目的:研究新生期反復(fù)驚厥對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)白細(xì)胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)表達(dá)的影響,以及孕酮干預(yù)后大腦皮質(zhì)IL-18表達(dá)的變化,探討其間可能存在的相關(guān)性。 方法:生后7天(Postnatal day 7,PN-7d)的Sprague-Dawley(SD)大鼠共96只,隨機(jī)分成3組,每組32只,每組大鼠再隨機(jī)分成四個(gè)時(shí)間點(diǎn)。驚厥組和孕酮干預(yù)組(簡(jiǎn)稱干預(yù)組)每日吸入三氟乙醚誘導(dǎo)驚厥發(fā)作1次,每次持續(xù)30分鐘,連續(xù)6天;孕酮干預(yù)組大鼠在致驚厥后再給予肌肉注射孕酮(16mg/kg);對(duì)照組同樣操作但不吸入三氟乙醚,不給予肌肉注射孕酮。分別于PN-13d(末次驚厥后1天,afterrecurrent seizure day 1,ARS-1d)、PN-15d(末次驚厥后3天,ARS-3d)、PN-19d(末次驚厥后7天,ARS-7d)及PN-75d取每組大鼠各8只,取腦組織,分別采用免疫組織化學(xué)染色方法和Western-Blot方法觀察大鼠大腦皮質(zhì)中IL-18的表達(dá)。 結(jié)果:①免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:IL-18主要在細(xì)胞胞漿中表達(dá),在對(duì)照組大鼠中,大腦皮質(zhì)有少量IL-18蛋白表達(dá)。驚厥組大腦皮質(zhì)IL-18蛋白的表達(dá)較對(duì)照組在ARS-1d開(kāi)始升高,在ARS-7d達(dá)到高峰,后逐漸下降,在PN-75d大腦皮質(zhì)IL-18蛋白表達(dá)較對(duì)照組仍升高,驚厥組大鼠大腦皮質(zhì)IL-18蛋白的表達(dá)與對(duì)照組比較顯著上升,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。孕酮干預(yù)組各時(shí)間點(diǎn)大鼠大腦皮質(zhì)IL-18蛋白的表達(dá)較驚厥組明顯下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。②Western-Blot結(jié)果揭示:ARS-1d及ARS-3d大腦皮質(zhì)細(xì)胞胞漿IL-18蛋白結(jié)果無(wú)顯示。ARS-7d、PN-75d大腦皮質(zhì)IL-18蛋白表達(dá)能用Western-Blot測(cè)出,結(jié)果顯示:ARS-7d及PN-75d驚厥組大腦皮質(zhì)細(xì)胞胞漿IL-18蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯上升,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。孕酮干預(yù)組大腦皮質(zhì)IL-18蛋白的表達(dá)較驚厥組顯著性下降,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論:(1)反復(fù)驚厥可使大鼠大腦皮質(zhì)IL-18的表達(dá)增加。 (2)孕酮可降低反復(fù)驚厥后大腦皮質(zhì)炎癥因子IL-18的表達(dá),提示孕酮對(duì)幼鼠驚厥性腦損傷有保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R720.597
【部分圖文】：

smg/而、2.smg/llil、1.25m歲nil，在?=280nm測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)品吸光度(A280nm)，制作蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立回歸方程，依次測(cè)定各樣品A280nm，經(jīng)回歸方程求出相應(yīng)蛋白濃度(圖2)。

從S一ldARS一3dARS一7dP卜75d圖3大鼠大腦皮質(zhì)IL一1昧達(dá)的累積光密度值Fig.3TbeAODoflls戶rO貽in加“城憊口la旅權(quán)沉ofratsstem，Blot結(jié)果S一ld及ARS一d的大腦皮質(zhì)胞漿中的IL~18不能用此法測(cè)出。檢測(cè)到幾.18的表達(dá)，驚厥組大腦皮質(zhì)的幾一18表達(dá)較對(duì)照組顯義(尸叱0.01)。用孕酮干預(yù)后的大鼠，大腦皮質(zhì)IL一18的表達(dá)較統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(見(jiàn)表2)。表2各組大鼠大腦皮質(zhì)胞漿中118蛋白表達(dá)的灰度值(護(hù)呂，萬(wàn)士S，%T曲k泛Tb。孚惻v目ucsofT址。甲吹裂以班of幾.18Pr砒inin“成加址。灘讓沃ARS.ldAR冬3dAR孚7d

從S一ldARS一3dAI石ee7dPN‘75d圖4大鼠大腦皮質(zhì)幾.18蛋白表達(dá)的灰度值Fig.4T七e沙叮v日訓(xùn)路oflls林de加in“沈加公c創(chuàng)血沈ofrais
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2891200