本文關鍵詞：金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型相關炎癥因子表達的調(diào)控作用

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【摘要】：呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Viral, RSV)是近些年來在世界范圍內(nèi)能夠引起嬰幼兒下呼吸道感染最重要的病毒病原,其所致的肺炎臨床癥狀較重,病死率較高,因此受到高度關注。RSV感染機體后能夠使參與細胞免疫的T輔助細胞Th1/Th2的比例失衡,誘導相關細胞因子的表達,造成機體的免疫損害。RSV是Toll樣受體(Toll-like receptors)重要的配體,能夠誘導TLRs信號轉導通路的活化,引起下游諸如IL-6、IL-8和IL-1β等細胞因子的分泌。導師汪受傳教授研制的金欣口服液在前期的臨床和實驗研究中中被證實具有抗RSV感染和調(diào)節(jié)免疫等作用,其有效單體白藜蘆醇亦有抗病毒的作用。因兩者拮抗RSV感染的作用機制目前尚不明確,因此,本研究擬從RSV活化誘導的Toll樣受體信號轉導通路入手,探討金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型相關炎癥因子表達的調(diào)控作用,推測其在分子免疫學方面抗RSV肺炎的作用機制。 目的： 1觀察RSV體內(nèi)外感染模型IL-6、IL-8、IL-1β表達水平,探討其在免疫學方面的作用機理。 2觀察金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型IL-6、IL-8、IL-1p表達水平的調(diào)控作用,探討其在免疫學方面抗RSV感染的作用機理。 方法： 本實驗采用實驗動物學、細胞培養(yǎng)學、分子免疫學、ELISA法檢測BALB/c小鼠肺泡灌洗液IL-1β及hep-2細胞上清IL-6和IL-8的含量變化。實驗數(shù)據(jù)采用Excel和SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計。 結果： 1體內(nèi)實驗：RSV感染BALB/c小鼠24h后IL-1β的表達量較之于正常組顯著增加(P0.01),金欣高預防組和等效預防組均能下調(diào)其表達且以等效預防組的下調(diào)作用更為明顯(P0.01)；當RSV感染BALB/c小鼠72h后,IL-1β的表達量較之于正常組也顯著增加(P0.05),但較24h的表達量稍有減少。金欣治療組下調(diào)IL-1p表達的作用,兩個高劑量組IL-1β的含量較之于RSV模型組也有所下降,但無統(tǒng)計學意義(P0.05)；RSV感染BALB/c小鼠144h后IL-1β的表達量較之于24h、72h顯著減少,但表達量仍高于正常組,而金欣口服液的兩個劑量治療組則均能下調(diào)其表達。 2體外實驗：①RSV感染Raw264.7細胞24h后上清中檢測到IL-1β的表達量極低；②RSV感染hep-2細胞后24h時,RSV感染模型組中IL-6和IL-8的表達量均顯著增高(P0.01)；金欣組IL-6(P0.05)和IL-8(P0.01)的表達均低于RSV感染組；白藜蘆醇50μmol/L組均能顯著下調(diào)IL-6(P0.01)和IL-8(P0.05)的高表達,25μmol/L組IL-6和IL-8的含量也有所降低,但無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論： 1.金欣口服液能夠減輕RSV感染的BALB/c小鼠肺部及全身炎癥反應。 2.金欣口服液及白藜蘆醇均能夠下調(diào)RSV感染的體內(nèi)外模型中IL-6、IL-8、IL-1p的高表達,并將其調(diào)控在接近于正常范圍,由此推測兩者可能為拮抗RSV感染的作用機制之一。
【關鍵詞】：金欣口服液 呼吸道合胞病毒 白藜蘆醇 白介素-6 白介素-8 白介素-1β
【學位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R272
【目錄】：

• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 緒論12-13
• 第一部分 文獻研究13-22
• 1 中醫(yī)學對RSV肺炎的認識13-17
• 1.1 病名溯源13
• 1.2 病因13-14
• 1.3 病機14-15
• 1.4 現(xiàn)代辨證分型研究15
• 1.5 治則治法15-16
• 1.6 現(xiàn)代中醫(yī)藥抗RSV感染的研究進展16-17
• 2 西醫(yī)學對RSV肺炎的研究進展17-19
• 2.1 RSV的生物學特性17-18
• 2.2 關于RSV的病原學研究18
• 2.3 RSV的流行病學研究18
• 2.4 抗RSV感染的藥物18-19
• 3 金欣口服液及白藜蘆醇抗RSV的研究19-22
• 3.1 臨床研究及成果19-20
• 3.2 實驗研究及成果20-21
• 3.3 白藜蘆醇抗RSV的作用研究21-22
• 第二部分 研究思路22-23
• 第三部分 實驗研究23-35
• 1 實驗材料23-25
• 1.1 病毒23
• 1.2 細胞23
• 1.3 動物23
• 1.4 藥物23
• 1.5 試劑及溶液23-24
• 1.6 儀器與設備24-25
• 2 實驗方法與步驟25-31
• 2.1 金欣口服液、利巴韋林含藥血清制備及白藜蘆醇、利巴韋林溶液配制25
• 2.2 含藥血清及藥物的最大無毒濃度測定25-26
• 2.3 RSV的體外擴增與滴度測定26-27
• 2.4 體外實驗27-28
• 2.5 體內(nèi)實驗28-29
• 2.6 hep-2細胞TLR3免疫熒光細胞標本的制備29-30
• 2.7 金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型相關炎癥因子表達的影響30-31
• 3 實驗結果31-35
• 3.0 金欣口服液對RSV感染Raw264.7細胞IL-1β表達的影響31
• 3.1 金欣口服液對RSV感染的BALB/c小鼠IL-1β表達的調(diào)控作用31-32
• 3.2 金欣口服液及白藜蘆醇對RSV感染hep-2細胞IL-6和IL-8的調(diào)控作用32-33
• 3.3 金欣口服液對RSV感染的hep-2細胞TLR3蛋白表達的比較33
• 3.4 RSV感染后24h、72h及144h時的肺組織病理切片結果33-35
• 第四部分 討論與總結35-38
• 1 討論35-36
• 2 總結36-37
• 2.1 動物模型的選擇36
• 2.2 金欣口服液及白藜蘆醇抗RSV感染的可能的作用機制36
• 2.3 實驗的創(chuàng)新性36-37
• 3 不足與展望37-38
• 附錄38-42
• 參考文獻42-45
• 英文縮略詞表45-46
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文46-47
• 致謝47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：549456