本文關(guān)鍵詞：尿道下裂差異表達(dá)miRNA的篩選研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本研究通過篩選尿道下裂包皮組織中差異表達(dá)的mi RNA,探討mi RNA及其靶基因和信號通路在尿道下裂的發(fā)病機(jī)制中的作用,尋找尿道下裂預(yù)防和治療的新靶點(diǎn)。方法收集9例尿道下裂患兒及3例包莖患兒的包皮組織作為研究對象,其中3例尿道下裂患兒術(shù)前接受過HCG治療。分別在組織中抽提總RNA,對總RNA進(jìn)行質(zhì)量檢測,利用丹麥Exiqon公司研制的芯片篩選差異性表達(dá)的mi RNA,同時采用RT-PCR方法對芯片結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。進(jìn)一步結(jié)合生物信息學(xué)方法對mi RNA的靶基因進(jìn)行預(yù)測,并應(yīng)用DAVID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行靶基因功能富集分析和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路富集分析。探討總結(jié)與尿道下裂發(fā)病、治療和預(yù)后相關(guān)的mi RNA及其調(diào)控機(jī)制。結(jié)果1.mi RNA芯片技術(shù)篩選結(jié)果:選擇差異倍數(shù)兩倍以上、P值0.05的差異表達(dá)mi RNA進(jìn)行聚類分析。與包莖患兒比較,尿道下裂患兒包皮組織中表達(dá)上調(diào)的mi RNA共19個,表達(dá)下調(diào)的mi RNA共15個。對尿道下裂患兒術(shù)前是否應(yīng)用HCG治療也做了對比分析,術(shù)前應(yīng)用藥物較未應(yīng)用藥物患兒包皮組織中表達(dá)上調(diào)的mi RNA共25個,表達(dá)下調(diào)的mi RNA共19個。進(jìn)一步對所有包皮組織差異表達(dá)mi RNA進(jìn)行綜合分析發(fā)現(xiàn)部分mi RNA形成在尿道下裂組低表達(dá),而在包莖和尿道下裂術(shù)前應(yīng)用藥物治療組高表達(dá)。2.RT-PCR驗(yàn)證結(jié)果:選擇差異表達(dá)的10個mi RNA進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證,其中5個mi RNA得到驗(yàn)證,其差異表達(dá)趨勢與芯片結(jié)果相符,分別為let-7b-3p、mi R-145-5p、mi R-376a-3p、mi R-377-3p、mi R-1-3p。3.生物信息學(xué)結(jié)果:let-7b-3p、mi R-145-5p、mi R-376a-3p、mi R-377-3p、mi R-1-3p可能與尿道下裂發(fā)病相關(guān),靶基因?yàn)镾OX9、FGF14、FGFR2、TCF7L2、ZEB2、PAX3、SOD1、ZFPM2、THBS1、PAX6、SMAD4、DMRT2等,其功能與胚胎發(fā)育、腺體發(fā)育、性別分化和傷口愈合等相關(guān),相關(guān)信號通路為MAPK信號通路、TGFβ信號通路、Wnt信號通路、鈣信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和前列腺癌相關(guān)信號通路等。結(jié)論1.首次建立尿道下裂mi RNA基因表達(dá)譜,篩選出差異表達(dá)的mi RNA,在尿道下裂與包莖、術(shù)前是否用藥物治療的尿道下裂間獲得差異表達(dá)mi RNA,并推測mi RNA表達(dá)趨勢。2.通過構(gòu)建特異性莖環(huán)RT引物,采用實(shí)時定量PCR技術(shù),驗(yàn)證了10個差異表達(dá)mi RNA,其中5個mi RNA的RT-PCR結(jié)果與基因芯片結(jié)果相符。3.預(yù)測5個mi RNA的靶基因,并進(jìn)行靶基因功能分析,總結(jié)與尿道下裂相關(guān)的mi RNA及其作用機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：尿道下裂 mi RNA 基因芯片 RT-PCR
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R726.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 序言9-11
• 第一部分：尿道下裂差異表達(dá)MIRNA的篩選和RT-PCR驗(yàn)證11-32
• 1 材料與方法11-20
• 2 結(jié)果20-32
• 第二部分：MIRNA靶基因的生物信息學(xué)研究32-39
• 1 對象與方法32-33
• 2 結(jié)果33-39
• 討論39-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 綜述55-65
• 參考文獻(xiàn)61-65
• 英文縮略詞一覽表65-67
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文67-68
• 攻讀學(xué)位期間承擔(dān)的科研項目68-69
• 致謝69-70

