目的觀察中性粒細胞在川崎病(KD)急性期的功能及S100A8/A9蛋白表達的變化,并探討其意義。方法依據(jù)納入標準和排除標準選取2006年11月至2007年7月在復旦大學附屬兒科醫(yī)院住院的KD患兒為研究對象,選取同期手術(shù)患兒為本研究對照組。通過二氫若丹明熒光染色法分析KD患兒中性粒細胞功能,并用熒光定量PCR法檢測KD患兒中性粒細胞S100A8/A9 mRNA表達。結(jié)果共納入KD患兒32例,其中男19例,女13例,年齡2個月至7歲2個月,平均(2.1±1.9)歲。冠狀動脈損害者6例,無冠狀動脈損害者26例;對照組手術(shù)患兒20例。KD急性期中性粒細胞明顯活化,使用IVIG治療后中性粒細胞活化百分比下降。KD急性期中性粒細胞S100A8/A9 mRNA的表達增加;IVIG治療后,無冠狀動脈損害患兒,S100A8/A9 mRNA表達明顯降低,冠狀動脈損害患兒S100A8/A9mRNA表達升高。結(jié)論KD急性期中性粒細胞活化,并存在相關(guān)的活化蛋白高表達,提示中性粒細胞可能參與了KD的發(fā)病機制。且在冠狀動脈損害患兒中性粒細胞S100A8/A9 mRNA持續(xù)高表達,提示中性粒細胞可能參與冠狀動脈損害。

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圖1RNA凝膠電泳條帶

圖1RNA凝膠電泳條帶入l林l隨機引物(l林g)，于70應體系:一MLV逆轉(zhuǎn)錄緩沖液2.10mMDNTP10.1MDTTI，M一Ml萬1RNasin0置于PeR擴增儀中25oClom80川滅菌注射用水混勻并分裝，用計算機輔助設計(primerpre一actin、51ooAS和51....

圖1.FCM上對中性粒細胞進行設門，門內(nèi)為中性粒細胞

學附屬兒科醫(yī)院碩士學位論文中性粒細胞DHR分析由于中性粒細胞DHR分析需要2小時內(nèi)新鮮血液，而部間內(nèi)采集故未能檢測。本研究對11例川崎病患者，16例活性檢測，其中6例川崎病患者為自身前后對照。流式細胞儀檢測中性粒細胞功能:在流式細胞儀上對中性粒細胞設門，用前向角和側(cè)向角調(diào)清晰地顯....

圖4標準品的擴增曲線

中性粒細胞中5100A8、S10OAgmRNA表達比較分析。計算機根據(jù)擴增的情況自動繪制的曲線標準品和樣本的擴增曲線、溶解曲線、標準曲線分別見圖4、圖5、圖6、圖7。(uJ﹄ou︶a。u。。se﹄lon﹂012345678910111213141516171819....

圖6樣本和標準品擴增曲線

中性粒細胞中5100A8、S10OAgmRNA表達比較分析。計算機根據(jù)擴增的情況自動繪制的曲線標準品和樣本的擴增曲線、溶解曲線、標準曲線分別見圖4、圖5、圖6、圖7。(uJ﹄ou︶a。u。。se﹄lon﹂012345678910111213141516171819....

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