發(fā)布時(shí)間：2017-08-31 01:28

  本文關(guān)鍵詞：Bax抑制肽對(duì)缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用

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【摘要】：目的：通過檢測(cè)腦組織內(nèi)凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目及caspase-3蛋白量,探討B(tài)ax抑制肽對(duì)缺氧缺血腦損傷新生鼠抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡的作用及有效治療時(shí)間窗。 方法：選取日齡Wister新生大鼠182只做為研究對(duì)象,隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=14)、對(duì)照組(n=84)和實(shí)驗(yàn)組(n=84)。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組通過結(jié)扎左側(cè)頸總動(dòng)脈以及置于8%的氮氧混合氣中2小時(shí)建立缺氧缺血性腦損傷(hypoxia-ischemic brain damage, HIBD)模型,假手術(shù)組僅游離左側(cè)頸總動(dòng)脈,不結(jié)扎不低氧處理。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別經(jīng)左側(cè)側(cè)腦室注射5ug Bax-抑制肽(5ul)和生理鹽水(5ul)。根據(jù)HIBD模型建立后注射Bax抑制肽和生理鹽水的時(shí)間不同,將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分為Oh、6h、12h.24h、48h、72h六個(gè)亞組(n=14)。假手術(shù)組不注射任何藥物。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均于HIBD模型建立后7天處死,進(jìn)行腦組織病理檢測(cè)、TUNEL法檢測(cè)凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目、蛋白免疫印跡法檢測(cè)Caspase-3蛋白含量。 結(jié)果：①左側(cè)海馬區(qū)腦組織HE染色：與假手術(shù)組比較,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組腦組織病理損傷明顯。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在Oh、6h、12h、24h、48h亞組比較,病理損傷程度較輕,在72h亞組比較無明顯差異。①TUNEL染色左側(cè)海馬區(qū)腦組織凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組在Oh、6h、12h、24h、48h各亞組比較,凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在72h亞組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)組的各亞組之間依次比較,HIBD模型后越早注射Bax抑制肽,凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目越少,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③蛋白免疫印跡法檢測(cè)左側(cè)海馬區(qū)腦組織caspase-3蛋白含量：實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組在Oh、6h、12h、24h、48h各亞組比較,caspase-3含量明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在72h亞組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)組各亞組之間依次比較,HIBD模型后越早注射Bax抑制肽,腦組織內(nèi)caspaso-3含量越少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：①新生鼠缺氧缺血腦損傷后海馬區(qū)腦組織內(nèi)凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目和caspase-3蛋白含量均明顯增加；②Bax-抑制肽可明顯減少缺氧缺血腦損傷新生鼠腦組織凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目和降低caspase-3蛋白含量,可抑制缺氧缺血后腦組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡；③缺氧缺血后48小時(shí)內(nèi)是Bax抑制肽治療缺氧缺血腦損傷的有效治療時(shí)間窗,且越早應(yīng)用治療效果越好。
【關(guān)鍵詞】：缺氧缺血 腦 Bax抑制肽 抑制凋亡 新生鼠
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R722.1
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-7
• 引言7-9
• 第1章 材料與方法9-14
• 1.1 材料9-10
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物9
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑9-10
• 1.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備10
• 1.2. 方法10-14
• 1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組與處理10-11
• 1.2.2 標(biāo)本采集11
• 1.2.3 制備腦組織切片11-12
• 1.2.4 HE染色12
• 1.2.5 TUNEL染色12-13
• 1.2.6 Western blot檢測(cè)13-14
• 第2章 數(shù)據(jù)采集及處理14-15
• 2.1 數(shù)據(jù)采集14
• 2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理14-15
• 第3章 結(jié)果15-18
• 3.1 新生鼠缺血缺氧性腦損傷(HIBD)模型建立15
• 3.2 腦組織外觀15
• 3.3 新生大鼠腦組織HE染色病理改變15
• 3.4 TUNEL染色檢測(cè)凋亡陽性神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目15-16
• 3.5 Western blot檢測(cè)Caspase-3蛋白量16-18
• 第4章 討論18-22
• 第5章 結(jié)論22-23
• 附圖表23-26
• 參考文獻(xiàn)26-29
• 綜述29-39
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 攻讀學(xué)位期間成果39-40
• 致謝40-41

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 曾婭莉;黃文芳;盧賢瑜;;細(xì)胞凋亡時(shí)線粒體鈣離子信號(hào)調(diào)節(jié)因素研究進(jìn)展[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

2 蔣犁,湯云珍,黃曉明,陳平圣,胡向陽;實(shí)驗(yàn)性新生兒缺氧缺血腦損傷模型鼠腦細(xì)胞凋亡動(dòng)態(tài)變化[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2000年04期

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本文編號(hào)：762658