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 萬清廉;范應(yīng)中;;21例尿道下裂合并其他泌尿生殖系統(tǒng)畸形的治療體會[J];河南外科學(xué)雜志;2006年02期

2 賀莉;;尿道下裂修補(bǔ)術(shù)后長期預(yù)后的影響因素[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(兒科學(xué)分冊);2006年08期

3 王文有;許玉仙;;尿道前移一期治療遠(yuǎn)端尿道下裂[J];中國社區(qū)醫(yī)師(綜合版);2007年05期

4 ;《尿道下裂學(xué)》新近出版[J];現(xiàn)代泌尿外科雜志;2008年06期

5 ;《尿道下裂學(xué)》書訊[J];中華男科學(xué)雜志;2008年12期

6 靳蕾;洪世欣;鄭俊池;章斐然;高進(jìn)吉;馮振芳;張靜波;張伯蘭;葉榮偉;;中國部分地區(qū)胎嬰兒尿道下裂的相關(guān)因素分析[J];中國生育健康雜志;2009年01期

7 ;殺蟲劑增加男嬰尿道下裂風(fēng)險[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè));2010年01期

8 唐靜;陳勇;吳文波;段智峰;饒品德;熊春鳳;王江華;;先天性尿道下裂984例診治體會[J];江西醫(yī)藥;2012年01期

9 毛宇;陳紹基;唐耘熳;王學(xué)軍;李治熹;;成人尿道下裂37例治療體會[J];實(shí)用醫(yī)院臨床雜志;2012年04期

10 戴振興;;斜行包皮島狀皮瓣尿道成形術(shù)治療尿道下裂臨床觀察[J];中國醫(yī)學(xué)工程;2012年07期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐誼朝;潘斌;郭澤雄;梁蔚波;;尿道下裂成形術(shù)后尿道裂開的處理[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國男科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

2 唐耘熳;陳紹基;王明和;;重型尿道下裂分期手術(shù)[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

3 陳太基;李強(qiáng);王偉秋;徐家杰;李森愷;沈巖;;尿道下裂病人中八個候選基因的突變篩查[A];第六次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會議文摘匯編[C];2005年

4 陳紹基;;尿道下裂診治現(xiàn)狀及手術(shù)難點(diǎn)與對策[A];貴州省醫(yī)學(xué)會小兒外科分會第四屆第二次學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

5 馬利民;葉飛;達(dá)駿;蔣躍慶;蔡志康;董國勤;張克;徐明曦;王忠;;尿道下裂的基礎(chǔ)和臨床研究[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

6 唐耘熳;陳紹基;王明和;;重型尿道下裂分期手術(shù)[A];中國西南地區(qū)第九屆小兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

7 陸文麗;董治亞;王偉;王德芬;楊青;Hsueh-Kung Lin;;基因芯片技術(shù)篩選尿道下裂患兒外周血白細(xì)胞基因表達(dá)譜的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十七次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（上冊）[C];2012年

8 葉緒龍;桂定文;張青漢;董能本;夏焱森;;復(fù)方丹參和阿司匹林在尿道下裂中的療效評價[A];第七次中國中西醫(yī)結(jié)合泌尿外科學(xué)術(shù)年會暨第二次廣東省中西醫(yī)結(jié)合泌尿外科學(xué)術(shù)年會論文集[C];2009年

9 陳太基;;尿道下裂病人中部分候選基因的突變篩查[A];江蘇省遺傳學(xué)會第八屆會員代表大會暨學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

