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兒童幽門螺桿菌抗生素耐藥相關(guān)基因的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-16 23:04

  本文關(guān)鍵詞:兒童幽門螺桿菌抗生素耐藥相關(guān)基因的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:研究背景:幽門螺桿菌(helicobacter pylori, Hp)不僅是成人慢性胃炎、十二指腸潰瘍、胃癌、胃黏膜相關(guān)淋巴組織瘤等疾病的重要致病因素,而且與兒童慢性胃炎、十二指腸炎、消化性潰瘍的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。Hp感染是一個(gè)全球性的問題,全世界人群感染率為50%。根除Hp已被證明可以減少胃癌的發(fā)病率,提高潰瘍愈合。但由于治療中抗生素的不合理應(yīng)用導(dǎo)致抗生素的耐藥,成為根除治療Hp失敗的主要原因。針對(duì)Hp目前廣泛使用的治療方案包括標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)療法,包括克拉霉素,阿莫西林、滅滴靈這三種主要的抗生素。最近的研究表明,潛在的抗生素耐藥性主要是由于Hp的遺傳基因突變。因此,檢測(cè)耐藥的Hp的基因突變,可以避免兒童抗生素濫用以及之后的多次耐藥。本研究旨在初步了解兒童Hp耐藥情況,并對(duì)一些抗生素的耐藥基因進(jìn)行研究。既往的耐藥研究中大多采用基于培養(yǎng)基的敏感性測(cè)試,但它們不能確定具體的基因型。隨著快速基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,應(yīng)用PCR來檢測(cè)Hp,更具有指導(dǎo)意義。本論文采用PCR的方法,研究兒童Hp耐藥菌株和敏感菌株之間的遺傳基因突變情況,以明確克拉霉素,滅滴靈和左氧氟沙星耐藥Hp菌株的基因信息。目的:研究兒童Hp耐藥株耐藥特性與相關(guān)基因突變的聯(lián)系,為兒童耐藥Hp的進(jìn)一步研究提供一定的理論依據(jù)。方法:從兒童胃黏膜樣本中分離培養(yǎng)80株Hp為出發(fā)菌株,用PCR的方法分別擴(kuò)增敏感和耐藥株的相關(guān)耐藥基因,其中克拉霉素耐藥株擴(kuò)增23 S rDNA上約280bp片段;滅滴靈耐藥株擴(kuò)增rdxA和frxA基因部分序列,左氧氟沙星耐藥株擴(kuò)增gyrA和gyrB基因部分序列。通過DNA測(cè)序和生物信息學(xué)分析相關(guān)基因的突變情況,研究基因突變與耐藥特性的內(nèi)在聯(lián)系。結(jié)果:80例Hp菌株中,克拉霉素耐藥29株,耐藥比例達(dá)到36.2%,相關(guān)耐藥基因23S rDNA突變呈無規(guī)則狀態(tài),A2056G. T 2095 C和T 2157C三個(gè)突變點(diǎn)出現(xiàn)頻率最高,分別達(dá)到90%、93%和100%,但是在敏感株中同樣出現(xiàn)了這些點(diǎn)突變。滅滴靈耐藥58株,耐藥比例72.5%,相關(guān)基因rdxA出現(xiàn)以G47A和T184G為主的突變點(diǎn),個(gè)別菌株中出現(xiàn)G60A、C273T和C49T突變點(diǎn),敏感株中同樣出現(xiàn)了T184G突變點(diǎn),但未見G47A的突變點(diǎn);frxA基因在敏感株和耐藥株中均出現(xiàn)了A48G突變點(diǎn)。左氧氟沙星耐藥12株,耐藥比例為15%,耐藥株gyrA基因出現(xiàn)的D91Y突變未在敏感株中發(fā)現(xiàn),而在敏感株和耐藥株中均出現(xiàn)了N87K突變和無義突變。結(jié)論:克拉霉素耐藥Hp的23 S rDNA突變呈無規(guī)則狀態(tài);滅滴靈耐藥Hp的rdxA基因出現(xiàn)的G47A突變可能與耐藥相關(guān);左氧氟沙星耐藥Hp的gyrA基因出現(xiàn)的D91Y的突變可能與耐藥相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:幽門螺桿菌 滅滴靈 克拉霉素 左氧氟沙星 耐藥 基因
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R725.7
【目錄】:
  • 致謝4-5
  • 中文摘要5-7
  • 英文摘要7-10
  • 中英文縮略詞表10-11
  • 主要儀器設(shè)備11-13
  • 1 前言13-15
  • 2 對(duì)象與方法15-21
  • 2.1 研究對(duì)象15
  • 2.2 要試劑15
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)方法15-21
  • 3 結(jié)果21-35
  • 3.1 克拉霉素耐藥基因23SrDNA突變情況21-24
  • 3.2 滅滴靈耐藥株rdxA和frxA基因突變情況24-30
  • 3.3 左氧氟沙星耐藥株gyrA和gyrB基因突變情況30-35
  • 4 討論35-37
  • 5 結(jié)論37-38
  • 參考文獻(xiàn)38-42
  • 綜述42-54
  • 參考文獻(xiàn)48-54
  • 作者簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間所取得的科研成果54

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 盧華君;趙忠艷;陳旺強(qiáng);朱歡;朱小舟;潘彤彤;;兒童感染幽門螺桿菌的耐藥性及治療分析[J];中國全科醫(yī)學(xué);2015年31期

2 馮青;劉偉;蘇楠;吳新榮;;純陽正氣膠囊抑制幽門螺桿菌作用研究[J];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2014年03期

3 Hafez Fakheri;Zohreh Bari;Mohsen Aarabi;Reza Malekzadeh;;Helicobacter pylori eradication in West Asia:A review[J];World Journal of Gastroenterology;2014年30期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉宇;荊花胃康膠丸及其拆方抗耐藥幽門螺桿菌作用和機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 徐艷秋;不同劑量抗生素治療幽門螺桿菌的臨床觀察及經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià)[D];石河子大學(xué);2013年

2 薛國輝;幽門螺桿菌甲硝唑耐藥相關(guān)rdxA基因突變特征及應(yīng)用探討[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2013年

3 朱曉艷;中醫(yī)辨證用藥聯(lián)合“四聯(lián)療法”對(duì)慢性胃炎伴幽門螺桿菌感染的臨床療效觀察[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

4 張新宇;序貫療法治療兒童幽門螺桿菌感染的依從性及其療效分析[D];蘇州大學(xué);2014年


  本文關(guān)鍵詞:兒童幽門螺桿菌抗生素耐藥相關(guān)基因的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):311853

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