目的：研究昆明地區(qū)2002～2004年210例輪狀病毒性腸炎患兒的輪狀病毒分子基因特征。 方法：收集昆明醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2002年、2003年、2004年9月～12月兒科住院部和門診的急性腸炎患兒的糞便標(biāo)本210份。采用聚丙烯酰胺凝膠（PAGE）電泳法檢測輪狀病毒基因組，用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）以及巢式—聚合酶鏈反應(yīng)（net-PCR）對五種主要的VP7的血清型（G1、G2、G3、G4和G9）進(jìn)行分型。并采用RT-PCR對VP7陽性標(biāo)本進(jìn)行NSP4（非結(jié)構(gòu)蛋白4）的基因擴增，選取30份標(biāo)本用net-PCR擴增出NSP4 cDNA 500bp并送去測序。測序結(jié)果用DNA assist軟件包進(jìn)行翻譯，并用直接計數(shù)法和x²檢驗來處理數(shù)據(jù)。 結(jié)果：1、用PAGE電泳法檢測的210份標(biāo)本中，輪狀病毒基因陽性有143份，檢出率為68％；其中長型143份（100％），未發(fā)現(xiàn)短型和混合型。2、143份PAGE陽性標(biāo)本有134份可以用RT-PCR擴增VP7基因全長，占93.7％，其中G1、G2、G3、G4、G9血清型檢出率分別是28.4％（38／134），... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

尺VVP7的電泳圖形

04K44株的NSp4序列

圖504K50株的NSp4序列對測序的堿基序列用DNAassist軟件包進(jìn)行翻譯，結(jié)果顯示NSP4cDNA位，137位，139位氨基酸有變異，其變異位點為-VI，R一S，-VI。三年表4所示。

【參考文獻(xiàn)】：
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