目的:使用RNA干擾技術(shù)抑制miR-155,探討miR-155對膿毒癥小鼠JAK/STAT信號通路的影響,明確miR-155是否可通過調(diào)節(jié)SOCS1而影響JAK/STAT通路減輕膿毒癥小鼠炎癥因子水平及機制。方法:采用腹腔注射內(nèi)毒素法向3-5周齡健康雄性BALB/c小鼠注射內(nèi)毒素建立膿毒癥小鼠模型,應(yīng)用miR-155抑制物尾靜脈注射進行干預(yù)。各組在建模后6,12,24,48小時留取肝臟組織標本,HE染色觀察肝組織病理變化;實時熒光定量PCR法檢測miR-155表達水平,以及STAT1mRNA,SOCS1mRNA的表達水平,ELISA法檢測肝組織TNF-α和IL-10蛋白的表達。結(jié)果:LPS組及LPS+mi R-155抑制組小鼠肝臟miR-155與對照組比較水平升高,隨病情呈動態(tài)變化,LPS+miR-155抑制組miR-155水平較LPS組下降（P<0.05）。光學顯微鏡觀察:LPS組小鼠肝組織病理損傷出現(xiàn)早,損傷程度重,LPS+miR-155抑制組病理損傷程度有減輕。LPS組及LPS+miR-155抑制組肝組織TNF-α,IL-10水平較對照組升高（P<0.05）,LPS+... 

【文章來源】：上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗流程圖

的兩倍以上，說明RNA的完整性好。凝膠電泳圖3.2.2 熔解曲線和擴增曲線分析3.2.2.1 熔解曲線分析本實驗結(jié)果顯示各PCR產(chǎn)物熔解曲線呈銳利單峰，說明PCR擴增屬特異性擴增，無引物二聚體及非特異性擴增產(chǎn)物出現(xiàn)，所獲結(jié)果可靠。擴增產(chǎn)物熔解曲線Real-Time PCR melting curves3.2.2.2 擴增曲線分析擴增曲線呈典型的S型。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]微小RNA在膿毒癥發(fā)病機制的作用研究進展[J]. 呂鑫,張育才.  中華實用兒科臨床雜志. 2014 (18)



本文編號：3303949