研究背景:腺病毒是導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)疾病的重要病原之一,在全世界范圍內(nèi)分布廣泛。在導(dǎo)致兒童呼吸道感染的病原中,腺病毒至少占5%-10%。在兒童肺炎中,腺病毒肺炎約占4%-10%,新生兒和幼兒感染腺病毒的肺炎發(fā)生率達(dá)20%以上。腺病毒引起的肺部及全身炎癥反應(yīng)較其他病毒更重,腺病毒肺炎兒童中,14%-60%的腺病毒肺炎患兒出現(xiàn)肺部相關(guān)后遺癥。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)90余種腺病毒血清型。文獻(xiàn)表明:不同國家或地區(qū)、不同時期流行的腺病毒型別存在差異。目前對腺病毒感染也缺乏精準(zhǔn)的檢測手段,腺病毒型別與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性也不十分明確。目的:（1）建立人腺病毒熒光定量PCR（qPCR）檢測方法;（2）分析深圳地區(qū)兒童呼吸道疾病中腺病毒感染的發(fā)生情況與亞型分布;（3）分析腺病毒感染患兒的病毒學(xué)特征與臨床特征以及兩者的相關(guān)性。研究對象和方法:（1）招募因急性呼吸道感染在深圳市第三人民醫(yī)院就診的門診或住院兒童（≤14歲）;（2）建立腺病毒qPCR檢測方法,并對患兒樣本進(jìn)行腺病毒檢測;（3）對腺病毒陽性的樣本,用Hep-2細(xì)胞進(jìn)行病毒分離,對分離的病毒株和未能培養(yǎng)成功的原始樣本進(jìn)行Hexon基因PCR擴(kuò)增測序,并系統(tǒng)發(fā)... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人腺病毒梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品qPCR擴(kuò)增曲線

14CPE>90%（圖3.3B）。144例陽性樣本共計132例成功分離病毒。圖3.2人腺病毒qPCR擴(kuò)增標(biāo)準(zhǔn)曲線AB圖3.3正常Hep-2細(xì)胞和感染腺病毒后Hep-2細(xì)胞（放大倍數(shù)40×10）3.3人腺病毒Hexon基因PCR產(chǎn)物鑒定將Hexon基因的PCR產(chǎn)物進(jìn)行核酸電泳鑒定，以一個電泳圖為例，“1-23”為待測樣本，“C”為陰性對照，目的條帶的大小符合預(yù)期，陰性對照沒有擴(kuò)增（圖3.4）。144例陽性樣本中，共141份成功完成Hexon基因擴(kuò)增。圖3.4Hexon基因（1000bp）瓊脂糖凝膠電泳

14CPE>90%（圖3.3B）。144例陽性樣本共計132例成功分離病毒。圖3.2人腺病毒qPCR擴(kuò)增標(biāo)準(zhǔn)曲線AB圖3.3正常Hep-2細(xì)胞和感染腺病毒后Hep-2細(xì)胞（放大倍數(shù)40×10）3.3人腺病毒Hexon基因PCR產(chǎn)物鑒定將Hexon基因的PCR產(chǎn)物進(jìn)行核酸電泳鑒定，以一個電泳圖為例，“1-23”為待測樣本，“C”為陰性對照，目的條帶的大小符合預(yù)期，陰性對照沒有擴(kuò)增（圖3.4）。144例陽性樣本中，共141份成功完成Hexon基因擴(kuò)增。圖3.4Hexon基因（1000bp）瓊脂糖凝膠電泳


本文編號：3516761