目的:探討多重連接依賴探針擴(kuò)增技術(shù)（multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA）和定量熒光聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative fluorenscence hybridization PCR,QF-PCR）技術(shù)在臨床上檢測先天性心臟病患者22q11微缺失的可行性和適用性,建立22q11微缺失檢測的臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化流程。方法:本實(shí)驗(yàn)采用MLPA和QF-PCR技術(shù)對散發(fā)非綜合征先天性心臟病的患者進(jìn)行22q11微缺失檢測,對檢測中出現(xiàn)的單位點(diǎn)異常進(jìn)行基因測序分析,探討其臨床診斷意義。結(jié)果:1采用MLPA技術(shù)檢測87例散發(fā)非綜合征的先天性心臟病患者中有檢出3例22q11微缺失（3.4%）,2例22q11微重復(fù)（2.3%）。檢測陽性患者的臨床表現(xiàn)為:單純室間隔缺損1例（1.1%）,單純法洛四聯(lián)癥1例（1.1%）,復(fù)雜性先天性心臟病2例（2.3%）,房間隔缺損合并腭裂1例（1.1%）。2采用MLPA-P250（lot0509）試劑盒檢出4例T結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子1（T-box transcription factor 1,TBX1）和7例F... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

22q11.2核心區(qū)域的探針分布(Fig1:DistributionofMLPAprobesincorearea

圖 2：MLPA 的 Genetic Analyzer 3130 毛細(xì)管電泳峰型圖(Fig2:peak figure of capillary electrophoresis of MLPA by Genetic Analyzer 313a:陽性對照

g:22q11 微重復(fù)MLPA 的 Genetic Analyzer 3130 毛細(xì)管電泳散點(diǎn)圖。a:陽性對照，b:、d、e:22q11 微缺失，f、g:22q11 微重復(fù)。其中 SDS133，SD-P250-A1(lot0509)kit 檢出，SDS77，SDS95，SDS195 由 MLPA-P250-B1(。(Fig3:spot figure of capillary electrophoresis of MLPA by Genetic Aa:positive control; b: negative control; c、d、e:22q11 microdeletion,f、uplication. SDS133，SDS59 was detected by MLPA-P250-A1(lot0509)kit, S，SDS195 was detected by MLPA-P250-B1(lot0210) kit):5 例 22q11 微缺失/微重復(fù)患者(SDS)和 5 例對照(C1~C5)的相對拷貝數(shù)ble6: relative copy number value for 8 control probes and 18 22q11 propatients and 5 control subjects）Probe IDPatient IDSDS95 SDS195 SDS77 SDS133 SDS59 C1 C2 PPIL2 1.00 0.94 1.10 1.01 1.08 1.01 1.05 1EHMT1_1 0.92 1.08 1.14 1.05 1.04 0.85 1.00 1LC25A18 0.67 0.92 0.97 1.12 1.16 0.97 1.03 0

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)在先天性心臟病22q11微缺失/微重復(fù)綜合征診斷中的應(yīng)用[J]. 楊月華,胡婭莉,朱湘玉,莫緒明,王東進(jìn),姚金翠,盛敏,朱海燕,李潔,茹彤,王志群.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2009(11)
[2]先天性心臟病患者轉(zhuǎn)錄因子Nkx2.5基因突變觀察[J]. 李開如,丁建東,張曉黎,姚玉宇,任利群,馬根山.  山東醫(yī)藥. 2008(33)
[3]GATA-4、NKx2-5轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J]. 冉莉,文格波.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2008(15)
[4]GATA-4基因在大鼠胚胎心臟中的表達(dá)[J]. 孫鳳榮,龔杰,錢玲梅,孔祥清,盛燕輝,楊榮,曹克將.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(06)
[5]實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)快速診斷22q11微缺失[J]. 張曉青,許爭峰,易龍,郭錫熔,莫緒明,沈立,江永中.  實(shí)用兒科臨床雜志. 2006(20)
[6]人類單純性先天性心臟病患者Nkx2-5基因突變及表達(dá)的研究[J]. 孫淼,邱廣蓉,孫桂鳳,袁翼華,孫開來.  中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2001(05)
[7]臨床遺傳學(xué)的又一灰色地帶——染色體22q11.2區(qū)微重復(fù)[J]. 趙艷輝,李嶺.  中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志. 2007 (05)



本文編號：3239015