目的:探討非缺失型遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白綜合征（Non-deletional hereditary persistence of fetal hemoglobin,nd-HPFH）對(duì)血紅蛋白E（Hemoglobin E,Hb E）及血紅蛋白E復(fù)合β-地中海貧血（Hb E/β-地中海貧血）臨床特征的影響。方法:病例來源于2016年1月至2017年12月期間在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診進(jìn)行地中海貧血篩查及基因檢測(cè)的病例。對(duì)病例進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè);應(yīng)用高效液相色譜法（High performance liquid chromatography,HPLC）進(jìn)行血紅蛋白分析;應(yīng)用跨越斷裂點(diǎn)聚合酶鏈反應(yīng)（Gap-polymerase chain reation,gap-PCR）進(jìn)行缺失型α-地中海貧血基因型檢測(cè);應(yīng)用熒光PCR熔解曲線法進(jìn)行非缺失型α-地中海貧血及β-地中海貧血基因型檢測(cè);應(yīng)用DNA測(cè)序法進(jìn)行γ-珠蛋白基因啟動(dòng)子分析。結(jié)果:1.一般資料:共檢出76例Hb E雜合子,其中36例復(fù)合nd-HPFH;共檢出34例Hb E/β-地中海貧血,其中18例復(fù)合nd-HPFH。年齡1^6<... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

本研究所采取的技術(shù)路線圖

α-地中海貧血是由于α-珠蛋白基因缺陷或缺失導(dǎo)致缺失型α-珠蛋白鏈合成受部分或完全抑制而產(chǎn)生遺傳性溶血性疾病。α-地中海貧血分為缺失型α-地中海貧血與非缺失型α-地中海貧血。缺失型α-地中海貧血主要為α-珠蛋白基因的大片段缺失導(dǎo)致，應(yīng)用 gap-PCR 技術(shù)對(duì)病例樣本進(jìn)行缺失型α-地中海貧血基因型檢測(cè)。gap-PCR 的原理是：在已知的缺失序列兩側(cè)序設(shè)計(jì)出一對(duì)互補(bǔ)的引物，在正常人的 DNA 序列中，由于這一對(duì)上下游引物之間的 DNA 序列相距較遠(yuǎn)，擴(kuò)增的序列很長(zhǎng)或擴(kuò)增序列超出所擴(kuò)增的有效范圍，導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物不能生成；然而當(dāng)存在缺失時(shí)，原來引物之間相距較大的距離，因?yàn)閿喽诉B接而使上下游引物靠近，本來擴(kuò)增不出擴(kuò)增產(chǎn)物的 PCR反應(yīng)得以成功擴(kuò)增出特異的條帶，原理示意圖見圖 2。以人類已知基因組DNA 作為模板，采用單管四重 PCR 技術(shù)檢測(cè)三種最常見的缺失型α-地中海貧血，包括-α3.7、-α4.2、--SEA三種。具體操作步驟如下：

圖 3 缺失型α-地中海貧血基因分析結(jié)果分別為 2000bp，1800bp，1200bp，800bp； A：正常人（缺失型α-地中海貧血（--SEA）。Figure 3 Results of deletional α-thalassemia gene mutationsm are 2000bp，1800bp，1200bp and 800bp; A: Normal individeletional α-thalassemia(--SEA).

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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