目的:通過實時熒光定量PCR(Real-time quantitative Polymerase chain reaction,Real-time PCR)及二代測序(Next-generation sequencing,NGS)兩種檢測方法,對支氣管異物及肺炎支原體肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患兒肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中Th1、Th2兩類細胞因IL-4、IFN-γ的RNA表達進行研究,明確機體感染肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae,MP)后細胞免疫平衡中Th1/Th2平衡的變化,進而評估Th1/Th2失衡后對MPP病情變化的影響,從而探討MPP發(fā)病機制,尤其是局部免疫學機制。方法:第一部分:選取31例因病情需要行纖維支氣管鏡檢查、治療的住院患兒,根據(jù)入選及分組標準,分為輕癥MPP、重癥MPP及對照組三組,入院3天內(nèi)收集患兒肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)樣本,并在BALF中提取總RNA,應用實時熒光定量PCR檢測...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1二代測序原理示意圖(引自Illumina公司公開資料)1.7.1.2Solexa測序技術(shù)簡要流程首先獲取待測雙鏈DNA，經(jīng)過末端修飾加A堿基和接頭，再通過片段化及PCR擴增獲得成幾百堿基或更短的小片段，篩選合適大小的DNA，然后構(gòu)建文庫及質(zhì)檢，最后進....

圖1.2Solexa建庫測序步驟流程圖1.7.2二代測序技術(shù)的臨床應用當今生物科技迅速發(fā)展，生物信息檢測技術(shù)也隨之應運而生，由于需求不二代測序技術(shù)的出現(xiàn)，不僅豐富了基因檢測技術(shù)，更重要的是為醫(yī)療等很多開創(chuàng)了新的研究方向。二代測序技術(shù)作為分子生物學中較為先進的研究方法經(jīng)實現(xiàn)....

本文編號：4010577