dá)到峰值,5d回復(fù)基線水平(P<0.01)。 (2)腫瘤壞死因子-a(TNF-α)的表達(dá):對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組小鼠肺組織間的TNF-α陽(yáng)性信號(hào)表達(dá)強(qiáng)度,無(wú)顯著差異(P>0.05)。IR組小鼠肺組織TNF-α表達(dá)于再灌注6h開(kāi)始增高,并隨著再灌注時(shí)間推移,逐漸增強(qiáng),48h達(dá)到峰值,5d回復(fù)基線水平(P<0.01)。 5、各組小鼠肺組織白介素-6、腫瘤壞死因子-a mRNA的表達(dá)水平 (1)白介素-6的表達(dá):對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組間肺組織的IL-6mRNA表達(dá)水平無(wú)顯著差異(P>0.05)。IR組再灌注6h,IL-6mRNA表達(dá)水平顯著增高,48h達(dá)到峰值,5d回落至基線水平(P<0.01)。 (2)腫瘤壞死因子-a的表達(dá):對(duì)照組、假手術(shù)組各亞組間肺組織的TNF-αmRNA表達(dá)水平無(wú)顯著差異(P>0.05)。IR組再灌注6h,TNF-α mRNA表達(dá)水平顯著增高,48h達(dá)到峰值,5d回落至基線水平(P<0.01)。 結(jié)論 1、缺血再灌注腎損傷模型小鼠的急性腎損傷與急性肺損傷在時(shí)空上密切相關(guān),提示缺血再灌注腎損傷模型是研究急性腎損傷誘導(dǎo)遠(yuǎn)隔器官——肺損傷的較好動(dòng)物模型。 2、缺血再灌注腎損傷模型小鼠肺組織IL-6及TNF-α的表達(dá)與肺損傷程度密切相關(guān),提示IL-6及TNF-α是缺血再灌注腎損傷模型小鼠急性肺損傷的增惡因子。
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【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R726.9
【目錄】:
- 縮略詞表4-5
- 中文摘要5-8
- Abstract8-11
- 第一部分 缺血再灌注腎損傷模型小鼠的肺臟病理?yè)p害11-24
- 前言11-12
- 1. 材料與方法12-15
- 2. 結(jié)果15-23
- 3. 討論23
- 4. 結(jié)論23-24
- 第二部分 肺組織中白介素-6 及腫瘤壞死因子-α的表達(dá)及對(duì)肺損傷的影響24-41
- 前言24
- 1. 材料與方法24-33
- 2. 結(jié)果33-39
- 3. 討論39-40
- 4. 結(jié)論40-41
- 第三部分 全文結(jié)論41-42
- 參考文獻(xiàn)42-46
- 綜述46-54
- 參考文獻(xiàn)51-54
- 致謝54-55
- 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文55
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