本文關鍵詞：七味白術散對輪狀病毒感染乳鼠屏障功能保護作用的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的輪狀病毒感染小鼠的機制及產(chǎn)生腹瀉的發(fā)病原因還未得到明確證實。建立成功的乳鼠感染輪狀病毒腹瀉模型,在此基礎上研究七味白術散對感染輪狀病毒乳鼠免疫功能的調(diào)節(jié),對小腸粘膜的生物屏障、機械屏障和免疫屏障功能的影響,輪狀病毒的清除率及乳鼠臨床癥狀的改善。同時,研究七味白術散對輪狀病毒SA-11株在MA104細胞上復制的影響。材料與方法輪狀病毒在MA104細胞上培養(yǎng)和傳代,提高病毒毒力,采用熒光灶試驗檢測病毒滴度。將5日齡的Balb/c乳鼠接種滴度為4.5×107FFU/mL的輪狀病毒50 μ L,建立腹瀉模型。設立正常對照組,感染后分模型組、七味白術散組和病毒唑組,經(jīng)口灌胃給藥,連續(xù)5日,測定血清中IFN-γ、sIgA和小腸粘液中sIgA的含量,觀察乳鼠的腹瀉情況和體重變化,ELISA檢測糞便中RV抗原,判斷其對病毒的清除率。做石蠟切片用HE染色觀察小腸絨毛病理變化。采用MTT和CPE的實驗方法評價七味白術散對輪狀病毒SA-11在MA104細胞上復制的作用。結果輪狀病毒感染乳鼠的腹瀉率和腹瀉天數(shù)降低,糞便中RV抗原檢測陽性,證明輪狀病毒感染乳鼠模型的成功建立。熒光灶試驗方法能相對準確的測定病毒滴度。七味白術散能增加感染輪狀病毒乳鼠血清中IFN-γ、sIgA和小腸粘液中SIgA的含量,增強其免疫功能,減輕小鼠小腸絨毛的病理改變,恢復其屏障功能。有效緩解輪狀病毒感染乳鼠腹瀉、脫水癥狀,加快病毒從小腸的清除,降低腹瀉率、減少腹瀉天數(shù)。七味白術散在低濃度無細胞毒性的情況下可以促進細胞生長,對輪狀病毒SA-11株在MA104細胞上的復制有一定的抑制作用。結論本研究成功建立了輪狀病毒感染乳鼠模型,并在此實驗基礎上,做了七味白術散對嬰幼兒腹瀉的療效評價,針對其對小腸粘膜屏障功能的保護和恢復作用給予證實。七味白術散的體內(nèi)外實驗充分證明了其在抗輪狀病毒感染中的有效作用。
【關鍵詞】：七味白術散 輪狀病毒 腹瀉
【學位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R725.1
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-10
• 引言10-12
• 第一章 文獻綜述12-23
• 1.1 概述12-21
• 1.1.1 輪狀病毒的結構12
• 1.1.2 輪狀病毒的感染機制12-13
• 1.1.3 輪狀病毒感染的免疫反應13-18
• 1.1.4 抗輪狀病毒感染藥物研究進展18-21
• 1.2 七味白術散抗輪狀病毒研究進展21-23
• 1.2.1 嬰幼兒腹瀉的中醫(yī)病機21-22
• 1.2.2 七味白術散抗輪狀病毒機理研究現(xiàn)狀22-23
• 第二章 MA104細胞的培養(yǎng)、傳代及生長曲線23-25
• 2.1 實驗材料23
• 2.1.1 細胞株23
• 2.1.2 實驗試劑23
• 2.1.3 儀器與設備23
• 2.2 方法23-24
• 2.2.1 MA104細胞的復蘇23
• 2.2.2 MA104細胞的傳代23
• 2.2.3 測定MA104細胞生長曲線23-24
• 2.2.4 統(tǒng)計學分析24
• 2.3 結果24
• 2.3.1 MA104細胞生長曲線24
• 2.4 討論24-25
• 第三章 七味白術散對輪狀病毒SA11株在細胞上復制的抑制作用25-29
• 3.1 實驗材料25
• 3.1.1 細胞株和病毒25
• 3.1.2 藥物25
