本文關(guān)鍵詞：EPEC胃腸感染小鼠模型血漿Th1、Th2、Th17淋巴細(xì)胞因子變化及意義

  更多相關(guān)文章： 動物模型 腹瀉 細(xì)菌感染 淋巴細(xì)胞因子

【摘要】：目的:兒童感染性腹瀉病中關(guān)于CD4~+T淋巴細(xì)胞亞群及其代表因子的研究在輪狀病毒性腹瀉中多有報(bào)道，在細(xì)菌性腹瀉病例中此類研究少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)利用EPEC E2348/69型給昆明小鼠灌胃，模仿人類胃腸感染主要感染途徑（經(jīng)口感染），制造人類細(xì)菌感染性腹瀉疾病動物模型。檢測小鼠發(fā)病時(shí)的外周血漿中的Th1、Th2、Th17淋巴細(xì)胞代表因子的水平，探索小鼠胃腸道感染時(shí)的免疫反應(yīng)變化。 對象與方法：研究對象：普通健康昆明小鼠40只，分成生理鹽水對照組(20只)和實(shí)驗(yàn)組（20只）。實(shí)驗(yàn)組給予EPEC-E2348/69混懸液灌胃，濃度5×10~8CFU/ml，劑量0.5ml。對照組處理因素將EPEC混懸液更換為生理鹽水，余同實(shí)驗(yàn)組。灌胃8小時(shí)后觀察小鼠的大便性狀、精神狀態(tài)、行為動作，計(jì)算腹瀉指數(shù)、腹瀉率、糞便培養(yǎng)EPEC檢出率。灌胃前及灌胃后24h取小鼠外周血行血細(xì)胞分析，細(xì)菌灌胃后24h取實(shí)驗(yàn)組和對照組外周血，離心后取血漿。采用CBA技術(shù)檢測血漿中的IL-2、TNF、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A淋巴細(xì)胞因子水平。 結(jié)果： 1.小鼠感染性腹瀉動物模型制備成功，實(shí)驗(yàn)組小鼠灌胃前WBC（7.45±1.86）×10~9較灌胃后24小時(shí)WBC（6.22±1.42）×10~9差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.0130.05）。N(%)、L(%)灌胃前后雖有改變但未有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.071，0.0760.05）；實(shí)驗(yàn)組腹瀉指數(shù)（1.12±0.66）高于對照組（0.00±0.00）且有統(tǒng)計(jì)差異（P0.05），，實(shí)驗(yàn)組腹瀉率（85%）及糞便培養(yǎng)EPEC檢出率（75%）高于對照組0%；細(xì)菌灌胃后約8小時(shí)小鼠出現(xiàn)倦怠、精神萎靡、行動遲緩，部分小鼠出現(xiàn)粘液便、稀便，部分小鼠出現(xiàn)松軟大便（較正常糞便含水多）。對照組小鼠大便性狀及精神狀態(tài)等無明顯改變。 2.小鼠灌胃24h后外周血漿中Th1細(xì)胞因子：IL-2實(shí)驗(yàn)組（2.56±0.31）pg/ml較對照組（2.25±0.31）pg/ml升高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.006）,實(shí)驗(yàn)組TNF（11.89±3.12）pg/ml、IFN-γ（25.45±69.20）pg/ml較對照組TNF（10.42±3.35）pg/ml、IFN-γ（7.45±7.80）pg/ml水平升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.164，0.262）；Th2細(xì)胞因子：實(shí)驗(yàn)組IL-6（16.71±19.64）pg/ml、IL-10（12.11±3.61）pg/ml、IL-4（3.10±0.62）pg/ml與對照組IL-6（5.96±6.75）pg/ml、IL-10（12.11±3.61）pg/ml、IL-4（2.54±0.24）pg/ml比較水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.030，0.022，0.001）；Th17細(xì)胞因子： IL-17A實(shí)驗(yàn)組（3.01±0.58）pg/ml較對照組（2.62±0.39）pg/ml升高且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.020）。 3.實(shí)驗(yàn)組Th1細(xì)胞因子總水平（39.91±71.00）pg/ml較對照組（20.13±10.46）pg/ml水平上升，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.2370.05）.實(shí)驗(yàn)組Th2細(xì)胞因子總水平（34.84±20.06）pg/ml較對照組（20.62±8.37）pg/ml水平上升，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.0070.05）.實(shí)驗(yàn)組Th1/Th2比例(0.975)較對照組(1.024)有所降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.8320.05）。 結(jié)論： 1.本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)口灌喂EPEC感染小鼠，模仿人類胃腸感染主要誘發(fā)途徑（經(jīng)口感染），人類細(xì)菌感染性腹瀉疾病動物模型復(fù)制成功。 2. EPEC感染小鼠后，小鼠外周血漿中IL-2、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A淋巴細(xì)胞因子水平明顯升高，Th1/Th2/Th17細(xì)胞（因子）均參與了免疫反應(yīng)過程，小鼠胃腸道感染后體內(nèi)炎癥反應(yīng)是一個(gè)整體和動態(tài)過程。 3.EPEC感染小鼠后，小鼠體內(nèi)以Th2細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫為主，Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)在炎癥反應(yīng)過程中占非主導(dǎo)地位。 4.EPEC胃腸感染小鼠動物模型血漿中Th1、Th2、Th17類細(xì)胞因子升高及比例改變，提示EPEC腸道感染可能與慢性免疫性、變態(tài)反應(yīng)性疾病的發(fā)生相關(guān)，有待更全面及深入的探索。
【關(guān)鍵詞】：動物模型 腹瀉 細(xì)菌感染 淋巴細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R725.7
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 1.引言11-16
• 2.材料和方法16-20
• 2.1 材料16
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物16
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑16
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器16
• 2.2 方法16-19
• 2.2.1 感染性腹瀉小鼠模型制備16-17
• 2.2.2 感染性腹瀉小鼠外周血T淋巴細(xì)胞因子檢測17-19
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理19-20
• 3.結(jié)果20-29
• 3.1 感染性腹瀉小鼠模型的建立20-21
• 3.2 血漿中 Th1、Th2、Th17 淋巴細(xì)胞因子水平：21
• 3.3 小鼠外周血總體 Th1、Th2 水平及 Th1/Th2 比例變化21-29
• 4.討論29-36
• 4.1 動物模型制備及腹瀉發(fā)病機(jī)理29-30
• 4.2 腸道免疫反應(yīng)與 Th1、Th2、Th17 細(xì)胞及其代表因子30-36
• 5. 結(jié)論36-37
• 6.參考文獻(xiàn)37-41
• 7.附錄41-42
• 8.致謝42-43
• 綜述43-52
• 參考文獻(xiàn)49-52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曹玲芝;馬利芹;王麗葉;張曉利;徐倩倩;霍曉青;靳喜朋;秦建華;董世山;;建立動物腹瀉模型的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年26期

