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微滴式數(shù)字PCR定量分析新生兒的腸道菌群

發(fā)布時間:2021-09-29 23:02
  目的:研究表明新生兒出生時已攜帶大量細菌,而分娩方式是影響其早期腸道菌群建立的重要因素。目前多數(shù)研究只分析了不同分娩方式對新生兒腸道菌群結構的影響,而對新生兒腸道菌群的定量研究較少,且沒有關于產(chǎn)婦生育年齡與新生兒腸道菌群的關聯(lián)性研究。方法:采集14份新生兒胎便樣品,利用微滴式數(shù)字PCR技術對胎便中的細菌總數(shù)以及核心菌群的腸桿菌科、乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、普氏菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬和大腸桿菌進行定量研究。結果:不同分娩方式對新生兒腸道細菌總數(shù)存在顯著性差異(P<0.05),其中自然分娩新生兒腸道中腸桿菌科和乳桿菌屬的絕對含量均顯著高于剖腹產(chǎn)新生兒(P<0.05)。此外,高齡產(chǎn)婦所生新生兒腸道中鏈球菌屬的絕對含量顯著高于適齡產(chǎn)婦所生新生兒(P<0.05)。結論:產(chǎn)婦的分娩方式和生育年齡可能影響母嬰菌群的傳遞。本研究采用的微滴式數(shù)字PCR技術具有高靈敏度,可用于新生兒腸道菌群的定量檢測。 

【文章來源】:中國食品學報. 2020,20(07)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

微滴式數(shù)字PCR定量分析新生兒的腸道菌群


不同生育年齡產(chǎn)婦所生新生兒腸道菌群的絕對含量

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本研究對14名足月新生兒胎便中的細菌總數(shù)進行定量研究,發(fā)現(xiàn)所有新生兒胎便中均存在細菌,不同分娩方式新生兒胎便中的細菌總數(shù)定量結果如圖1所示,自然分娩和剖腹產(chǎn)新生兒每克胎便中的16S rRNA基因拷貝數(shù)取對數(shù)后分別為:5.49±0.20和5.23±0.14,不同分娩方式新生兒腸道總菌的絕對含量存在顯著差異,且自然分娩新生兒腸道總菌的含量顯著高于剖腹產(chǎn)新生兒(P<0.05)。2016年,Rocio等[18]利用DAPI染色法對143名不同分娩方式新生兒胎便中的細菌進行計數(shù),結果同樣發(fā)現(xiàn)自然分娩嬰兒胎便中的細菌總數(shù)顯著高于剖腹產(chǎn)嬰兒。Huurre等[19]利用熒光原位雜交技術研究嬰兒腸道微生物,結果發(fā)現(xiàn)1月齡自然分娩嬰兒腸道細菌的細胞總數(shù)平均值為9.9×109細胞/g,而剖腹產(chǎn)嬰兒腸道細菌的細胞總數(shù)平均值僅為3.1×109細胞/g,自然分娩嬰兒腸道總菌的數(shù)量同樣顯著高于剖腹產(chǎn)嬰兒;此外還發(fā)現(xiàn)自然分娩嬰兒外周血中的免疫球蛋白IgA、IgG和IgM分泌細胞總數(shù)顯著低于剖腹產(chǎn)嬰兒,而這種抗體分泌細胞總數(shù)的差異可能是由于抗原過度暴露于脆弱的腸道中導致。事實上,共生菌與腸上皮組織相互作用形成黏膜屏障,在保護腸道免受損傷方面起主要作用。在正常平衡狀態(tài)下,共生菌和病原體被特異性toll樣受體識別,并且共生菌和病原體在隨后的非炎癥和炎癥免疫反應之間存在差異。如果這種平衡被打破,那么腸上皮細胞可能以更快的速度增殖,使腸道防御屏障容易受到抗原的侵襲,這種抗原早期主要來源于食物和細菌[20]。因此,不同分娩方式可能通過影響嬰兒腸道菌群的發(fā)育,從而對嬰兒免疫功能產(chǎn)生影響。為進一步具體分析是哪種細菌使得不同分娩方式新生兒腸道菌群含量的顯著差異,本試驗利用染料法對腸道核心菌群腸桿菌科、乳桿菌屬、雙歧桿菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、普氏菌屬、鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬進行定量研究。此外,鑒于在新生兒期,定殖在腸道中的大腸桿菌是新生兒感染的主要來源,因此本研究還利用探針法對大腸桿菌進行了定量研究。

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不同生育年齡產(chǎn)婦所生新生兒胎便中的細菌定量結果如圖3所示:適齡產(chǎn)婦和高齡產(chǎn)婦所生新生兒每克胎便中的16S rRNA基因拷貝數(shù)取對數(shù)后分別為5.40±0.22和5.25±0.15。其它腸道核心菌群的定量結果如下:腸桿菌科為3.40±0.26和3.45±0.22;乳桿菌屬為:3.59±0.42和3.40±0.08;雙歧桿菌屬為:3.74±0.42和3.73±0.38;擬桿菌屬為:3.73±0.42和3.73±0.38;梭菌屬為:2.93±1.03和3.54±0.93;普氏菌屬為:4.09±0.44和4.81±0.73;鏈球菌屬為:2.57±0.89和3.15±0.49;乳球菌屬為:3.74±0.25和3.94±0.19;腸球菌屬為:1.75±1.40和1.49±2.58;大腸桿菌為:3.17±0.25和3.23±0.32。圖3 不同生育年齡產(chǎn)婦所生新生兒腸道菌群的絕對含量

【參考文獻】:
期刊論文
[1]妊娠期B族鏈球菌感染現(xiàn)狀及對母兒結局的影響[J]. 楊夢楠,花曉琳,金敏菲,周赟,顧盛奕,牟正騫,沈華祥.  現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展. 2019(03)
[2]基于性別二分類的青海天峻藏民腸道菌群差異分析[J]. 謝丹,張沐詩,陳春,烏恩奇,趙煥虎,李樹春.  中國微生態(tài)學雜志. 2018(12)
[3]不同分娩方式和喂養(yǎng)方式下嬰兒腸道菌群的分布特征[J]. 劉譽,秦勝堂,馬京梅,宋依臨,馮燁,劉飛,楊慧霞.  中華圍產(chǎn)醫(yī)學雜志. 2018 (07)
[4]維持性血液透析終末期腎病患者腸道優(yōu)勢菌群多樣性變化研究[J]. 金曉倩.  中國微生態(tài)學雜志. 2015(05)

博士論文
[1]初生嬰兒腸道菌群與母體各部位菌群相關性研究[D]. 席曉霞.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]不同分娩方式嬰兒腸道菌群對比分析[D]. 郭賀.中國人民解放軍醫(yī)學院 2014



本文編號:3414637

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