Smad/c-Jun氨基末端激酶與尿道下裂發(fā)生相關(guān)性和調(diào)控機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間：2021-12-24 18:24
目的：尿道下裂（hypospadias）是一種常見的泌尿生殖系統(tǒng)畸形，在不同種族，新生兒發(fā)病率大約在1/（200～300），并呈逐年上升趨勢(shì)。目前手術(shù)矯治是其唯一的治療方法，但是，任何一種矯治方式均會(huì)伴有顯著的并發(fā)癥以及造成患兒可能的精神心理陰影。為此，本研究擬從尿道下裂患者和尿道下裂動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究?jī)蓚�(gè)方面來探討Smad和JNK信號(hào)與尿道下裂發(fā)生的相關(guān)性和調(diào)控機(jī)制；為進(jìn)一步防治尿道下裂奠定科學(xué)基礎(chǔ)。方法：1．臨床研究：收集重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院泌尿外科病房行尿道修復(fù)術(shù)尿道下裂患兒（32例）術(shù)中切除的包皮組織，分為輕中型尿道下裂組（16例），重型尿道下裂組（16例）。同時(shí)設(shè)立正常對(duì)照組：為我院泌尿外科門診行包皮環(huán)切術(shù)兒童（32例）術(shù)中切除的包皮組織，各組取材均為陰莖遠(yuǎn)端包皮組織，尿道下裂輕中型組、重型組與正常對(duì)照組年齡匹配。分別應(yīng)用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（q-PCR）、免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)免疫印跡法（western blotting）檢測(cè)各組包皮組織中Smad和JNK信號(hào)的表達(dá)水平。2．動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究1).建立尿道下裂動(dòng)物模型：SD孕鼠40只，完全隨機(jī)分成4組：大豆油對(duì)照組和鄰苯二甲酸二（2...
【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】：92 頁
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
Smad7標(biāo)準(zhǔn)曲線建立Fig.1.1.StandardcurveofSmad7
3 例（9.3%），冠狀溝和溝下型 6 例（18.8%），陰莖體型 7 例（21.9%）；剩下 16例為重型尿道下裂，包括陰莖根型 11 例（34.4%），陰囊型和會(huì)陰型 5 例（15.6%）。2.2 Smad7/3/2 在包皮組織中的表達(dá)2.2.1 熒光實(shí)時(shí)定量 PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立調(diào)整反應(yīng)體系、反應(yīng)時(shí)間和退火溫度，建立合格的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖 1.1～1.3），建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)底物 cDNA 模板可以用正常包皮的也可以用尿道下裂包皮組織的。本研究，統(tǒng)一用正常兒童包皮組織 cDNA 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。評(píng)價(jià)合格的 q-PCR 需要滿足：a. PCR擴(kuò)增效率在90%-110%范圍；b. R2（說明兩數(shù)值之間的相關(guān)程度）>0.99，說明兩個(gè)數(shù)值之間相關(guān)的可信度很好；c. 溶解曲線呈高聳單峰，說明擴(kuò)增體系好，無非特異性擴(kuò)增，引物設(shè)計(jì)的特異性較好。本研究設(shè)計(jì)的引物及其相關(guān)擴(kuò)增參數(shù)均符合上述條件，均可以作為目的基因 PCR 檢測(cè)的參數(shù)。
q-PCR分析正常兒童包皮和尿道下裂患兒包皮中Smad7，Smad3，Smad2mRNA的表
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯誘導(dǎo)大鼠尿道下裂及對(duì)陰莖TGF-β1、TGF-βR3表達(dá)的影響[J]. 陳柏林,劉星,吳盛德,袁心剛,何昀,徐明燈,劉東堯,溫晟,魏光輝. 生殖與避孕. 2011(02)
[2]大鼠孕期染鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)子代神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響[J]. 羅芬蘭,蔡文琴,張吉強(qiáng). 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(11)
[3]鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯對(duì)原代培養(yǎng)小鼠胚胎睪丸Leydig細(xì)胞功能影響研究[J]. 宋曉峰,魏光輝,鄧永繼,陳璇,劉星,張德迎. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(12)
[4]鄰苯二甲酸二丁酯誘導(dǎo)尿道下裂大鼠模型的建立及其作用機(jī)制[J]. 張煒,袁琳,吳婷,賀厚光,龔永光,王心如. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2005(02)
[5]Role of JNK activation in apoptosis:Adouble-edged sword[J]. Jing LIU, Anning LIN* Ben May Institute for Cancer Research, The University of Chicago, 5841 S. Maryland Avenue, MC 6027, Chicago, IL 60637, USA. Cell Research. 2005(01)
本文編號(hào)：3550973
【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】：92 頁
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
Smad7標(biāo)準(zhǔn)曲線建立Fig.1.1.StandardcurveofSmad7
3 例（9.3%），冠狀溝和溝下型 6 例（18.8%），陰莖體型 7 例（21.9%）；剩下 16例為重型尿道下裂，包括陰莖根型 11 例（34.4%），陰囊型和會(huì)陰型 5 例（15.6%）。2.2 Smad7/3/2 在包皮組織中的表達(dá)2.2.1 熒光實(shí)時(shí)定量 PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立調(diào)整反應(yīng)體系、反應(yīng)時(shí)間和退火溫度，建立合格的標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖 1.1～1.3），建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)底物 cDNA 模板可以用正常包皮的也可以用尿道下裂包皮組織的。本研究，統(tǒng)一用正常兒童包皮組織 cDNA 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。評(píng)價(jià)合格的 q-PCR 需要滿足：a. PCR擴(kuò)增效率在90%-110%范圍；b. R2（說明兩數(shù)值之間的相關(guān)程度）>0.99，說明兩個(gè)數(shù)值之間相關(guān)的可信度很好；c. 溶解曲線呈高聳單峰，說明擴(kuò)增體系好，無非特異性擴(kuò)增，引物設(shè)計(jì)的特異性較好。本研究設(shè)計(jì)的引物及其相關(guān)擴(kuò)增參數(shù)均符合上述條件，均可以作為目的基因 PCR 檢測(cè)的參數(shù)。
q-PCR分析正常兒童包皮和尿道下裂患兒包皮中Smad7，Smad3，Smad2mRNA的表
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯誘導(dǎo)大鼠尿道下裂及對(duì)陰莖TGF-β1、TGF-βR3表達(dá)的影響[J]. 陳柏林,劉星,吳盛德,袁心剛,何昀,徐明燈,劉東堯,溫晟,魏光輝. 生殖與避孕. 2011(02)
[2]大鼠孕期染鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)子代神經(jīng)干細(xì)胞增殖分化的影響[J]. 羅芬蘭,蔡文琴,張吉強(qiáng). 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(11)
[3]鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯對(duì)原代培養(yǎng)小鼠胚胎睪丸Leydig細(xì)胞功能影響研究[J]. 宋曉峰,魏光輝,鄧永繼,陳璇,劉星,張德迎. 第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(12)
[4]鄰苯二甲酸二丁酯誘導(dǎo)尿道下裂大鼠模型的建立及其作用機(jī)制[J]. 張煒,袁琳,吳婷,賀厚光,龔永光,王心如. 中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2005(02)
[5]Role of JNK activation in apoptosis:Adouble-edged sword[J]. Jing LIU, Anning LIN* Ben May Institute for Cancer Research, The University of Chicago, 5841 S. Maryland Avenue, MC 6027, Chicago, IL 60637, USA. Cell Research. 2005(01)
本文編號(hào)：3550973
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/eklw/3550973.html
最近更新
教材專著
