發(fā)布時間：2024-03-03 11:26

　　目的:本研究旨在探討川崎病(KD)血清誘導對人冠狀動脈內皮細胞(HCAECs)的損傷作用與可能機制,以及小檗堿(BBR)的保護作用與可能機制。方法:KD急性期患兒20例,正常同年齡范圍對照組20例,KD患兒于入院治療時直接取血備檢。1、分別用健康兒童、KD患者血清標本孵育人冠狀動脈內皮細胞并分組,用小檗堿(BBR)提取液分別加入兩組細胞標本進行培養(yǎng)并分組;2、用流式細胞技術分別檢測細胞周期(G0,G1,G2,S)比例、凋亡細胞比例;3、用Western blotting檢測內皮細胞損傷標志物(THBD、VWF、EDNI)變化;4、用iTRAQ試劑標記及RPLC-MS分析法質譜檢測每組中差異表達的蛋白質;5、用Cytoscape plug-in ClueGO和ReactomeFIViz軟件檢索差異表達蛋白的相關信息;6、用Western blotting驗證KD組、健康兒童組血清培育HCAECs在BBR處理前后差異表達的蛋白質(ATF4、eIF-2α和p-eIF-2α;HSP90B1、DNAJC3、HSPG2、P4HB、VCP和HSPA5)。結果:1、流式細胞技術分析細胞凋亡結果示:加入...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.小檗堿對KD誘導的內皮細胞凋亡的影響

25圖1.小檗堿對KD誘導的內皮細胞凋亡的影響A.用流式細胞儀檢測正常細胞組或KD組以及兩組分別在小檗堿處理前后(20μ的細胞凋亡變化.B.用平均數(shù)±標準差(*P<0.05,**P<0.01,n=3)表示各組樣本的凋亡細胞變化

圖2.小檗堿對KD患兒人冠狀動脈內皮細胞細胞增殖的影響

27圖2.小檗堿對KD患兒人冠狀動脈內皮細胞細胞增殖的影響A.流式細胞結果顯示小檗堿在G0/G1期抑制細胞增殖B.用平均數(shù)±標準差(*P<0.05,**P<0.01,n=3)表示不同誘導條件下不同細胞周期細胞增殖變化

圖3.小檗堿對KD患兒血清誘導后細胞內THBD，VWF和END1表達水平的影響

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文陳曉舟2.3BR能修復KD組的細胞損傷為了探討B(tài)BR能否修復川崎病患兒血清誘導的冠狀動脈內皮細胞損傷，使用westernblot方式檢測KD組在加入BBR前后血管內皮細胞損傷標記物（THBD、VWF、EDNI）的表達變化（見圖....

圖4.KD組樣本在小檗堿處理前后差異表達的蛋白的相互關系圖

30圖4.KD組樣本在小檗堿處理前后差異表達的蛋白的相互關系圖。這個關系圖基于KEGG通路相關蛋白的功能，而且臨界值為P<0.05。A.KD組在小檗堿處理前差異表達蛋白的相關關系圖B.KD組在小檗堿處理后差異表達蛋白的相關關系圖

本文編號：3917715