目的探討應(yīng)激誘導(dǎo)蛋白Sestrin2,對(duì)新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)后神經(jīng)細(xì)胞自噬作用及其機(jī)制。方法選擇80只新生10日齡SD大鼠(受試鼠)為研究對(duì)象。對(duì)其中60只建立HIBD模型,并根據(jù)這60只受試鼠缺氧缺血(HI)后的處死時(shí)間點(diǎn),將其分別納入HI后4、8、12、24、72 h組(除HI后24 h組為20只受試鼠外,其余均為10只)。對(duì)剩余的20只受試鼠僅分離右頸總動(dòng)脈,既不結(jié)扎右頸總動(dòng)脈,亦不進(jìn)行缺氧處理,處死時(shí)間對(duì)應(yīng)于HI后24 h組,納入假手術(shù)組(n=20)。①對(duì)HI后4、8、12、24、72 h組及假手術(shù)組(各組受試鼠均為10只),獲取海馬組織標(biāo)本后,采用蛋白質(zhì)印跡法,檢測(cè)Sestrin2、肝酶B1(LKB1)、磷酸化LKB1(p-LKB1)、AMP活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、自噬相關(guān)蛋白Beclin1、微管相關(guān)蛋白1輕鏈(LC)3及凋亡相關(guān)蛋白活化型天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶(CC)3在受試鼠海馬組織中的相對(duì)表達(dá)量,并采用方差分析及最小顯著性差異(LSD)-t法,...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 研究對(duì)象
    1.2 方法
        1.2.1 動(dòng)物模型造模
        1.2.2 分組及檢測(cè)項(xiàng)目
        1.2.3 受試鼠海馬組織標(biāo)本制備
        1.2.4 蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)蛋白質(zhì)相對(duì)表達(dá)量
        1.2.5 免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)各蛋白質(zhì)表達(dá)水平
        1.2.6 數(shù)據(jù)采集
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法
2 結(jié)果
    2.1 6組受試鼠海馬組織中各蛋白相對(duì)表達(dá)量比較及其蛋白質(zhì)印跡法電泳圖
    2.2 受試鼠海馬組織免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果
3 討論



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