高氧暴露和小分子干擾RNA對A549細胞核轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子-2與NAD(P)H:醌氧化還原酶1表達的影響及其與細胞凋亡的關(guān)系
發(fā)布時間:2021-07-11 18:29
目的研究高氧暴露和小分子干擾RNA(siRNA)對A549細胞中細胞核轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子2(Nrf2)、NAD(P)H:醌氧化還原酶1(NQO1)表達的影響,探討其在高氧肺損傷中的作用及其與細胞凋亡的關(guān)系。方法將體外培養(yǎng)A549細胞隨機分為4組:Ⅰ組為無干擾空氣組;Ⅱ組為無干擾高氧組;Ⅲ組為Nrf2 siRNA轉(zhuǎn)染空氣組;Ⅳ組為Nrf2 siRNA轉(zhuǎn)染高氧組;將Ⅱ組、Ⅳ組持續(xù)暴露于常壓高濃度氧(950 mL/L O2,50 mL/L CO2)中;Ⅰ組、Ⅲ組仍置于50 mL/L CO2培養(yǎng)箱中。通過預(yù)實驗從目的基因靶點siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3(分別加入對應(yīng)脂質(zhì)體復(fù)合物)中篩選出抑制Nrf2效率最高的Nrf2 siRNA,應(yīng)用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)、Western blot分別檢測4組Nrf2、NQO1的mRNA及蛋白表達水平,應(yīng)用免疫熒光和激光共聚焦顯微鏡分析干擾Nrf2后A549細胞中Nrf2、kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(Keap1)、抗氧化物反應(yīng)元件蛋白的分布,觀察各組細胞凋亡情況。結(jié)果 1.Nrf2 siRNA可抑制Nrf2表達,siRNA-1組、s...
【文章來源】:中華實用兒科臨床雜志. 2020,35(21)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
【參考文獻】:
期刊論文
[1]高體積分數(shù)氧暴露對早產(chǎn)新生大鼠肺組織微小RNA-125b、腫瘤壞死因子-α和白細胞介素6表達的影響[J]. 張瀟月,蔡成,楚曉云,周慧琳. 中華實用兒科臨床雜志. 2019 (16)
[2]長鏈非編碼RNA人肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1在早產(chǎn)兒高氧肺損傷中的表達及意義[J]. 蔡成,龔小慧,裘剛,邱家俊,張瀟月,劉潔敏,楚曉云. 中國小兒急救醫(yī)學(xué). 2017 (10)
[3]核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2與肺部炎癥疾病研究進展[J]. 謝建林,林明寶,侯琦. 藥學(xué)學(xué)報. 2015(09)
本文編號:3278620
【文章來源】:中華實用兒科臨床雜志. 2020,35(21)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:5 頁
【參考文獻】:
期刊論文
[1]高體積分數(shù)氧暴露對早產(chǎn)新生大鼠肺組織微小RNA-125b、腫瘤壞死因子-α和白細胞介素6表達的影響[J]. 張瀟月,蔡成,楚曉云,周慧琳. 中華實用兒科臨床雜志. 2019 (16)
[2]長鏈非編碼RNA人肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1在早產(chǎn)兒高氧肺損傷中的表達及意義[J]. 蔡成,龔小慧,裘剛,邱家俊,張瀟月,劉潔敏,楚曉云. 中國小兒急救醫(yī)學(xué). 2017 (10)
[3]核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2與肺部炎癥疾病研究進展[J]. 謝建林,林明寶,侯琦. 藥學(xué)學(xué)報. 2015(09)
本文編號:3278620
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