新生期母嬰分離致大鼠海馬細(xì)胞凋亡的信號(hào)機(jī)制
本文關(guān)鍵詞:新生期母嬰分離致大鼠海馬細(xì)胞凋亡的信號(hào)機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的建立新生期母嬰分離大鼠模型,觀察母嬰分離對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中凋亡的影響和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、小窩蛋白-1(Caveolin-1)的表達(dá),初步探討新生期母嬰分離導(dǎo)致大鼠成年后行為發(fā)育異常的可能機(jī)制。 方法新生Wistar大鼠48只,隨機(jī)分為分離組(N)和對(duì)照組(C),每組24只,N組和C組每組又分為三個(gè)亞組,,各8只。N組于出生后第2~21d每天與母鼠分離3小時(shí)(8:00~11:00am),C組不做任何處理,生后一直與母鼠同籠。在出生后第7d、14d和21d斷頭處死大鼠并取其大腦,固定后作冠狀面石蠟切片。采用原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)各組海馬區(qū)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡情況,免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連結(jié)(streptavidin-peroxidase,SP)法檢測(cè)組織半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和小窩蛋白-1(Caveolin-1)的表達(dá)。應(yīng)用Image-Pro Plus (IPP)6.0圖像分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化圖像作半定量分析。 結(jié)果⑴以出現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn), TUNEL陽(yáng)性凋亡細(xì)胞和Caspase-3的表達(dá)主要發(fā)生在海馬錐體細(xì)胞;Caveolin-l主要于海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。⑵TUNEL法檢測(cè)凋亡結(jié)果:C組與N組海馬TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞均以7d時(shí)最多,C組與N組均隨日齡增加TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞逐漸減少,同一時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較, N組(凋亡指數(shù)Apoptotic intex,AI:7d:22.62±0.68vs18.38±2.26;14d:12.23±0.97vs9.51±1.44;1d:8.14±0.93vs5.60±0.63)明顯增多(P0.01),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。(3)Caspase-3蛋白在大鼠海馬組織中的表達(dá):C組與N組海馬Caspase-3蛋白表達(dá)均以7d時(shí)最多,隨日齡增加而逐漸減少;同一時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較(7d:0.29±0.03vs0.24±0.01;14d:0.22±0.01vs0.18±0.02;21d:0.16±0.01vs0.13±0.01)明顯增加(P0.01),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);Caspase-3的表達(dá)分布與TUNEL染色基本一致。(4) Caveolin-1蛋白在大鼠海馬組織中的表達(dá):對(duì)照組與分離組海馬Caveolin-1蛋白表達(dá)均隨日齡增加而逐漸增多,同一時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較(7d:0.13±0.01vs0.12±0.01)無(wú)明顯減少,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);(14d:0.19±0.01vs0.22±0.01;21d:0.24±0.01vs0.29±0.01)明顯減少,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論新生期母嬰分離可導(dǎo)致大鼠發(fā)育過(guò)程中海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡和Caspase-3蛋白表達(dá)增多,小窩蛋白(Caveolin-1)表達(dá)減少,這可能與生命早期母嬰分離導(dǎo)致成年后的行為發(fā)育異常有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:母嬰分離 海馬神經(jīng)元 凋亡 半胱氨酸蛋白酶-3 小窩蛋白-1
【學(xué)位授予單位】:瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類(lèi)號(hào)】:R722.12
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-9
- 前言9-11
- 材料與方法11-17
- 結(jié)果17-21
- 討論21-30
- 結(jié)論30-31
- 附圖31-34
- 參考文獻(xiàn)34-42
- 英文縮寫(xiě)及中英文對(duì)照42-43
- 致謝43-44
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表和撰寫(xiě)的論文44-45
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:新生期母嬰分離致大鼠海馬細(xì)胞凋亡的信號(hào)機(jī)制,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):490725
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