目的:通過檢測先天性巨結(jié)腸(Hirschprung's disease,HSCR)組織中長鏈非編碼RNA-母系表達基因3(Lnc RNA-MEG3)啟動子甲基化情況,并在細胞模型中對p53/p21信號通路進行調(diào)控,探討MEG3啟動子甲基化對p53/p21信號通路的調(diào)控作用在先天性巨結(jié)腸發(fā)病中的機制。方法:對診斷明確30例HSCR患兒的狹窄段、吻合段分別采用免疫組織化學(xué)染色(IHC)、熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q RT-PCR)、免疫蛋白印跡(Western blot)、甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)和直接測序法檢測p53基因的表達和MEG3基因啟動子甲基化情況。應(yīng)用MEG3過表達和沉默質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SK-N-BE(2)細胞株,設(shè)立MEG3過表達(MEG3-OE)組、MEG3抑制組(MEG3-KD)及空白(NC)組,3組細胞分別加入甲基化抑制劑氮雜胞苷(5-aza-Cd R),應(yīng)用CCK-8、凋亡實驗觀察3組細胞增殖、凋亡情況,q RT-PCR、Western blot方法觀察p21的表達情況。結(jié)果:(1)IHC:p53主要表達在HSCR腸壁的黏膜下神經(jīng)叢、肌間神經(jīng)叢和腺上皮細胞的胞核,陽性表...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述 先天性巨結(jié)腸相關(guān)信號通路研究進展
    參考文獻
致謝
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本文編號：4015201