目的:本研究旨在探討川崎病(KD)血清誘導(dǎo)對人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞(HCAECs)的損傷作用與可能機(jī)制,以及小檗堿(BBR)的保護(hù)作用與可能機(jī)制。方法:KD急性期患兒20例,正常同年齡范圍對照組20例,KD患兒于入院治療時(shí)直接取血備檢。1、分別用健康兒童、KD患者血清標(biāo)本孵育人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞并分組,用小檗堿(BBR)提取液分別加入兩組細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)并分組;2、用流式細(xì)胞技術(shù)分別檢測細(xì)胞周期(G0,G1,G2,S)比例、凋亡細(xì)胞比例;3、用Western blotting檢測內(nèi)皮細(xì)胞損傷標(biāo)志物(THBD、VWF、EDNI)變化;4、用iTRAQ試劑標(biāo)記及RPLC-MS分析法質(zhì)譜檢測每組中差異表達(dá)的蛋白質(zhì);5、用Cytoscape plug-in ClueGO和ReactomeFIViz軟件檢索差異表達(dá)蛋白的相關(guān)信息;6、用Western blotting驗(yàn)證KD組、健康兒童組血清培育HCAECs在BBR處理前后差異表達(dá)的蛋白質(zhì)(ATF4、eIF-2α和p-eIF-2α;HSP90B1、DNAJC3、HSPG2、P4HB、VCP和HSPA5)。結(jié)果:1、流式細(xì)胞技術(shù)分析細(xì)胞凋亡結(jié)果示:加入...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.小檗堿對KD誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響

25圖1.小檗堿對KD誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響A.用流式細(xì)胞儀檢測正常細(xì)胞組或KD組以及兩組分別在小檗堿處理前后(20μ的細(xì)胞凋亡變化.B.用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(*P<0.05,**P<0.01,n=3)表示各組樣本的凋亡細(xì)胞變化

圖2.小檗堿對KD患兒人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響

27圖2.小檗堿對KD患兒人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響A.流式細(xì)胞結(jié)果顯示小檗堿在G0/G1期抑制細(xì)胞增殖B.用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(*P<0.05,**P<0.01,n=3)表示不同誘導(dǎo)條件下不同細(xì)胞周期細(xì)胞增殖變化

圖3.小檗堿對KD患兒血清誘導(dǎo)后細(xì)胞內(nèi)THBD，VWF和END1表達(dá)水平的影響

遵義醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文陳曉舟2.3BR能修復(fù)KD組的細(xì)胞損傷為了探討B(tài)BR能否修復(fù)川崎病患兒血清誘導(dǎo)的冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷，使用westernblot方式檢測KD組在加入BBR前后血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷標(biāo)記物（THBD、VWF、EDNI）的表達(dá)變化（見圖....

圖4.KD組樣本在小檗堿處理前后差異表達(dá)的蛋白的相互關(guān)系圖

30圖4.KD組樣本在小檗堿處理前后差異表達(dá)的蛋白的相互關(guān)系圖。這個(gè)關(guān)系圖基于KEGG通路相關(guān)蛋白的功能，而且臨界值為P<0.05。A.KD組在小檗堿處理前差異表達(dá)蛋白的相關(guān)關(guān)系圖B.KD組在小檗堿處理后差異表達(dá)蛋白的相關(guān)關(guān)系圖

本文編號：3917715