目的:呼吸道合胞病毒（RSV）是引起嬰幼兒急性下呼吸道感染最常見的病原體,并且所引起的機(jī)體免疫反應(yīng)與胃腸道微生物組成及功能的變化也息息相關(guān)。為了進(jìn)一步探索RSV感染的發(fā)病機(jī)理和對腸道菌群的影響,我們建立了一個(gè)與嬰幼兒免疫水平相似,易受病毒感染的乳鼠肺部感染模型,檢測Th17、Treg細(xì)胞、相關(guān)炎癥因子和腸道菌群的變化。本研究可為RSV感染的致病機(jī)理和機(jī)體肺-腸軸之間的聯(lián)系提供新的見解,為RSV感染患兒的治療思路提供新的認(rèn)識。方法:用RSV病毒液滴鼻感染7日齡Balb/c乳鼠建立肺部感染模型,實(shí)驗(yàn)設(shè)立正常對照組,PBS對照組和病毒感染組,收集各組乳鼠肺、小腸、結(jié)腸和直腸。（1）HE染色觀察肺部的病理學(xué)改變;（2）實(shí)時(shí)熒光定量PCR法（Real-time PCR）檢測各組肺、小腸,結(jié)腸組織中RSV-F蛋白,ROR-γt和Foxp3 m RNA的表達(dá)變化;（3）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測各組肺、小腸和結(jié)腸組織上清液中IFN-γ,IL-17,IL-22,IL-10和RegⅢγ含量的變化情況;（4）高通量測序檢測直腸組織中菌群的變化。結(jié)果:（1）HE染色結(jié)果顯示與正常組相比,隨著病毒感染... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同實(shí)驗(yàn)組乳鼠的體重變化情況

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文263.2RSV感染后乳鼠肺組織肉眼觀及肺病理切片結(jié)果如圖2所示正常組乳鼠（A）兩肺成均勻的粉白色，表面光滑，無腫脹及出血灶；RSV感染組（B）乳鼠兩肺色暗紅，彈性較差，可見片狀充血。隨后我們對正常組（3A）和病毒感染1~7天（3B~3H）的乳鼠進(jìn)行肺病理檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常組乳鼠肺泡結(jié)構(gòu)完整，肺泡腔清晰，肺泡間隔均勻一致，無增厚，無充血及炎性細(xì)胞的浸潤。感染組乳鼠肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，肺泡間隔增厚，肺泡腔及肺間質(zhì)可見炎性細(xì)胞浸潤，并且在感染后第三天（3D）肺部炎癥最為顯著，隨后開始逐漸好轉(zhuǎn)，結(jié)果見下圖3。圖2、乳鼠肺組織肉眼觀A：正常組乳鼠肺組織；B：RSV感染組乳鼠肺組織Fig2:MacroscopicobservationoflungtissueinsucklingmiceA:Lungtissueofnormalgroup;B:lungtissueofRSVinfectedgroup

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文27圖3：乳鼠肺病理切片結(jié)果（HE×100）A：正常組乳鼠肺病理切片；B~H：RSV感染后1~7天肺病理切片F(xiàn)ig3:Resultsofpathologicalsectionoflunginsucklingmice（HE×100）A:Pathologicalsectionsoflungsinnormalgroup,B~H:pathologicalsectionsoflungs1-7daysafterRSVinfection3.3Real-timePCR檢測正常對照組與PBS對照組肺腸組織中ROR-γt與Foxp3的mRNA水平如圖4所示，PBS對照組肺腸組織中ROR-γt和Foxp3的mRNA水平與正常對照組無明顯差異，結(jié)果不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故陰性對照設(shè)置成功，后續(xù)實(shí)驗(yàn)分析將以正常對照組與RSV感染組為主。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3375699