本文關(guān)鍵詞：腺病毒介導的人HSP70對HPH新生大鼠HIF-1α及其調(diào)節(jié)因子和肺血管重塑作用研究

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【摘要】：目的:通過免疫組化方法探討人熱休克蛋白70(HSP70)對缺氧性肺動脈高壓(HPH)新生大鼠肺動脈壓力、肺血管重塑以及HIF-1a、ET-1、iNOS的作用。方法:將128只Wistar新生大鼠按隨機數(shù)字表法分為HPH組和對照組(C組),根據(jù)轉(zhuǎn)染液不同將HPH組再分為鹽水組(H1組)、空病毒組(H2組:標有綠色熒光信號但未攜帶目的基因的病毒載體)和病毒+HSP70組(H3組:標有綠色熒光信號同時攜帶目的基因的病毒載體)。缺氧建模3、7、10、14d檢測各組新生大鼠的肺動脈壓力(mPAP)及肺血管重塑指標(MT%、MA%),并測定肺血管HSP70、HIF-1a、ET-1、iNOS免疫組化強度。結(jié)果:缺氧3、7、10d時,鹽水組和空病毒組HSP70表達較對照組增強(P0.01),病毒+HSP70組HSP70表達高于其余三組(P0.01),缺氧14d時各組間HSP70表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。缺氧3、7、10d時,鹽水組和空病毒組新生大鼠mPAP高于對照組(P0.05),病毒+HSP70組新生大鼠mPAP與對照組比較未見明顯增高(P0.05);缺氧14d時,HPH組新生大鼠mPAP比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),但均明顯高于對照組(P0.05)。缺氧7、10d鹽水組和空病毒組MT%、MA%明顯高于對照組(P0.05),病毒+HSP70組較對照組差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);缺氧14d時,HPH組MT%、MA%比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),但均明顯高于對照組(P0.05)。缺氧3、7、10d HPH組肺組織HIF-1α及ET-1表達均強于對照組(P0.01),其中病毒+HSP70組HIF-1α及ET-1表達低于鹽水組和空病毒組(P0.01),但在鹽水組和空病毒組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);缺氧14d時各組間HIF-1α及ET-1表達強度比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。缺氧3、7、10d鹽水組、空病毒組、病毒+HSP70組肺組織iNOS表達均強于對照組(P0.01),其中缺氧3、7d病毒+HSP70組iNOS表達低于鹽水組和空病毒組(P0.01),但在鹽水組和空病毒組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);缺氧10d,病毒+HSP70組iNOS表達低于空病毒組(P0.01),HPH組間比較差異無統(tǒng)計學意義;缺氧14d時各組間iNOS表達強度比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:腺病毒介導的HSP70在大鼠肺組織高效表達后,降低HIF-1a及其下游靶基因ET-1、iNOS的表達,降低缺氧性肺動脈高壓新生Wistar大鼠的肺動脈壓力,減輕肺血管重塑。
【關(guān)鍵詞】：肺動脈高壓 熱休克蛋白70 新生大鼠
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R722.1
【目錄】：

• 導師評閱表3-6
• 中英文縮略詞對照表6-10
• 摘要10-12
• Abstract12-14
• 前言14-15
• 研究內(nèi)容與方法15-23
• 1. 研究對象15
• 1.1. 動物倫理15
• 1.2. 入選標準15
• 1.3. 排除標準15
• 1.4. 樣本含量的計算15
• 2. 主要儀器及試劑15-16
• 2.1. 主要儀器15
• 2.2. 主要試劑15-16
• 3. 實驗方法16-21
• 3.1. 分組16-17
• 3.2. 平均肺動脈壓力的測定17
• 3.3. 腺病毒定位在缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺組織判斷17-18
• 3.4. 肺血管重塑指標的檢測18
• 3.5. 肺組織HSP70、HIF-a、iNOS免疫組化18
• 3.6. 石蠟切片的制作程序18-19
• 3.7. 電鏡觀察標本的制作19
• 3.8. HE染色程序19-20
• 3.9. VG染色20
• 3.10. 免疫組化20-21
• 4. 質(zhì)量控制21
• 4.1. 肺動脈壓檢測過程中質(zhì)量控制21
• 4.2. 標本采集及病理染色過程中的質(zhì)量控制21
• 4.3. 實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析過程中的質(zhì)量控制21
• 5. 統(tǒng)計學分析21-22
• 6. 技術(shù)路線圖22-23
• 結(jié)果23-31
• 1. 腺病毒在缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺組織中的定位23
• 2. 免疫組化法檢測肺組織HSP70的表達及反應強度比較23-24
• 3. 腺病毒介導HSP70缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺動脈壓力比較24-25
• 4. 光學顯微鏡觀察肺血管結(jié)構(gòu)的變化25-26
• 5. 電鏡下新生大鼠肺動脈超微結(jié)構(gòu)的變化26-27
• 6. 肺動脈血管重塑指標比較27-28
• 7. 腺病毒介導的HSP70轉(zhuǎn)染至新生大鼠肺組織中HIF-1α、ET-1、iNOS的免疫組化表達強度比較28-31
• 7.1. HIF-1α的免疫組化表達強度比較28-29
• 7.2. ET-1 的免疫組化表達強度比較29
• 7.3. iNOS的免疫組化表達強度比較29-31
• 討論31-37
• 1. 腺病毒介導的熱休克蛋白70在缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺組織中HSP70免疫強度的表達31-32
• 2. 腺病毒介導的HSP70對缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺動脈壓力的影響32
• 3. 腺病毒介導的HSP70對缺氧性肺動脈高壓新生大鼠肺血管結(jié)構(gòu)的影響32-33
• 4. 腺病毒介導的HSP70對缺氧性肺動脈高壓新生大鼠中HIF-1a的影響33-35
• 5. 腺病毒介導的HSP70對缺氧性肺動脈高壓新生大鼠HIF-1α下游靶基因（ET-1、iNOS）的影響35-36
• 6. 本研究創(chuàng)新點36
• 7. 本研究不足之處36
• 8. 展望36-37
• 小結(jié)37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻39-44
• 綜述44-53
• 參考文獻48-53
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文53

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本文編號：773562