新生兒缺氧缺血性腦病會(huì)導(dǎo)致新生兒終身認(rèn)知和神經(jīng)行為功能障礙,腦白質(zhì)損傷是其重要的病理學(xué)特征,但目前尚無有效的治療手段來促進(jìn)腦白質(zhì)區(qū)的髓鞘再生、減輕神經(jīng)損傷。有研究表明組胺H₂受體（H₂R）在腦白質(zhì)損傷相關(guān)的實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性腦脊髓炎中發(fā)揮作用,并且其在胚胎發(fā)育后期就開始表達(dá),提示H₂R可能參與新生兒缺氧缺血性腦病中的腦白質(zhì)損傷。本課題將利用藥理學(xué)、條件性H₂R基因敲除小鼠(Hrh2^fl/fl)、病毒介導(dǎo)的過表達(dá)或干擾表達(dá)等手段,探究H₂R在新生小鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷中的作用。本課題首先考察H₂R拮抗劑對新生小鼠缺氧缺血引起的腦白質(zhì)損傷、以運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知能力的影響,發(fā)現(xiàn)H₂R拮抗劑對新生小鼠缺氧缺血后的腦白質(zhì)脫髓鞘沒有明顯影響,但能促進(jìn)髓鞘再生,改善小鼠在轉(zhuǎn)棒、新事物識(shí)別和莫里斯水迷宮等實(shí)驗(yàn)中的運(yùn)動(dòng)功能和認(rèn)知障礙,并且以上作用可以被H₂R激動(dòng)劑所逆轉(zhuǎn)。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)H₂R拮抗劑可以顯... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

2R拮抗劑增加了新生小鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷后的軸突髓鞘化比例

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文3實(shí)驗(yàn)結(jié)果21在莫里斯水迷宮實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷手術(shù)組在水迷宮實(shí)驗(yàn)的前期訓(xùn)練探索過程中的潛伏期明顯長于假手術(shù)組小鼠，給予兩種H2R拮抗劑的小鼠其潛伏期明顯縮短，與假手術(shù)組相比均無顯著性差異，而聯(lián)合給予H2R激動(dòng)劑amthamine可以逆轉(zhuǎn)這種改善作用（圖3C）。在測試期，給予H2R拮抗劑的小鼠穿越目標(biāo)象限次數(shù)與在目標(biāo)象限內(nèi)探索的時(shí)間百分比均顯著高于手術(shù)組和聯(lián)合給予Amth組（圖3D、E）。各組小鼠的平均游泳速度相似（圖3F），表明小鼠的游泳運(yùn)動(dòng)能力并未受影響。綜上表明，H2R拮抗劑還可以減輕新生小鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷后的運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力和認(rèn)知功能的障礙，而這種改善作用可以被H2R激動(dòng)劑所逆轉(zhuǎn)。圖3.H2R拮抗劑緩解了新生小鼠缺氧缺血性腦白質(zhì)損傷后運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知功能障礙。Neonatemiceweresubjectedtounilateralcommoncarotidarteryligationplusinhalationalhypoxia.Afterhypoxiaandischemia(HI),micewereadministratedwithH2Rantagonistscimetidine(Cim,20mg/kg/d)orzolatidine(Zol,10mg/kg/d)ortogetherwithagonistamthamine(Amth,5mg/kg/d).(A)Motorcoordinationevaluatedbylatencytofallfromarotatingcylinderat28dafterHI.(B-F)Cognitivebehaviorwasevaluatedbydiscriminationindexinobjectrecognitiontest(B)andMorriswatermazetest(C-F)from28dto35dafterHI.(C)Latencytoreachtheplatformduringtheacquisitiontrial.(D)Crossingnumberand(E)thepercentofsearchingtimeinthequadrantSW(target

浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文3實(shí)驗(yàn)結(jié)果22quadrant)intheprobetrial.(F)Averagespeedintheprobetrial.n=8-10miceforeachgroupinbehaviorexperiments.Alldataareexpressedasmeans±SEM.**P<0.01vs.Sham;#P<0.05,##P<0.01vs.HI+Saline;&P<0.05,&&P<0.01vs.HI+Cim.3.3H2R拮抗劑促進(jìn)缺血缺氧性腦白質(zhì)損傷后少突膠質(zhì)細(xì)胞的分化白質(zhì)損傷后，在髓鞘再生的早期階段，鄰近的少突膠質(zhì)前體細(xì)胞OPCs被大量募集增殖，并向損傷區(qū)或脫髓鞘部位遷移，進(jìn)而分化為成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞包繞軸突，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)[37,38]。因此，OPCs的增殖、遷移和分化是髓鞘再生過程中的重要節(jié)點(diǎn)。為了進(jìn)一步研究H2R拮抗劑的作用機(jī)制，我們用特異性膜表面硫酸軟骨素蛋白NG2標(biāo)記少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞（OPCs），O4標(biāo)記分化階段的少突膠質(zhì)細(xì)胞，DAPI標(biāo)記細(xì)胞核。結(jié)果發(fā)現(xiàn)缺血缺氧術(shù)后第7天，腦白質(zhì)胼胝體中NG2標(biāo)記的OPCs數(shù)量較假手術(shù)組顯著增加，給予H2R拮抗劑后對OPCs數(shù)量沒有明顯改變（圖4A、B）。在術(shù)后第14天觀察O4標(biāo)記的分化階段少突膠質(zhì)細(xì)胞（圖4C、D），結(jié)果發(fā)現(xiàn)，缺氧缺血手術(shù)后分化階段少突膠質(zhì)細(xì)胞明顯減少，給予H2R拮抗劑能夠顯著增加分化的少突膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量，而該結(jié)果可以被H2R激動(dòng)劑amthamine逆轉(zhuǎn)。以上結(jié)果提示H2R拮抗劑可以通過促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞分化，進(jìn)而促使髓鞘再生、白質(zhì)修復(fù)。圖4.H2R拮抗劑通過調(diào)節(jié)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分化階段促進(jìn)髓鞘再生。Neonatemiceweresubjectedtounilateralcommoncarotidarteryligationplusinhalationalhypoxia.Afterhypoxiaandischemia(HI),micewereadministratedwithH2R

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Histamine Excites Rat GABAergic Ventral Pallidum Neurons via Co-activation of H1 and H2 Receptors[J]. Miao-Jin Ji,Xiao-Yang Zhang,Xiao-Chun Peng,Yang-Xun Zhang,Zi Chen,Lei Yu,Jian-Jun Wang,Jing-Ning Zhu.  Neuroscience Bulletin. 2018(06)
[2]Clobenpropit改善大鼠海馬局部腦血流的作用（英文）[J]. 陳忠.  Acta Pharmacologica Sinica. 2001(04)



本文編號(hào)：3548158