第一部分RSV感染后SARM及TRIF表達水平研究目的：RSV是引起5歲以下兒童下呼吸道感染最常見的病毒病原體。Toll樣受體（TLR）信號通路與RSV致病機制密切相關。RSV感染后可通過激活TLR-TRIF依賴的信號通路引起氣道炎癥及氣道高反應性。SARM為TRIF的負性調節(jié)因子，對RSV感染所致的氣道炎癥及氣道高反應性（AHR）影響作用尚不清楚。本實驗目的是研究RSV感染后SARM及TRIF的表達情況。方法：體外培養(yǎng)人類氣道上皮細胞株9HTEo，RSV以MOI=10感染9HTEo細胞，分別在12h、24h、36h、48h和72h后收集細胞，提取全蛋白，Western blot方法檢測感染后不同時間點SARM及TRIF的水平變化。RSV或紫外線滅活的RSV （UV RSV）感染6～8周齡雌性BALB/c小鼠感染，分別在感染的第3、5、7天處死，取小鼠肺組織，提取肺組織總蛋白，Western blot方法檢測SARM及TRIF的變化情況。利用RES進行進一步干預，將6～8周齡雌性BALB/c小鼠分為對照組、RSV+PBS組、RSV+RES組，每組各5只，感染后第5天Western bl... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

RSV+PBS組和RSV+RES組小鼠肺組織勻漿上清接種Hep-2細胞后均可見明顯

24圖 1-2 RSV 感染 9HTEo 細胞后 SARM 及 TRIF 水平的變化，感染 BABL/c 小鼠后肺組織SARM 及 TRIF 水平的變化，UV RSV 感染 BABL/c 小鼠后肺組織 SARM 水平的變化Figure 1-2 RSV reduced SARM expression in vivo and in vitro.Panel A: Cells were infected with RSV at a MOI of 10. A1: SARM and TRIF protein levelswere detected by immunoblotting at the time points indicated. A2: RSV reduced theSARM/β-actin ratio compared to the control group; *p<0.05 48h and 72h after RSV infectionvs. control. A3: RSV increased the TRIF/β-actin ratiocompared to the control group;**p<0.01 48 h after RSV infection vs. control,*p<0.05 72 h after RSV infection vs. control.Panel B: BALB/c mice were infected by live RSV at 4.5×107 pfu. The lungs of the infectedmice were harvested at days 3, 5, and 7 after infection. B1: SARM and TRIF protein levels

RES能逆轉被RSV下調的SARM,同時抑制TRIFFigure1-3SARMisafunctionalinhibitorofRSV-mediatedactivationof


本文編號：3216436