本文關(guān)鍵詞：兒童B系急性淋巴細(xì)胞性白血病CD133-2的生物學(xué)特性及其分子機(jī)制初步研究

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【摘要】：目的：探究CD133-2在兒童B系急性淋巴細(xì)胞白血�。˙-ALL）作為干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)的意義及其作用的分子機(jī)制，從而明確CD133-2是否為兒童B-ALL的白血病干細(xì)胞（LSC）標(biāo)志，也為進(jìn)一步研究?jī)和疊-ALL的分子發(fā)病機(jī)制奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法： 1、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診和復(fù)發(fā)兒童B-ALL（共38例，包含初診34例，復(fù)發(fā)4例）骨髓單個(gè)核細(xì)胞（BM-MNCs）CD133-2的表達(dá)（IgG1-PE為同型對(duì)照），并采集5例CD133-2陽(yáng)性表達(dá)(比例≥20%)的B-ALL患兒（初診4例，復(fù)發(fā)1例）BM-MNCs，免疫磁珠分選法（MACS）分選純化出CD133-2+CD19+、CD133-2+CD19-、CD133-2-CD19+、CD133-2-CD19-四組亞群細(xì)胞，體外甲基纖維素半固體集落培養(yǎng)（包含SCF、GM-CSF、G-CSF、IL-3、IL-6、EPO等成分），觀(guān)察各亞群集落形成能力，并對(duì)培養(yǎng)后形成的集落細(xì)胞瑞氏-姬薩姆染色做形態(tài)學(xué)鑒定。 2、6例CD133-2表達(dá)陽(yáng)性的B-ALL（初診4例，復(fù)發(fā)2例）患兒BM-MNCs中MACS分選純化出CD133-2+CD19+、CD133-2+CD19-、CD133-2-CD19+、CD133-2-CD19-四組亞群細(xì)胞，以CD133-2+CD19-亞群細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組，CD133-2-CD19+亞群細(xì)胞為對(duì)照組，采用Real-time PCR法和基因芯片試劑盒，分析與TGF-β信號(hào)通路相關(guān)的84個(gè)基因分子在以上兩群細(xì)胞中的表達(dá)差異。 結(jié)果： 1、流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示：38例兒童B-ALL中，， CD133-2的陽(yáng)性表達(dá)率為60.5%（比例≥20%為表達(dá)陽(yáng)性）。其中5例兒童B-ALL的BM-MNCs經(jīng)MACS分選純化后，體外甲基纖維素半固體集落培養(yǎng)14天，CD133-2+CD19-細(xì)胞群在第5天出現(xiàn)紅系集落，第7天后出現(xiàn)混合集落，第10天時(shí)集落較第5天增長(zhǎng)10倍，增長(zhǎng)速度明顯加快，第12天時(shí)集落狀態(tài)良好，第14天后集落未再增加。對(duì)生長(zhǎng)狀態(tài)良好的集落細(xì)胞瑞氏-姬薩姆染色，CD133-2+CD19-形成的集落中可見(jiàn)紅系、粒系、巨噬和單核系細(xì)胞。其他亞群形成集落不明顯。比較各亞群細(xì)胞集落形成方面差異具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.001）。 2、Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果顯示：初診兒童B-ALL中CD133-2+CD19-細(xì)胞亞群與TGFβ信號(hào)通路下游DCN、IGFBP3、THBS1、Smad6基因的上調(diào)有關(guān)，與SERPINE1基因的下調(diào)有關(guān)；復(fù)發(fā)組中CD133-2+CD19-細(xì)胞亞群與TGFβ信號(hào)通路下游TGFβ1、LTBP1基因的上調(diào)有關(guān)，與IGFBP3、 SERPINE1基因的下調(diào)有關(guān)。 結(jié)論： 1、體外半固體集落培養(yǎng)表明兒童B-ALL中CD133-2+CD19-細(xì)胞亞群具有多向分化能力，結(jié)合我們前期體外懸浮培養(yǎng)結(jié)果提示其具有長(zhǎng)期增殖能力，說(shuō)明此亞群具備了LSC的特性，由此CD133-2+CD19-亞群可能是兒童B-ALL來(lái)源的LSC免疫表型標(biāo)志。 2、DCN、IGFBP3、THBS1、Smad6、SERPINE1以及TGFβ1、LTBP1、IGFBP3、SERPINE1等TGFβ信號(hào)通路的轉(zhuǎn)錄分子分別參與了初診和復(fù)發(fā)B-ALL患兒CD133-2+CD19-亞群細(xì)胞生物學(xué)特性的調(diào)控，這些分子的異常表達(dá)可能與兒童B-ALL的發(fā)病或復(fù)發(fā)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：兒童B系急性淋巴細(xì)胞白血病 CD133-2 白血病干細(xì)胞 TGF-β信號(hào)通路分子
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R733.71
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言及基金資助9-11
• 第一部分 兒童 B 系急性淋巴細(xì)胞性白血病 CD133-2 的生物學(xué)特性11-34
• 一、材料和方法11-19
• 二、結(jié)果19-26
• 三、討論26-30
• 四、結(jié)論30
• 參考文獻(xiàn)30-34
• 第二部分 兒童 B-ALL 中 TGFΒ信號(hào)通路分子對(duì) CD133-2~+CD19~-亞群細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制初步研究34-51
• 一、材料與方法34-39
• 二、結(jié)果39-43
• 三、討論43-47
• 四、結(jié)論47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 全文結(jié)論51-52
• 綜述52-64
• 參考文獻(xiàn)61-64
• 中英文對(duì)照縮略詞表64-66
• 攻讀學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表的論文66-67
• 致謝67-68

