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MTHFR啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)與先天性心臟病的關(guān)系

發(fā)布時間:2025-01-14 06:59
  目的目前我們對先天性心臟病(congenital heart diseases, CHDs)的發(fā)病原因和機(jī)制了解還很少,部分文獻(xiàn)表明5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(methylene tetrahydrofolate reductase, MTHFR)基因單核苷酸多態(tài)性( single nucleotide polymorphisms ,SNPs)與CHDs的發(fā)生有關(guān),但也有文獻(xiàn)顯示基因MTHFR啟動子區(qū)域超甲基化可能在CHDs的發(fā)病中起了重要作用。本研究通過比較CHDs患兒與無出生缺陷的正常兒童MTHFR啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài),旨在了解MTHFR啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)與CHDs的關(guān)系。 方法收集先天性心臟病(CHDs)兒童外周靜脈血液標(biāo)本53例,無先天性出生缺陷的正常兒童血液標(biāo)本80例,提取外周血白細(xì)胞DNA,然后對DNA進(jìn)行亞硫酸氫鈉修飾,采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)技術(shù)通過特異性引物檢測MTHFR基因啟動子區(qū)域CpG島甲基化狀態(tài),分析MTHFR基因啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)與先天性心臟病的關(guān)系。 結(jié)果MSP分析顯示,MTHFR基因啟動子區(qū)域在病例組中完全甲基化率(2/53,...

【文章頁數(shù)】:42 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.包括解剖學(xué)和生理學(xué)兩個層面的心臟畸形發(fā)病率

圖1.包括解剖學(xué)和生理學(xué)兩個層面的心臟畸形發(fā)病率

5圖1.包括解剖學(xué)和生理學(xué)兩個層面的心臟畸形發(fā)病率[8]葉酸是甲硫氨酸再生成以及后續(xù)S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成的關(guān)鍵因子,而SAM是DNA甲基化、生成嘌呤和嘧啶以及DNA合成與修復(fù)的甲基供體,因此葉酸的缺乏或者代謝異常將會通過核酸甲基化、DNA的整合與修復(fù)等途....


圖2.MTHFR在葉酸代謝及甲硫氨酸循環(huán)中的作用[15]

圖2.MTHFR在葉酸代謝及甲硫氨酸循環(huán)中的作用[15]

也可能包括其他先天性出生缺陷[11],如CHDs,可能會影響到心臟和血管系統(tǒng)發(fā)育相關(guān)基因的功能。MTHFR不僅是脫氧尿苷一磷酸向胸腺嘧啶轉(zhuǎn)化的輔助因子,而且對DNA的合成也至關(guān)重要[12,13]?梢,MTHFR維持著核酸合成和甲硫氨酸合成對葉酸利用的平衡,因為它的底物....


圖3.MSP實驗原理示意圖

圖3.MSP實驗原理示意圖

飾后的基因序列的擴(kuò)增,亞硫酸氫鈉修飾后的基因序列進(jìn)行引物設(shè)計可rimer引物設(shè)計軟件或在線設(shè)計[28]。針對MTHFR基因啟動子區(qū)域,我們物序列,這兩對引物通過上述軟件進(jìn)行設(shè)計,對MTHFR啟動子區(qū)域甲分析。引物序列如下:Methylated)THFRmetF5'-A....


圖4.MSP產(chǎn)物凝膠成像結(jié)果

圖4.MSP產(chǎn)物凝膠成像結(jié)果

18圖4.MSP產(chǎn)物凝膠成像結(jié)果注:A、B為對照組;C、D為病例組M表示甲基化;U表示非甲基化Marker:50bp;Marker1:100bp(A)對照組中檢測到完全非甲基化序列69例,占所有對照組標(biāo)本的86.25%(B)對照組中檢測到2例完全甲基化....



本文編號:4026578

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