本文關鍵詞：貴陽市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分熒光定量PCR檢測兒童NPA人偏肺病毒方法的建立目的:觀察比較實時熒光定量PCR(Real-time PCR)方法與普通反轉錄酶-聚合酶鏈鎖反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法檢測人偏肺病毒(human Metapneumovirus,h MPV)的特異性、靈敏性,以建立能準確定量檢測兒童深部鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirate,NPA)h MPV感染的分子生物學檢測方法。方法:用DNAstar軟件分析h MPV原型株及亞型的基因片段,找出相對保守的基因位點,根據(jù)保守基因位點分別設計出針對h MPV F基因的引物及探針,建立檢測h MPV F基因的Real-time PCR方法,并同時根據(jù)引物設計原則設計RT-PCR的引物,對兩種方法的特異性、靈敏性、重復性以及是否實用于兒童深部鼻咽吸取物h MPV感染的檢測等指標進行比較評價。結果:Real-time PCR方法能夠特異性的的檢測兒童深部鼻咽吸取物h MPV,并且能進行定量分析,定量的敏感度可達到102拷貝,比較Real-time PCR方法與RT-PCR方法,其檢出率分別為16%及9.8%,相對于Real-time PCR,RT-PCR的靈敏度及特異度分別為31.3%及94.3%。結論:Real-time PCR檢測h MPV敏感性明顯高于RT-PCR方法,為臨床開展兒童深部鼻咽吸取物h MPV感染的定量檢測及貴陽地區(qū)h MPV感染流行病學調(diào)查建立了有效的分子生物學檢測方法。第二部分貴陽市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究目的:采用已建立的Real-time PCR方法檢測貴陽地區(qū)兒童急性下呼吸道感染(Acute lower respiratory tract infections,ALRTI)住院患兒人偏肺病毒(human Metapneumovirus,h MPV)感染情況,并對h MPV感染的流行病學特點和臨床特征進行總結分析。方法:收集2014年1月~2014年12月全年間500例ALRTI患兒深部鼻咽吸取物(nasopharyngeal aspirate,NPA)和2ml靜脈血標本,Real-time PCR方法對NPA進行h MPV F基因檢測,陽性標本擴增產(chǎn)物行核苷酸序列測定,同時取NPA進行細菌培養(yǎng),并采用間接免疫熒光方法對血標本進行7種常見呼吸道病毒病原檢測,收集病例臨床資料進行統(tǒng)計分析。結果:500例NPA標本中共檢測到80例實時Real-time PCR陽性,陽性率16%,陽性標本測序結果與Gene Bank中h MPV同源性達91%-99%。80例h MPV陽性患兒中,感染年齡0~6歲,其中1歲以下感染率最高,6歲以上合并基礎疾病患兒也易受h MPV感染;h MPV流行特點為全年散發(fā),發(fā)病高峰出現(xiàn)在2/3/5/6/12月;h MPV感染后喘息癥狀發(fā)生率較高;h MPV可協(xié)同感染其它呼吸道病原體,當h MPV患兒協(xié)同其他病原感染時,部分病例病情較重,可表現(xiàn)為重癥肺炎。結論:h MPV是貴陽地區(qū)兒童患者急性下呼吸道感染的重要的病原體之一。
【關鍵詞】：熒光定量PCR 普通反轉錄酶-聚合酶鏈鎖反應 人偏肺病毒 兒童 急性下呼吸道感染 人偏肺病毒
【學位授予單位】：貴陽醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R725.6
【目錄】：

• 摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 縮略詞表10-11
• 引言11-12
• 第一部分 熒光定量PCR檢測兒童NPA人偏肺病毒方法的建立12-28
• 前言12-13
• 1.研究對象13-19
• 2.材料與方法19-23
• 3.討論23-25
• 4.小結25-26
• 參考文獻26-28
• 第二部分 貴陽市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究28-48
• 前言28
• 1.材料與方法28-34
• 2.結果34-41
• 3.討論41-44
• 4.小結44-45
• 參考文獻45-48
• 綜述48-58
• 參考文獻54-58
• 作者簡歷58-59
• 致謝59-60
• 學位論文集60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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  本文關鍵詞：貴陽市500例兒童人偏肺病毒感染特征調(diào)查研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：417963