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1 陳子興;白血病干細(xì)胞的細(xì)胞和分子生物學(xué)特性及治療對(duì)策[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2005年04期

2 ;從人白血病模型中分離出白血病干細(xì)胞[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2006年08期

3 ;白血病干細(xì)胞移植后乳糜瀉緩解[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2008年01期

4 牛新清;佘妙容;李強(qiáng);王輝;郭坤元;;急性髓系白血病細(xì)胞系中白血病干細(xì)胞樣亞群的分離和鑒定[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2009年11期

5 佘妙容;;以白血病干細(xì)胞為靶的治療新策略[J];廣東醫(yī)學(xué);2010年06期

6 崔鶴;孟學(xué)民;肖鎮(zhèn);;白血病干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年S2期

7 劉博;史策;周晉;;白血病干細(xì)胞及其靶向清除[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2014年04期

8 陳運(yùn)賢;鐘雪云;;白血病干細(xì)胞的靶向治療[J];中華腫瘤雜志;2006年06期

9 王光平;齊振華;陳方平;;急性白血病干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];國(guó)際腫瘤學(xué)雜志;2006年08期

10 陳運(yùn)賢;朱小玉;;白血病干細(xì)胞及其靶向治療[J];腫瘤研究與臨床;2006年09期

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1 王福生;吳祖澤;;牛肝來(lái)源的抑瘤因子抑制白血病干細(xì)胞在體內(nèi)、外增殖的研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第五次會(huì)議論文摘要匯編[C];1992年

2 洪振亞;孫立石;周劍峰;;萬(wàn)珂聯(lián)用組蛋白去乙�；敢种苿┻x擇性清除白血病干細(xì)胞的研究[A];第11次中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文匯編[C];2007年

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5 王謙;侯明;;血液系統(tǒng)惡性腫瘤干細(xì)胞的理論與臨床[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

6 郭坤元;佘妙榮;牛新清;胡亮杉;賀艷杰;曲佳;鄧蘭;涂三芳;;白血病干細(xì)胞的同種異體免疫抵抗和調(diào)節(jié)[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

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1 葛秋芳;發(fā)現(xiàn)“前白血病干細(xì)胞”,“有意義”[N];新華每日電訊;2008年

2 何屹;前白血病干細(xì)胞發(fā)現(xiàn)記[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

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2 洪振亞;小分子化合物As2S2對(duì)白血病干細(xì)胞的殺傷效應(yīng)及其作用機(jī)制的初步研究[D];華中科技大學(xué);2009年

3 張秀麗;靶向白血病干細(xì)胞的抗CD3/IL3及其二硫鍵穩(wěn)定構(gòu)型的融合蛋白的構(gòu)建、表達(dá)及活性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

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5 宋永平;慢性粒細(xì)胞性白血病患者骨髓源腫瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[D];浙江大學(xué);2005年

6 支蕾;1.白血病干細(xì)胞標(biāo)志的研究 2.p53對(duì)GRO生物學(xué)作用的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

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1 龍娟;白血病干細(xì)胞對(duì)兒童急性淋巴細(xì)胞白血病的預(yù)后及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

2 馮錫武;白血病干細(xì)胞的分離培養(yǎng)和免疫相關(guān)分子表達(dá)的研究[D];石河子大學(xué);2013年

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5 武虎;用TRAIL/MN-SOD基因武裝化靶向白血病干細(xì)胞的溶瘤腺病毒對(duì)抑制白血病的研究[D];浙江理工大學(xué);2013年

6 段永濤;三氧化二砷對(duì)體外造血微環(huán)境中白血病干細(xì)胞表面粘附分子的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

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