本文關鍵詞：輪狀病毒感染及伴肝損傷患兒血清中細胞因子的表達及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：輪狀病毒（RV）雖為一種自愈性疾病，但其感染人群以嬰幼兒為主，嬰幼兒免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，感染率較高，嚴重者累及全身其他器官后果嚴重。國內外研究顯示，部分RV引起腹瀉患兒外周血中可檢測到RV抗原或RV基因，證實了某些情況下RV確實可致腸道外感染。并且有動物實驗表明重癥RV感染模型組幼鼠處死后肝臟出現(xiàn)病變，同時發(fā)現(xiàn)體液免疫及細胞免疫的異常，多種細胞因子的表達變化。Th1及Th2細胞分泌的多種細胞因子在輪狀病毒感染的發(fā)病及發(fā)展中起到了重要作用。本實驗選用報道較少且與RV感染及其導致肝損傷有密切關系的幾種細胞因子：白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、腫瘤壞死因子-（TNF-）及干擾素-γ（IFN-γ）探討RV引起腹瀉及伴肝損傷的發(fā)病機制，從而為臨床診斷及治療RV感染及肝損傷提供實驗依據(jù)。 目的： 通過比較RV腹瀉患兒、RV腹瀉伴肝損傷患兒及RV腹瀉不伴肝損傷患兒和正常兒童血清中IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白表達量的變化，結合乳鼠模型中細胞因子在血清及肝組織中表達量變化，分析RV導致腹瀉及肝損傷發(fā)病過程中細胞因子發(fā)揮的作用，為嬰幼兒RV感染的治療及預防提供實驗依據(jù)。 方法： 收集去年醫(yī)院就診的嬰幼兒RV感染患兒112例，檢測其血清ALT值，將感染患兒分為RV感染伴肝損傷組53例、RV感染不伴肝損傷組59例，正常組為同期入院體檢正常兒童25例。患兒靜脈采血，ELISA試劑盒檢測血清中IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白水平。同時建立新生鼠RV腸道外感染模型，處死后眼球取血，留取肝臟組織，常規(guī)行HE染色觀察肝臟形態(tài)學變化。分別應用ELISA法及免疫組化法檢測各組乳鼠血清及肝組織中IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白水平； RT-PCR檢測肝臟中IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ mRNA水平。統(tǒng)計學分析，對比各種細胞因子表達量，判斷其與RV感染發(fā)病及導致肝損傷之間的關系。 結果： 1.患兒血清IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白表達水平檢測結果 （1）急性期RV感染患兒血清中IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白表達量均明顯升高，差異均有統(tǒng)計學意義（P0.05或P0.01）�；謴推赗V感染患兒血清中IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白表達水平略有降低，以IL-6、IL-10及IFN-γ降低最為顯著，但仍未降至正常水平。 （2）RV感染患兒中，具有中重度腹瀉癥狀者，其血清中IL-6及TNF-的蛋白表達水平較具有輕度腹瀉癥狀者顯著增加（P0.05或P0.01），而IL-10及IFN-γ的水平在不同程度腹瀉組中差異并不顯著（P0.05） （3）RV感染伴肝損傷組及RV感染不伴肝損傷組4種細胞因子蛋白表達水平均明顯高于正常組，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.05）。IL-6、IL-10及TNF-蛋白在RV伴肝損傷組的表達量明顯高于其在RV不伴肝損傷組的表達量。IFN-γ蛋白在RV伴肝損傷組及RV不伴肝損傷組的表達量未見明顯區(qū)別。 （4）RV感染重度肝損傷組IL-10及TNF-的表達較RV感染輕度肝損傷組顯著增加，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.05）。 