目的:探討細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）1/2和核轉(zhuǎn)錄因子-кB（NF-кB）在膽紅素誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡過程中的作用。方法:無菌條件下,取17-19日胎齡的SD大鼠的海馬組織,原代培養(yǎng)8天,神經(jīng)元鑒定及純度測定后完全隨機法分為3組:處理組（膽紅素處理神經(jīng)元）、抑制組（ERK1/2抑制劑PD98059+膽紅素）以及對照組（加DMSO）。采用改良噻唑藍(lán)比色法（MTT法）和Hoechst33342DNA染色法,觀察各組細(xì)胞存活率及形態(tài)學(xué)特征;流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡;免疫細(xì)胞化學(xué)檢測NF-кB蛋白的表達(dá)。結(jié)果:（1）處理組細(xì)胞存活率（85.418±1.406）%,明顯低于對照組的（99.990±2.782）%,而高于抑制組的（63.951±1.148）%（ P<0.01）;（2）處理組細(xì)胞凋亡率（20.767±1.662）% ,明顯高于對照組（4.2±1.058）%,而低于抑制組（35.167±1.041）（P<0.01）;（3）處理組海馬神經(jīng)細(xì)胞中亞單倍體DNA（4.15%）,明顯高于對照組的（1.62%）,而低于抑制組的（5.38%）;（4）處理組NF-кB蛋白光密度值、... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Hoechst33342DNA染色法檢測各組細(xì)胞凋亡（×400）

25圖 4 Hoechst33342DNA 染色法檢測各組細(xì)胞凋亡（×400）Figure 4. Comparison of cell apoptosis inhippocampal neurons of different groups（×400）A 對照組 B 處理組 C 抑制組圖 6 流式細(xì)胞儀檢測凋亡細(xì)胞【含亞二倍DNA 的細(xì)胞為凋亡細(xì)胞（藍(lán)色部分，箭頭示）】Figure 6. Quantitative determination apoptosis by flow cytometric DNA analyfollowing propidium iodide staining. [Cwith subdiploid DNA content (indicated bule and arrows) represent apoptotic cells]A 對照組 B 處理組 C 抑制組

圖 7 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測各組海馬神經(jīng)細(xì)胞 NFigure 7. Comparison of the expression of NF-（×400）A 對照組 B 處理組 C 抑制組

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高壓氧對膽紅素腦病新生鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡和學(xué)習(xí)記憶的影響[J]. 谷獻(xiàn)芳,華子瑜.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2009(18)
[2]小腦延髓池注射膽紅素溶液建立新生大鼠膽紅素腦病模型的評價[J]. 胡影,田巧紅,華子瑜,徐天鶴.  重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2008(02)
[3]細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶在局灶性腦缺血中的表達(dá)[J]. 張曉燕,楊金升,谷有全,石向群.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2007(02)
[4]膽紅素誘導(dǎo)原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量的變化及MgSO4的拮抗作用[J]. 賁曉明,秦玉明,陳舜年,孫安陽,吳圣楣.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2000(04)
[5]新生大鼠海馬神經(jīng)元在無血清培養(yǎng)液中的生長特性[J]. 丁愛石,王福莊.  細(xì)胞生物學(xué)雜志. 1993(02)



本文編號：3619591