本文關(guān)鍵詞：金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型相關(guān)炎癥因子表達(dá)的調(diào)控作用

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【摘要】：呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Viral, RSV)是近些年來在世界范圍內(nèi)能夠引起嬰幼兒下呼吸道感染最重要的病毒病原,其所致的肺炎臨床癥狀較重,病死率較高,因此受到高度關(guān)注。RSV感染機(jī)體后能夠使參與細(xì)胞免疫的T輔助細(xì)胞Th1/Th2的比例失衡,誘導(dǎo)相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),造成機(jī)體的免疫損害。RSV是Toll樣受體(Toll-like receptors)重要的配體,能夠誘導(dǎo)TLRs信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化,引起下游諸如IL-6、IL-8和IL-1β等細(xì)胞因子的分泌。導(dǎo)師汪受傳教授研制的金欣口服液在前期的臨床和實(shí)驗研究中中被證實(shí)具有抗RSV感染和調(diào)節(jié)免疫等作用,其有效單體白藜蘆醇亦有抗病毒的作用。因兩者拮抗RSV感染的作用機(jī)制目前尚不明確,因此,本研究擬從RSV活化誘導(dǎo)的Toll樣受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路入手,探討金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型相關(guān)炎癥因子表達(dá)的調(diào)控作用,推測其在分子免疫學(xué)方面抗RSV肺炎的作用機(jī)制。 目的： 1觀察RSV體內(nèi)外感染模型IL-6、IL-8、IL-1β表達(dá)水平,探討其在免疫學(xué)方面的作用機(jī)理。 2觀察金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型IL-6、IL-8、IL-1p表達(dá)水平的調(diào)控作用,探討其在免疫學(xué)方面抗RSV感染的作用機(jī)理。 方法： 本實(shí)驗采用實(shí)驗動物學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)、分子免疫學(xué)、ELISA法檢測BALB/c小鼠肺泡灌洗液IL-1β及hep-2細(xì)胞上清IL-6和IL-8的含量變化。實(shí)驗數(shù)據(jù)采用Excel和SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計。 結(jié)果： 1體內(nèi)實(shí)驗：RSV感染BALB/c小鼠24h后IL-1β的表達(dá)量較之于正常組顯著增加(P0.01),金欣高預(yù)防組和等效預(yù)防組均能下調(diào)其表達(dá)且以等效預(yù)防組的下調(diào)作用更為明顯(P0.01)；當(dāng)RSV感染BALB/c小鼠72h后,IL-1β的表達(dá)量較之于正常組也顯著增加(P0.05),但較24h的表達(dá)量稍有減少。金欣治療組下調(diào)IL-1p表達(dá)的作用,兩個高劑量組IL-1β的含量較之于RSV模型組也有所下降,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；RSV感染BALB/c小鼠144h后IL-1β的表達(dá)量較之于24h、72h顯著減少,但表達(dá)量仍高于正常組,而金欣口服液的兩個劑量治療組則均能下調(diào)其表達(dá)。 2體外實(shí)驗：①RSV感染Raw264.7細(xì)胞24h后上清中檢測到IL-1β的表達(dá)量極低；②RSV感染hep-2細(xì)胞后24h時,RSV感染模型組中IL-6和IL-8的表達(dá)量均顯著增高(P0.01)；金欣組IL-6(P0.05)和IL-8(P0.01)的表達(dá)均低于RSV感染組；白藜蘆醇50μmol/L組均能顯著下調(diào)IL-6(P0.01)和IL-8(P0.05)的高表達(dá),25μmol/L組IL-6和IL-8的含量也有所降低,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1.金欣口服液能夠減輕RSV感染的BALB/c小鼠肺部及全身炎癥反應(yīng)。 2.金欣口服液及白藜蘆醇均能夠下調(diào)RSV感染的體內(nèi)外模型中IL-6、IL-8、IL-1p的高表達(dá),并將其調(diào)控在接近于正常范圍,由此推測兩者可能為拮抗RSV感染的作用機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：金欣口服液 呼吸道合胞病毒 白藜蘆醇 白介素-6 白介素-8 白介素-1β
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R272
【目錄】：

• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 緒論12-13
• 第一部分 文獻(xiàn)研究13-22
• 1 中醫(yī)學(xué)對RSV肺炎的認(rèn)識13-17
• 1.1 病名溯源13
• 1.2 病因13-14
• 1.3 病機(jī)14-15
• 1.4 現(xiàn)代辨證分型研究15
• 1.5 治則治法15-16
• 1.6 現(xiàn)代中醫(yī)藥抗RSV感染的研究進(jìn)展16-17
• 2 西醫(yī)學(xué)對RSV肺炎的研究進(jìn)展17-19
• 2.1 RSV的生物學(xué)特性17-18
• 2.2 關(guān)于RSV的病原學(xué)研究18
• 2.3 RSV的流行病學(xué)研究18
• 2.4 抗RSV感染的藥物18-19
• 3 金欣口服液及白藜蘆醇抗RSV的研究19-22
• 3.1 臨床研究及成果19-20
• 3.2 實(shí)驗研究及成果20-21
• 3.3 白藜蘆醇抗RSV的作用研究21-22
• 第二部分 研究思路22-23
• 第三部分 實(shí)驗研究23-35
• 1 實(shí)驗材料23-25
• 1.1 病毒23
• 1.2 細(xì)胞23
• 1.3 動物23
• 1.4 藥物23
• 1.5 試劑及溶液23-24
• 1.6 儀器與設(shè)備24-25
• 2 實(shí)驗方法與步驟25-31
• 2.1 金欣口服液、利巴韋林含藥血清制備及白藜蘆醇、利巴韋林溶液配制25
• 2.2 含藥血清及藥物的最大無毒濃度測定25-26
• 2.3 RSV的體外擴(kuò)增與滴度測定26-27
• 2.4 體外實(shí)驗27-28
• 2.5 體內(nèi)實(shí)驗28-29
• 2.6 hep-2細(xì)胞TLR3免疫熒光細(xì)胞標(biāo)本的制備29-30
• 2.7 金欣口服液及白藜蘆醇對RSV體內(nèi)外感染模型相關(guān)炎癥因子表達(dá)的影響30-31
• 3 實(shí)驗結(jié)果31-35
• 3.0 金欣口服液對RSV感染Raw264.7細(xì)胞IL-1β表達(dá)的影響31
• 3.1 金欣口服液對RSV感染的BALB/c小鼠IL-1β表達(dá)的調(diào)控作用31-32
• 3.2 金欣口服液及白藜蘆醇對RSV感染hep-2細(xì)胞IL-6和IL-8的調(diào)控作用32-33
• 3.3 金欣口服液對RSV感染的hep-2細(xì)胞TLR3蛋白表達(dá)的比較33
• 3.4 RSV感染后24h、72h及144h時的肺組織病理切片結(jié)果33-35
• 第四部分 討論與總結(jié)35-38
• 1 討論35-36
• 2 總結(jié)36-37
• 2.1 動物模型的選擇36
• 2.2 金欣口服液及白藜蘆醇抗RSV感染的可能的作用機(jī)制36
• 2.3 實(shí)驗的創(chuàng)新性36-37
• 3 不足與展望37-38
• 附錄38-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 英文縮略詞表45-46
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文46-47
• 致謝47

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：549456