2. RV感染乳鼠血清及肝臟IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ蛋白及mRNA表達水平檢測結果 （1）與正常組相比較，RV感染組乳鼠血清中IL-6、IL-10、TNF-α及IFN-γ蛋白表達量均呈升高趨勢。 （2）乳鼠血清及肝臟中細胞因子IL-6、IL-10、TNF-蛋白及mRNA在RV感染伴肝損傷組的表達量明顯高于在RV感染不伴肝損傷組表達量，差異具有統(tǒng)計學意義（P0.05）；IFN-γ蛋白及mRNA在以上兩組表達量無明顯區(qū)別。 結論： 1.細胞因子IL-6、IL-10、TNF-及IFN-γ均在機體輪狀病毒感染過程中發(fā)揮了重要作用。 2. IL-6及TNF-與腹瀉嚴重程度有顯著相關性，營養(yǎng)不良狀況下RV感染發(fā)病較重。 3. IL-6、IL-10及TNF-表達量與輪狀病毒感染導致的肝損傷具有顯著相關性。 4. IL-10及TNF-與肝損傷嚴重程度具有一定的相關性。
【關鍵詞】：小兒輪狀病毒 腹瀉 肝損傷 細胞因子
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R725.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-13
• 縮略詞表13-14
• 前言14-16
• 第1章 綜述16-23
• 1.1 輪狀病毒的結構簡介17-18
• 1.1.1 輪狀病毒的結構17-18
• 1.2 輪狀病毒感染的發(fā)病機制18-19
• 1.2.1 輪狀病毒感染宿主細胞的機制18
• 1.2.2 輪狀病毒引起腸道感染的機制18-19
• 1.2.3 輪狀病毒感染與細胞因子的關系19
• 1.3 輪狀病毒感染的固有免疫反應19-20
• 1.3.1 固有免疫細胞19
• 1.3.2 固有免疫分子19
• 1.3.3 補體19-20
• 1.3.4 適應性免疫反應20
• 1.4 細胞因子在 RV 發(fā)病過程中的作用20-21
• 1.5 RV 診斷及預防21-22
• 1.5.1 輪狀病毒的診斷21-22
• 1.5.2 疫苗的研究22
• 1.6 小結22-23
• 第2章 材料和儀器23-26
• 2.1 病例選擇23
• 2.2 臨床資料23-24
• 2.3 主要試劑24-25
• 2.4 主要儀器25
• 2.5 細胞株、毒株及動物25-26
• 第3章 實驗方法26-32
• 3.1 體內試驗26
• 3.2 動物實驗26-31
• 3.2.1 輪狀病毒培養(yǎng)26-27
• 3.2.2 動物模型制備27
• 3.2.3 動物一般狀況觀察及糞便輪狀病毒檢測27
• 3.2.4 標本留取27
• 3.2.5 動物實驗分組27-28
• 3.2.6 ELISA 法檢測各組乳鼠血清中各細胞因子蛋白表達28
• 3.2.7 各組乳鼠肝組織免疫組化染色28-29
• 3.2.8 RT-PCR 法檢測各組乳鼠肝組織 mRNA 的表達29-31
• 3.3 統(tǒng)計學分析31-32
• 第4章 結果32-42
• 4.1 體內實驗結果32-36
• 4.1.1 患兒的一般情況32
• 4.1.2 RV 感染不同時期患兒血清中細胞因子的表達32-33
• 4.1.3 細胞因子與腹瀉嚴重程度的相關性33-34
• 4.1.4 RV 感染伴肝損傷患兒血清中細胞因子的表達34-35
• 4.1.5 細胞因子與肝損傷嚴重程度的相關性35-36
• 4.2 動物實驗結果36-42
• 4.2.1 乳鼠感染 RV 后的一般表現(xiàn)36
• 4.2.2 各組乳鼠肝臟組織 HE 染色結果36-37
• 4.2.3 各組乳鼠血清中細胞因子的蛋白表達37-38
• 4.2.4 各組乳鼠肝組織中細胞因子的蛋白表達38-39
• 4.2.5 各組乳鼠肝臟中細胞因子 mRNA 的表達39-42
• 第5章 討論42-47
• 第6章 結論47-48
• 參考文獻48-55
• 在學期間所取得的科研成果55-56
• 致謝56

【參考文獻】

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中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號：339308