本文關(guān)鍵詞：分化相關(guān)基因及維生素A對(duì)先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的發(fā)病作用初探

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【摘要】：第一節(jié)FOXAl、DUSP6和HA117在先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的表達(dá)研究目的：檢測(cè)先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥(Hirschsprung's Disease, HD)患兒腸組織中FOXA1、DUSP6及長(zhǎng)鏈非編碼RNA(Long Non-coding RNA,LncRNA)HA117的表達(dá)特點(diǎn),探討其與HD發(fā)病機(jī)制的可能聯(lián)系。方法：收取34例臨床診斷為HD的患兒手術(shù)結(jié)腸組織標(biāo)本,結(jié)腸組織由近端至遠(yuǎn)端分為3組：吻合口組、擴(kuò)張段組和痙攣段組。采用Real-time PCR、免疫組織化學(xué)染色、Western Blot、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法檢測(cè)FOXA1、DUSP6及HA117在各組結(jié)腸組織的表達(dá)水平。結(jié)果：在吻合口組、擴(kuò)張段組和痙攣段組,FOXA1 mRNA相對(duì)表達(dá)量依次為6.703±2.235、3.017±0.848、1.432±0.396,呈依次降低趨勢(shì),其中,與吻合口相比,痙攣段表達(dá)量顯著降低(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；DUSP6 mRNA的相對(duì)表達(dá)量分別為2.694±0.683、1.971±0.385、1.113±0.162,呈依次降低趨勢(shì),其中,與吻合口相比,痙攣段表達(dá)量顯著降低(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；HA117 RNA的相對(duì)表達(dá)量分別為0.214±0.049、0.807±0.21、1.744±0.565,呈依次增高的趨勢(shì)。其中,與吻合口相比,痙攣段表達(dá)量顯著增高(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在吻合口段的肌間神經(jīng)叢,均可見(jiàn)FOXA1及DUSP6蛋白呈棕黃色的陽(yáng)性染色,而在痙攣段幾乎未見(jiàn)陽(yáng)性染色。在HD的吻合口、擴(kuò)張段、痙攣段結(jié)腸組織中,FOXA1蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為1.416±0.153,0.830±0.060,0.821±0.072,其中,與吻合口相比,擴(kuò)張段與痙攣段表達(dá)量顯著降低(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；DUSP6蛋白的相對(duì)表達(dá)量分別為1.187±0.090,1.067±0.113,0.809±0.040,其中,與吻合口相比,痙攣段表達(dá)量顯著降低(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：FOXA1和DUSP6基因或能促進(jìn)ENS的分化發(fā)育,并且二者或?yàn)樯舷掠侮P(guān)系,存在于RET信號(hào)通路中,FOXA1/DUSP6的表達(dá)抑制可能會(huì)導(dǎo)致HD的發(fā)生；HA117可能在ENS的形成中發(fā)揮著抗分化的作用,其高表達(dá)可能導(dǎo)致HD的發(fā)生。第二節(jié)先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥患兒中血清維生素A及腸組織RARα、HA117的表達(dá)特點(diǎn)目的：檢測(cè)HD患兒中血清維生素A及腸組織中RARα、抗分化LncRNA HA117的表達(dá)特點(diǎn),探討其與HD發(fā)病機(jī)制的可能聯(lián)系。方法：收取17例臨床診斷為HD的患兒術(shù)前外周血及手術(shù)結(jié)腸組織標(biāo)本,結(jié)腸組織由近端至遠(yuǎn)端分為3組：吻合口組、擴(kuò)張段組和痙攣段組。檢測(cè)血清維生素A濃度,采用Real-time PC R、免疫組織化學(xué)染色、Western Blot、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法檢測(cè)ARa及HA117在各組結(jié)腸組織的表達(dá)水平。結(jié)果：17例HD患兒均有不同程度維生素A缺乏,血清維生素A平均濃度為0.73±0.05μmol/L。在吻合口組、擴(kuò)張段組和痙攣段組,RARαmRNA相對(duì)表達(dá)量依次為3.62±1.12、1.81±0.69、0.65±0.32,與吻合口相比,痙攣段表達(dá)量降低(P0.05)；HA117mRNA相對(duì)表達(dá)量依次為0.47±0.15、1.25±0.40、2.57±0.70,與吻合口相比,痙攣段表達(dá)量增高(P0.05)；RARa蛋白相對(duì)表達(dá)量依次為1.16±0.05、0.99±0.05、0.88±0.04,與吻合口相比,擴(kuò)張段及痙攣段表達(dá)量降低(P0.05)。結(jié)論：維生素A、RARa及HAl 17可能共同參與ENS的發(fā)育過(guò)程；其中,維生素A和RARα可能促進(jìn)了ENS的正常分化發(fā)育,高表達(dá)的HA117可能對(duì)抗了前者的促分化作用,阻礙了ENS正常分化發(fā)育過(guò)程,進(jìn)而導(dǎo)致HD的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】：先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥 HA117 FOXA1 DUSP6 先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥 HA117 維生素A RARα
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R725.7
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-14
• 第一節(jié) FOXA1,DUSP6和HA117在先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的表達(dá)研究14-29
• 1 材料與方法14-21
• 2 結(jié)果21-25
• 3 討論25-28
• 4 結(jié)論28-29
• 第二節(jié) 先天性腸無(wú)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥患兒中血清維生素A及腸組織RARA、HA117的表達(dá)特點(diǎn)29-38
• 1 材料與方法29-31
• 2 結(jié)果31-35
• 3 討論35-37
• 4 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 全文總結(jié)42-43
• 文獻(xiàn)綜述43-51
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士期間發(fā)表論文52

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本文編號(hào)：620075