本文關鍵詞：急性白血病兒童不同化療階段NK細胞水平的研究

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【摘要】：目的： 采用流式細胞儀檢測急性白血病患兒化療前及不同化療階段外周血NK細胞活性及數(shù)量,探討白血病患兒化療后NK細胞免疫功能重建過程,為NK免疫治療提供基礎資料。 方法： 采用基于CD107a標記流式細胞儀檢測NK細胞活性,同時檢測NK細胞數(shù)量,對16例新發(fā)急性白血病患兒及46例完全緩解患兒外周血NK細胞活性及數(shù)量進行檢測,以15例健康查體兒童作為正常對照組。16例初治急性白血病患兒包括11例急性淋巴細胞白血病(ALL)及5例急性非淋巴細胞白血病(ANLL)。46例完全緩解患兒包括ALL39例和ANLL7例,按照治療時間分為三組,包括完全緩解第6-9月組(CR-A組)16例,完全緩解第1年-1年半組(CR-B組)14例,完全緩解第2年以上組(CR-C組)16例。分別采集外周血檢測NK細胞活性及數(shù)量變化。有15例患兒同時應用乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測NK細胞活性,并與流式細胞儀檢測法比較,分析兩種檢測方法的相關性。 結果： 新發(fā)白血病患兒的NK細胞數(shù)量及活性分別是(3.86±2.14)%,(5.07±2.79)%,正常對照組兒童NK細胞的數(shù)量及活性分別是(10.80±2.01)%,(19.27±1.64)%,新發(fā)白血病患兒的NK細胞數(shù)量及活性明顯低于正常對照組(P均0.05)。新發(fā)白血病組中,ALL組的NK數(shù)量高于ANLL組(P0.05),而其NK活性低于ANLL組(P(?)0.05)。46例完全緩解組患兒NK細胞數(shù)量及活性分別是(7.01±2.76)%,(7.11±3.14)%,均高于新發(fā)白血病患兒(P均0.05)。新發(fā)白血病患兒的NK細胞數(shù)量為(3.86±2.14)%,完全緩解組患兒中,CR-A組、CR-B組、CR-C組患兒NK細胞數(shù)量分別為(5.97±2.19)%、(6.59±3.11)%、(8.36±2.42)%,CR-A組、CR-B組、CR-C組高于新發(fā)白血病組(P均0.05),CR-C組高于新發(fā)組、CR-A組、CR-B組(P均0.05),但CR-A組與CR-B組比較,差別無統(tǒng)計學意義(P0.05)。新發(fā)白血病患兒的NK細胞活性是(5.07±2.79)%,完全緩解組患兒中,CR-A組、CR-B組、CR-C組患兒NK細胞活性分別為(4.78±1.92)%、(7.11±2.27)%、(9.43±3.13)%,CR-A組與新發(fā)白血病組比較,差別無統(tǒng)計學意義(P0.05),CR-B組、CR-C組高于新發(fā)白血病組(P均0.05),CR-B組高于CR-A組和新發(fā)組(P均0.05)。CR-C組與CR-B組無統(tǒng)計學差異(P0.05),CR-C組的NK細胞數(shù)量及活性均低于正常對照組(P均0.05)。CD107a標記流式細胞儀檢測法與LDH釋放法檢測法檢測的NK細胞活性相關系數(shù)為0.754,兩者之間呈正相關。 結論： 1.基于CD107a標記流式細胞儀檢測NK細胞活性方法與LDH釋放法呈正相關,是一種敏感性好,可靠易行的檢測NK細胞活性的方法。2.新發(fā)白血病患兒NK細胞數(shù)量與活性低于正常對照,隨著時間的延長逐漸升高,分別于完全緩解6-9月及完全緩解1年以后升高,但完全緩解2年以后仍低于正常。3.新發(fā)ANLL患兒NK細胞數(shù)量低于ALL患兒,但其活性高于ALL患兒。
【關鍵詞】：急性白血病 NK細胞活性 CD107a 流式細胞儀 LDH釋放法
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R733.71
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-9
• 引言9-10
• 第一章 材料與方法10-16
• 1.1 材料10-12
• 1.1.1 研究對象10-11
• 1.1.2 試劑材料11
• 1.1.3 實驗儀器11-12
• 1.2 實驗方法12-15
• 1.2.1 人紅白血病K562細胞株的培養(yǎng)12
• 1.2.2 基于CD107a標記外周血NK細胞活性的檢測12-13
• 1.2.2.1 標本采集與外周血單個核細胞(PBMCs)提取12-13
• 1.2.2.2 PBMCs與K562細胞共培養(yǎng)13
• 1.2.2.3 流式細胞儀分析NK細胞表面CD107a表達13
• 1.2.3 LDH釋放法檢測NK細胞活性13-15
• 1.3 結果處理15
• 1.4 統(tǒng)計學處理15-16
• 第二章 結果16-26
• 2.1 K562細胞生長觀察16
• 2.2 基于CD107a標記的NK細胞活性檢測方法與LDH釋放法比較16-17
• 2.3 急性白血病新發(fā)組與正常對照組NK細胞數(shù)量的比較17-18
• 2.3.1 ALL新發(fā)組與ANLL新發(fā)組NK細胞數(shù)量的比較17-18
• 2.3.2 AL新發(fā)組與正常對照組NK細胞數(shù)量的比較18
• 2.4 急性白血病新發(fā)組與正常對照組NK細胞活性的比較18-19
• 2.4.1 ALL新發(fā)組與ANLL新發(fā)組NK細胞活性的比較18
• 2.4.2 AL新發(fā)組與正常對照組NK細胞活性的比較18-19
• 2.5 不同化療階段NK細胞數(shù)量的比較19-21
• 2.5.1 白血病初治期與緩解期NK細胞數(shù)量的比較19-20
• 2.5.2 白血病不同治療時期NK細胞數(shù)量的比較20-21
• 2.5.3 完全緩解2年以上組與正常對照組NK細胞數(shù)量的比較21
• 2.6 不同化療階段NK細胞活性的比較21-26
• 2.6.1 白血病新發(fā)組與緩解組NK細胞活性的比較22-23
• 2.6.2 白血病不同治療時期NK細胞活性的比較23-25
• 2.6.3 完全緩解2年以上組與正常對照組NK細胞活性比較25-26
• 第三章 討論26-29
• 第四章 結論29-30
• 參考文獻30-32
• 綜述32-46
• 綜述參考文獻41-46
• 攻讀學位期間研究成果46-47
• 致謝47-48

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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本文編號：752702