本文關(guān)鍵詞：Notch4通路與LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈損傷關(guān)系的初步探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 借助于LCWE誘導(dǎo)的川崎病冠狀動(dòng)脈炎的小鼠模型,探究Notch4信號(hào)通路在川崎病免疫性冠狀動(dòng)脈炎中的作用。 方法： 干酪乳桿菌購自CICC(中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心),取對(duì)數(shù)生長期細(xì)菌用于所有實(shí)驗(yàn)。 第一部分：LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈炎動(dòng)物模型的建立 干酪乳桿菌首先在MRS broth中培養(yǎng)24小時(shí),SDS過夜裂解細(xì)菌,依次加入RNase, DNase和胰酶,超聲處理破碎細(xì)胞,離心取上清,使用硫酸-苯酚比色法檢測上清液中糖總量。向BALB/c小鼠腹腔注射LCWE0.5ml(處理組)和PBS0.5ml(對(duì)照組),3天、7天、14天及28天后處死小鼠,取心臟和脾臟用4%多聚甲醛中常規(guī)固定,HE染色觀察心臟和脾臟的病理變化。使用Real-time PCR技術(shù)檢測脾臟Thl/Th2細(xì)胞因子譜的變化。 第二部分：Notch4通路與LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈損傷關(guān)系 3天、7天、14天及28天摘除小鼠眼球取血,先后加入cd34-eFlour66010ul,Flk-1FITC2ul, Notch4-PE5ul, cd45-PE-Cy5.50.5ul孵育,上機(jī)檢測外周血單個(gè)核細(xì)胞中EPCs含量及其表面Notch4表達(dá)情況。設(shè)計(jì)引物GAPDH、Notch4、RBP-JK、 vcam-1和P-selectin,使用Real-time PCR技術(shù)檢測胸主動(dòng)脈、心肌組織Notch4、 RBP-JK、vcam-1和P-selectin mRNA表達(dá)情況。使用免疫組化技術(shù)檢測胸主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈起始部vcam-1和P-selectin表達(dá)情況。 結(jié)果： 第一部分：LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈炎動(dòng)物模型的建立 1.3天時(shí)實(shí)驗(yàn)組小鼠體重明顯減輕。 2.心肌HE染色顯示各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組冠狀動(dòng)脈及其分支靠血管外膜處出現(xiàn)炎癥細(xì)胞浸潤。 3.實(shí)驗(yàn)組脾臟大體觀察脾臟體積增大,重量增加,HE染色發(fā)現(xiàn)各時(shí)間點(diǎn)主要以脾小體增生,融合。 4.實(shí)驗(yàn)組除IL-6外,其他Thl/Th2細(xì)胞因子表達(dá)量顯著增加。 第二部分：Notch4和RBP-JK與冠狀動(dòng)脈損傷相關(guān) 1.LCWE注射3天小鼠外周血循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞的含量顯著高于對(duì)照組,14天時(shí)實(shí)驗(yàn)組EPCs含量低于對(duì)照組；LCWE注射7天EPCs表面Notch4表達(dá)量明顯高于對(duì)照組。 2.14天,28天實(shí)驗(yàn)組胸主動(dòng)脈P-selectin mRNA和RBP-JK mRNA表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組,P-selectin與RBP-JK,Notch4與vcam-1顯著相關(guān)；心肌中P-selectin與RBP-JK顯著相關(guān)。 3.實(shí)驗(yàn)組冠狀動(dòng)脈起始部血管內(nèi)皮細(xì)胞vcam-1表達(dá)除7天外,各時(shí)間點(diǎn)表達(dá)均不同程度升高,其中以3天組升高最為明顯；胸主動(dòng)脈中段實(shí)驗(yàn)組3,7天vcam-1表達(dá)高于對(duì)照組,但表達(dá)強(qiáng)度不及3天冠脈起始部；實(shí)驗(yàn)組P-selectin冠脈起始部14天,28天表達(dá)高于對(duì)照組,胸主動(dòng)脈中段14天時(shí)強(qiáng)于對(duì)照組。 結(jié)論： 1.循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞Notch4信號(hào)通路參與了LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈炎的發(fā)生和發(fā)展。 2.血管內(nèi)皮細(xì)胞Notch4信號(hào)通路與LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈損害有關(guān)。 3.血管內(nèi)皮細(xì)胞Notch4信號(hào)通路的改變影響了冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的功能。
【關(guān)鍵詞】：川崎病 Notch4 RBP-JK 循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞 血管細(xì)胞粘附分子-1 P選擇素
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R725.4
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-11
• 英文縮寫詞與中英文索引11-12
• 目次12-13
• 1 引言13-17
• 2 材料與方法17-29
• 2.1 材料17-19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-29
• 3 結(jié)果29-41
• 3.1 一般情況29
• 3.2 病理學(xué)變化29-30
• 3.3 脾細(xì)胞Th1/Th2 mRNA表達(dá)30-31
• 3.4 循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞及其表面Notch4表達(dá)量變化31-32
• 3.5 胸主動(dòng)脈及心肌P-selectin、RBP-JK、vcam-1、Notch4 mRNA表達(dá)32-36
• 3.6 胸主動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈起始部vcam-1及P-selectin免疫組化36-41
• 4 討論41-44
• 5 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 綜述48-60
• 參考文獻(xiàn)57-60
• 作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果60

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：Notch4通路與LCWE誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈損傷關(guān)系的初步探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：499563