<正>目的：應(yīng)用蛋白組學(xué)技術(shù)從整體角度研究呼吸道上皮細(xì)胞受 MP 感染后細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的變化, 比較正常狀態(tài)與受 MP 感染后 A549細(xì)胞蛋白表達(dá)的差異,進(jìn)一步了解呼吸道上皮細(xì)胞在 MP 感染中的作用、并為闡明 MP 感染的發(fā)病機(jī)制提供重要的理論依據(jù)。方法：采用體外實(shí)驗(yàn)的方法。用10⁷Mp 感染10⁶A549細(xì)胞,12小時(shí)后收集細(xì)胞并提取胞內(nèi)蛋白質(zhì)。通過電泳分離、銀染,并用 PDQUest

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圖2A549細(xì)胞經(jīng)MP處理12小時(shí)后，(與CONTROL相比)在相差顯微鏡

圖1MP經(jīng)培養(yǎng)十天后所形成的荷包蛋樣菌落，A是普通顯微鏡下所見，B是相差顯微鏡下所見。2.A549細(xì)胞經(jīng)MP處理后的形態(tài)改變A549細(xì)胞經(jīng)MP(MP濃度約為10，/ml，在106左右的A549細(xì)胞中加入1ml)處理12小時(shí)后，在相差顯微鏡下未發(fā)現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)改變(如圖2所示)

圖5在MALDI一ToF質(zhì)譜儀所顯示的vimen血IHomosapiens]膚指紋圖譜

差異蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定和數(shù)據(jù)庫(kù)的搜索通過膠內(nèi)胰酶消化、質(zhì)譜分析和數(shù)據(jù)庫(kù)的檢索，n個(gè)蛋白點(diǎn)得到了初步的鑒定(其余的蛋白點(diǎn)未能得到理想的結(jié)果)。圖5為其中2501蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜解析圖及數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定蛋白的詳細(xì)結(jié)果。MP處理后在A549細(xì)胞內(nèi)增多的蛋白經(jīng)鑒定分別是真核翻譯起始因子3亞單位、26....

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