10 李昭鑄;郭俊斌;姜大朋;崔清波;韓福友;;復(fù)雜尿道下裂病人治療中須注意的性腺異常問題[A];中華醫(yī)學(xué)會第八次全國小兒外科學(xué)術(shù)會論文集[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 原穎;尿道下裂與遺傳環(huán)境相關(guān)[N];健康報;2006年

2 江華 吳宏;談?wù)勀虻老铝鸭爸委焄N];文匯報;2003年

3 湖南省兒童醫(yī)院兒研所 祝興元;尿道下裂原因多[N];大眾衛(wèi)生報;2006年

4 健康時報記者 葉依;雌激素可能是尿道下裂誘因[N];健康時報;2006年

5 彭潛龍;尿道下裂何時手術(shù)好？[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

6 李森愷　王永前;尿道下裂[N];健康報;2007年

7 王紅梅;尿道下裂治療技術(shù)獲新突破[N];廣東科技報;2000年

8 北京煤炭總醫(yī)院主任醫(yī)師 鐘偉;尿道下裂會“無后”嗎？[N];中國人口報;2004年

9 王伊寧;中國醫(yī)科院整形外科醫(yī)院手術(shù)修復(fù)兒童重度尿道下裂[N];健康報;2006年

10 ;環(huán)境污染,貽害人類生殖健康[N];人民政協(xié)報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉星;尿道下裂發(fā)病機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2009年

2 陳太基;尿道下裂相關(guān)基因的突變研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2006年

3 王艷萍;尿道下裂相關(guān)基因的突變研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

4 劉國昌;苗勒管抑制物質(zhì)在尿道下裂發(fā)病中的作用及尿道下裂手術(shù)遠(yuǎn)期效果評價[D];華中科技大學(xué);2006年

5 熊林;尿道板縱切卷管尿道成形術(shù)在尿道下裂治療中的臨床研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

6 焦晨煒;尿道下裂手術(shù)遠(yuǎn)期效果的隨訪研究[D];山東大學(xué);2009年

7 吳意光;脫細(xì)胞膀胱粘膜下基質(zhì)在尿道下裂修復(fù)中的臨床應(yīng)用及尿道下裂病因?qū)W研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

8 李明勇;Smad/c-Jun氨基末端激酶與尿道下裂發(fā)生相關(guān)性和調(diào)控機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

9 徐家杰;尿道下裂發(fā)病相關(guān)基因突變的研究和包皮內(nèi)板全厚皮片（陰囊中厚皮片）游離移植耦合包皮島狀皮瓣治療各型尿道下裂[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

10 謝林海;尿道下裂陰莖解剖特點(diǎn)及其臨床應(yīng)用的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 錢光耀;尿道下裂患者包皮組織中雄激素受體基因啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 苑斌;尿道下裂患兒社會心理及性心理的探究[D];蘇州大學(xué);2015年

3 陳嬌;尿道下裂差異表達(dá)miRNA的篩選研究[D];蘇州大學(xué);2015年

4 劉星;尿道下裂術(shù)式臨床療效及細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

5 昝濤;陰囊筋膜蒂皮瓣修復(fù)復(fù)雜性尿道下裂[D];武漢大學(xué);2005年

6 徐江龍;不同外科皮瓣修復(fù)尿道下裂的組織愈合能力與臨床療效評價[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

7 溫都蘇;尿道下裂術(shù)式的選擇與顯微外科技術(shù)的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2013年

8 黃進(jìn);尿道下裂術(shù)后成年患者性功能、社會心理和性心理遠(yuǎn)期隨訪研究[D];四川大學(xué);2006年

9 馬隆;鄰苯二甲酸二丁酯誘導(dǎo)雄性大鼠發(fā)生尿道下裂的分子作用機(jī)制[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

10 雍江;小兒胃管原位引流在尿道下裂成形術(shù)中的應(yīng)用[D];中南大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：尿道下裂差異表達(dá)miRNA的篩選研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：309320