• 3.1.3 實驗試劑25
• 3.1.4 儀器與設備25
• 3.2 方法25-27
• 3.2.1 藥物的細胞毒性實驗25-26
• 3.2.2 藥物對病毒吸附細胞的影響26
• 3.2.3 藥物對病毒的直接抑制作用26
• 3.2.4 藥物對病毒合成的影響26
• 3.2.5 統(tǒng)計學分析26-27
• 3.3 結果27-28
• 3.3.1 七味白術散對MA104細胞的毒性作用27
• 3.3.2 藥物對病毒吸附細胞的影響27
• 3.3.3 藥物對病毒的直接抑制作用27-28
• 3.3.4 藥物對病毒合成的影響28
• 3.4 討論28-29
• 第四章 輪狀病毒滴度測定方法熒光灶試驗29-32
• 4.1 實驗材料29
• 4.1.1 細胞株和病毒29
• 4.1.2 實驗試劑29
• 4.1.3 實驗儀器29
• 4.2 方法29-30
• 4.2.1 MA1O4細胞的培養(yǎng)29
• 4.2.2 輪狀病毒的傳代與收集29
• 4.2.3 熒光灶試驗測定病毒滴度29-30
• 4.2.4 TCID_(50)測定病毒滴度30
• 4.2.5 統(tǒng)計學分析30
• 4.3 結果30-31
• 4.3.1 熒光灶試驗測定病毒滴度30-31
• 4.3.2 TCID_(50)測定病毒滴度31
• 4.3.3 熒光灶試驗與TCID_(50)方法比較31
• 4.4 討論31-32
• 第五章 輪狀病毒感染乳鼠模型32-35
• 5.1 實驗材料32
• 5.1.1 實驗動物來源及環(huán)境32
• 5.1.2 病毒32
• 5.1.3 實驗儀器32
• 5.1.4 實驗試劑32
• 5.2 方法32-33
• 5.2.1 動物分組32
• 5.2.2 病毒接種32
• 5.2.3 病毒接種后觀察32
• 5.2.4 乳鼠大便中RV-AG檢測32-33
• 5.2.5 統(tǒng)計學分析33
• 5.3 結果33-34
• 5.3.1 病毒接種后乳鼠反應33
• 5.3.2 乳鼠體重變化33
• 5.3.3 乳鼠腹瀉動態(tài)33-34
• 5.3.4 ELISA檢測RV抗原34
• 5.4 討論34-35
• 第六章 七味白術散對輪狀病毒感染乳鼠黏膜的保護作用35-41
• 6.1 實驗材料35
• 6.1.1 實驗動物來源及環(huán)境35
• 6.1.2 病毒35
• 6.1.3 藥物35
• 6.2 方法35-36
• 6.2.1 動物分組35
• 6.2.2 腹瀉及體重動態(tài)35
• 6.2.3 血清SIgA、IFN-γ測定35
• 6.2.4 小腸粘液SIgA測定35
• 6.2.5 小腸粘膜病理改變35
• 6.2.6 統(tǒng)計學分析35-36
• 6.3 結果36-39
• 6.3.1 乳鼠體重動態(tài)36
• 6.3.2 乳鼠腹瀉動態(tài)36
• 6.3.3 糞便中RV抗原檢測36-37
• 6.3.4 血清和小腸粘液SIgA測定37-38
• 6.3.5 血清IFN-γ的測定38
• 6.3.6 小腸粘膜病理改變38-39
• 6.4 討論39-41
• 結語41-42
• 參考文獻42-46
• 附錄46-49
• 致謝49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張華玲;周賽男;蔡瑩;郭抗蕭;佘顏;譚周進;蔡光先;;超微七味白術散對菌群失調(diào)腹瀉小鼠小腸黏膜的影響[J];中國微生態(tài)學雜志;2013年01期

  本文關鍵詞：七味白術散對輪狀病毒感染乳鼠屏障功能保護作用的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：336020