目的探討5/6腎切除殘腎慢性腎衰幼年大鼠慢性進(jìn)展性腎小管間質(zhì)損傷過程中,轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)蛋白的表達(dá)趨勢以及其介導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)過程中相關(guān)蛋白成纖維細(xì)胞特異性蛋白-1(FSP-1)、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和E-鈣黏蛋白(E-cadherin)的動態(tài)表達(dá)趨勢,并觀察給予血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)和血管緊張素受體阻斷劑(ARB)干預(yù)治療的影響。 方法96只3~4周齡幼年雌性SD大鼠,隨機(jī)將其分為假手術(shù)組(n=32)、5/6NX未干預(yù)組(n=32)和5/6NX干預(yù)組(n=32),采用5/6腎切除法制備殘腎慢性腎衰模型,于手術(shù)完成后,經(jīng)測定大鼠腎功能及腎臟病理以評價模型是否成功。5/6NX干預(yù)組于模型成功后給予ACEI+ARB聯(lián)合灌胃。分別于第2、4、8、12周末,每組隨機(jī)選8只大鼠,于內(nèi)眥靜脈采血測血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN);處死動物,取出腎組織,同時處死假手術(shù)組大鼠,取出腎組織;石蠟切片,HE染色觀察腎小管間質(zhì)損害及纖維化程度;免疫組化法檢測腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1、E-cadherin、FSP-1、α-SMA和vimentin等各目標(biāo)蛋白質(zhì)分子的表達(dá)。 結(jié)果 ⑴HE染色顯示:假手術(shù)組大鼠腎組織無明顯變化;5/6NX未干預(yù)組大鼠隨著實驗時間的延長,腎小管間質(zhì)病變?nèi)遮吤黠@,表現(xiàn)為組織中炎性細(xì)胞(主要為單核細(xì)胞)浸潤,腎小管上皮細(xì)胞腫脹,腎小管塌陷及腎小管間隙加寬,并進(jìn)行性形成纖維化病變;5/6NX干預(yù)組大鼠小管間質(zhì)病變則相對減輕。 ⑵免疫組化染色半定量積分值顯示:5/6NX未干預(yù)組和干預(yù)組大鼠腎小管上皮細(xì)胞E-cadherin的表達(dá)隨著實驗時間的延長而逐漸減少,各時間點與假手術(shù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),第8與12周,干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而FSP-1、vimentin的表達(dá)逐漸增加,均較同期假手術(shù)組有顯著差異(P0.05),除第2周外,各時間點干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);同時,α-SMA的表達(dá)量也逐漸增加,除第2周外,各時間點5/6NX未干預(yù)組和干預(yù)組α-SMA與假手術(shù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),第8與12周干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);TGF-β1的表達(dá)量逐漸增加,除第2周外,各時間點5/6NX未干預(yù)組和干預(yù)組TGF-β1蛋白的表達(dá)量與假手術(shù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),除第2周外,干預(yù)組蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論5/6腎切除殘腎慢性腎衰幼年大鼠在其腎損傷過程中前致纖維化因子TGF-β1表達(dá)呈逐漸上調(diào)趨勢,其介導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)相關(guān)標(biāo)志蛋白FSP-1、α-SMA和vimentin的表達(dá)同步上調(diào),而E-cadherin的表達(dá)呈下降趨勢,給予ACEI和ARB干預(yù)后可逆轉(zhuǎn)這些相關(guān)蛋白分子的表達(dá)趨勢。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2009
【中圖分類】：R726.9
【部分圖文】：

各組大鼠腎組織TGF-β1蛋白表達(dá)隨時間的變化

臟層、壁層上皮細(xì)胞也有表達(dá)，而間質(zhì)、血管無表達(dá)；5/6NX 未干預(yù)組大鼠，隨著病程延長和腎臟病變的加重，E-cadherin 蛋白表達(dá)趨于下調(diào)，免疫組化陽染信號減弱，組內(nèi)時間點比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而 5/6NX 干預(yù)組大鼠殘腎組織 E-cadherin 蛋白表下降程度較未干預(yù)組明顯改善，組內(nèi)各時間點比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。各時間5/6NX 未干預(yù)組 E-cadherin 蛋白表達(dá)量與假手術(shù)組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；第 12 周 5/6NX 干預(yù)組 E-cadherin 蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見圖 3、表 4、直條圖 4、線圖 2。表 4 各組大鼠不同時間點腎組織 E-cadherin 表達(dá)免疫組化半定量值分析 （ x ± s)鼠數(shù) 第2周(%) 第4周(%) 第8周(%) 第12周(%) F值 P值假手術(shù)組 8 2.85±0.19 3.02±0.11 2.95±0.19 2.92±0.15 1.20 0.335/6NX未干預(yù)組 8 2.45±0.34 1.92±0.68 1.67±0.17 0.91±0.41 12.64 0.005/6NX干預(yù)組 8 2.54±0.14 2.34±0.44 2.23±0.14 1.80±0.62 3.77 0.02F值 4.29 9.50 85.07 31.53P值 0.03 0.00 0.00 0.00注＊表示與假手術(shù)組比較,P<0.05； 表示 5/6NX 干預(yù)組與 5/6NX 未干預(yù)組比較, P<0.05。

線圖 2 各組大鼠腎組織 E-cadherin 表達(dá)隨時間的變化3.3 腎組織各時段 FSP-1 免疫組化染色假手術(shù)組大鼠腎組織 FSP-1 有輕微的表達(dá)，組內(nèi)各時間點比較無統(tǒng)計學(xué)意義；5/6N未干預(yù)組大鼠殘腎組織 FSP-1 蛋白表達(dá)的陽性信號隨病程的延長及病情的加重，陽染信逐漸增強(qiáng)，主要見于腎間質(zhì)中，組內(nèi)各時間點比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而 5/6N干預(yù)組大鼠殘腎組織 FSP-1 蛋白表達(dá)上調(diào)趨勢較未干預(yù)組明顯改善，組內(nèi)各時間點比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。各時間點 5/6NX 未干預(yù)組與假手術(shù)組比較具有統(tǒng)計學(xué)意（P<0.05）；第 4、8 與 12 周 5/6NX 干預(yù)組 FSP-1 蛋白表達(dá)量與未干預(yù)組比較具有統(tǒng)計意義（P<0.05）。見附圖 4、表 5、直條圖 5、線圖 3。表 5 各組大鼠各時間點腎組織 FSP-1 蛋白表達(dá)免疫組化半定量分析（ x ± s)鼠數(shù) 第2周(%) 第4周(%) 第8周(%) 第12周(%) F值 P值假手術(shù)組 8 1.56±0.14 1.53±0.17 1.54±0.13 1.55±0.10 0.05 0.95/6NX未干預(yù)組 8 1.77±0.08 2.30±0.22 3.08±0.12 3.23±0.17 114.47 0.05/6NX干預(yù)組 8 1.66±0.13 1.99±0.18 2.35±0.15 2.82±0.17 59.96 0.0F值 4.59 25.15 196.89 209.40
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

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本文編號：2837617