2 郭渠蓮;劉文君;曾國慶;陳書琴;王開正;鄧正華;蔡美珠;曾瑜;;嬰幼兒病毒性肺炎的病毒病原學(xué)及臨床特點(diǎn)[J];中國兒童保健雜志;2006年04期

3 劉恩慶;葉濤;施鳳蘭;劉功姝;張曉燕;李義民;;天津市0～18歲兒童腹瀉流行病學(xué)調(diào)查[J];中國兒童保健雜志;2007年06期

4 楊友新;覃佩枝;吳子娟;;細(xì)菌性肺炎血清超敏-CRP、白細(xì)胞介素-6及纖維蛋白原的變化[J];海南醫(yī)學(xué);2010年21期

5 趙顯虹;劉繼賢;李瑞;賈文燕;;副流感病毒3型感染肺炎患兒細(xì)胞免疫功能分析[J];臨床肺科雜志;2011年05期

6 熊文虹 ,杜華 ,李柳青;急性感染性腹瀉患兒血清細(xì)胞因子測定的臨床意義[J];臨床兒科雜志;2002年07期

7 許滸,熊密,吳煥明,劉紹春,郝春榮,趙時(shí)宇,黃慶華,車東媛;肺炎克雷伯桿菌感染引起大鼠小氣道炎癥的免疫學(xué)特征[J];上海免疫學(xué)雜志;2001年04期

8 李妤蓉;馬濤;趙金媛;李朝爭;;沙門氏菌感染T細(xì)胞激活的研究[J];社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志;2007年09期

9 劉殿峰,劉淑霞,劉秀霞,楊淑萍,馬丹,高洪喜,劉占軍,王仁輝,薄文學(xué);昆明小鼠生物學(xué)特性標(biāo)準(zhǔn)化研究[J];中國生物制品學(xué)雜志;2001年01期

10 楊立華;傅曉鳳;潘傳四;李黑大;揭羽青;;細(xì)胞炎前因子測定對感染性腹瀉診斷的價(jià)值[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2007年01期

本文編號：734372