目的支氣管肺發(fā)育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）是早產(chǎn)兒常見的慢性肺部疾病,BPD的發(fā)生與機械通氣及長期吸入高濃度氧密切相關(guān)。CCAAT增強子結(jié)合蛋白α（CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα）在肺發(fā)育及成熟等過程中作為關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮重要作用。本研究首先利用早產(chǎn)大鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞（Alveolar typeⅡEpithelial Cell,AECⅡ）,探討高氧暴露對C/EBPα、肺泡表面活性蛋白A（SP-A）、SP-B、SP-C、SP-D表達及細胞增殖的影響;同時利用人AECⅡ細胞株,研究過表達C/EBPα對高氧暴露后AECⅡ增殖、凋亡及SP-C的影響,明確C/EBPα在高氧肺損傷中的作用。方法SD雌雄大鼠交配,雌鼠孕20 d-21 d時腹腔注射麻醉藥后,剖宮取出胎鼠,分離純化AECⅡ,進行原代培養(yǎng)。利用95%O₂構(gòu)建高氧損傷AECⅡ細胞模型作為高氧組后續(xù)實驗。將細胞隨機分為空氣對照組和高氧組。兩組細胞分別在培養(yǎng)的24 h、48 h及72 h進行收集。使用倒置相差顯微鏡觀察各組細胞的形態(tài)... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

空氣組和高氧組AECⅡ形態(tài)（倒置相差顯微鏡，×100）

各組AECⅡ細胞中C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C及SP-DmRNA表達Figure2.2ExpressionsofC/EBPα,SP-A,SP-B,SP-CandSP-DmRNAinAECⅡs*P<0.05vs同時間點空氣組

圖 2.3 Western blot 法檢測各組 AECⅡ中 C/EBPα 和 SP-A、SP-B、SP-C 及 SP-D 蛋白表達Figure 2.3 The expression of C/EBPα, SP-A, SP-B, SP-C and SP-D protein levels in AECⅡsA: Western blot 法檢測 AECⅡ中 C/EBPα 和 SP-A、SP-B、SP-C 及 SP-D 蛋白表達各泳道分別為(1：空氣組 24 h；2：高氧組 24 h ；3：空氣組 48 h；4：高氧組 48 h；5：空氣組 72 h；6：高氧組 72 h）B-F: AEC Ⅱ中 C/EBPα 和 SP-A、SP-B、SP-C 及 SP-D 蛋白的半定量分析*P<0.01 vs 同時間點空氣組。2.4.4 高氧暴露對 AECⅡ細胞增殖的影響采用 CCK-8 法檢測 AECⅡ細胞增殖。研究發(fā)現(xiàn)隨著培養(yǎng)時間的延長，空氣組 AECⅡ增殖不斷增加；而高氧組 AECⅡ增殖呈先遞增后遞減的趨勢，在培養(yǎng)24 h 與同時間點空氣組相比較，高氧組 AECⅡ增殖略低于空氣組，在 72 h 明顯低于同一時間的空氣組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.01）。而在 48 h時細胞增殖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子CCAAT增強子結(jié)合蛋白α的研究進展[J]. 應(yīng)霽,王偉銘.  上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2015(02)
[2]肺表面活性物質(zhì)蛋白C研究新認識[J]. 韓笑,尹曉娟.  中國兒童保健雜志. 2015(01)
[3]早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良的定義演變及其診斷[J]. 常立文.  中國實用兒科雜志. 2014(01)

碩士論文
[1]CCAAT增強子結(jié)合蛋白α在高氧肺損傷新生大鼠肺組織中的動態(tài)表達及其意義[D]. 杜志云.蘇州大學(xué) 2010



本文編號：3419237